Invention Grant

一种DNA分子克隆方法
Abstract:
以长引物和PCR为基础的分子克隆技术具有操作简单、效率高、成本低的优点。随着高保真DNA聚合酶的出现,基于PCR的分子克隆方法越来越广泛地被使用。本发明涉及一种嵌合体构建和片段插入的分子克隆策略,首次命名为MP克隆(mega primer cloning)。该方法包括以下几步:1)长引物的PCR扩增。2)长引物参与的第二轮PCR扩增。3)PCR产物DpnI消化并转化到大肠杆菌感受态中。PCR产物的纯化可以显著的提高MP克隆的效率。实验证明,这种方法是一种简单有效的分子克隆工具。
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