一种提高α‑L‑鼠李糖苷酶r‑Rha1热稳定性的方法
Abstract:
本发明公开了一种提高α‑L‑鼠李糖苷酶r‑Rha1热稳定性的方法。以原始型α‑L‑鼠李糖苷酶r‑Rha1(WT)基因为模板,采用易错 PCR 方法进行随机突变,构建该酶的突变文库,并建立了 96 孔板诱导表达及高通量筛选方法,最终获得了热稳定性提高的突变体。V529A突变体对试验使用的金属离子及效应物都具有与WT同样的耐受性。该突变体V529A具有优良的酶学性质,同时本发明也成功地构建了含上述突变体V529A的重组载体,实现了异源表达,为该酶的工业化生产和应用提供了良好的基础。
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