本发明公开了一种微生物内基于脂肪酸代谢途径三个中间产物为前体分子合成信息素脂肪醇乙酸酯的方法，其步骤为：首先通过微生物中高表达脂酰‑ACP还原酶AAR、羧酸还原酶CAR、脂酰‑CoA还原酶FAR及醛还原酶AHR，分别得到可还原脂酰‑ACP、脂肪酸或脂酰‑CoA产脂肪醇的工程菌。最后在产脂肪醇工程菌中高表达醇乙酰基转移酶ATF1，用于催化脂肪醇与乙酰辅酶A反应合成信息素脂肪醇乙酸酯。本发明可实现由葡萄糖到脂肪醇乙酸酯的微生物转化，为大规模的生物合成脂肪醇乙酸酯提供了一个可行道路。