本发明公开了一种Lightning耳机麦克风测试系统，包括电声测试仪、人工嘴、一对人工耳、路由器和具有Lightning接口的被测手机，所述的电声测试仪通过网线与路由器通信连接，所述的被测手机与路由器无线通信连接，所述的人工嘴和一对人工耳通过一具有接头的接线与所述被测手机上的Lightning接口连接，并且所述的人工嘴和一对人工耳各通过一信号线与电声测试仪通信连接，所述的被测手机内还预装载应用，所述的应用与电声测试仪通信连接。本发明利用具有Lightning接口的手机作为路由终端，完成Lightning耳机麦克风音频特性的测试，从而绕开Lightning接口协议保密的限制，采用机器测试，测试结果客观；测试效率高；测试一致性高，机器也不会疲劳；对Lightning耳机麦克风的音频特性测试更加全面。