本发明涉及一种草坪草种子组培外植体消毒的方法，包括以下步骤：A、选取需进行愈伤组织诱导的草坪草种子，将其加入浓硫酸中进行振荡处理，去除颖壳；B、将去除颖壳的草坪草种子取出，置于水中，反复清洗残留的酸液；C、将经B处理后的草坪草种子进行灭菌处理，然后清洗得无菌草坪草种子。本发明采用浓硫酸把草坪草种子外的颖壳碳化掉，再用超纯水反复冲洗，大幅节省手工剥除或用砂布打磨去除种子颖壳的时间，且草坪草种子愈伤组织诱导的培养基基本达到零污染。