本发明公开了一种一次性生物反应器专用膜，包括置于膜体最内层的超低密度聚乙烯层，置于最外层的低密度聚乙烯层，位于膜体中间的乙烯/乙烯醇共聚物层，以及在相邻两层间设置的胶粘层。获得的一次性生物反应器专用膜，强度高、稳定性好、耐污性能优良，能够阻挡微生物、致病菌和污泥透过。本发明一次性生物反应器专用膜的制备方法，通过控制吹膜机的机头温度，保证塑化反应的顺利进行，以生成性能优良的专用膜，制备方法简单、高效，减小一次性生物反应器的使用成本，具有显著的经济效益。