本申请公开了一种外泌体膜蛋白作为结肠癌诊断标志物的应用以及结肠癌早期诊断试剂盒，属于生物医学技术领域。本申请通过实验确定了外泌体的CD33和CD147蛋白可以作为结肠癌诊断标志物，对其进行检测可以实现对结肠癌的早期精确诊断。本申请针对外泌体CD33和CD147蛋白还提出了一种结肠癌早期诊断试剂盒，包括免疫磁珠、兔抗人CD33抗体、鼠抗人CD147抗体、羊抗兔荧光二抗、羊抗鼠荧光二抗和缓冲液。本申请试剂盒结合流式细胞术可以对待测样本血清外泌体的CD33和CD147蛋白进行定量检测，并通过与阈值进行简单比较，便可判定待测样本结肠癌的阴阳性，检测结果准确、可靠。