用于确定抗体解离速率的方法
Abstract:
本发明涉及一种测量抗体与抗原结合的解离速率的方法。该方法具有两个阶段:第一结合阶段和第二解离阶段。测定的该第一阶段具有涂覆有抗原或蛋白G或抗人IgG Fc抗体的探头。将该探头浸入含有抗体的样品溶液中,随后进行洗涤序列,然后将该探头转移到具有生物素化抗原的试剂中。孵育后,结合在该探头上的该抗体与该生物素化抗原结合形成免疫复合物。通过将该探头浸入具有荧光标记的链霉亲和素的试剂中产生荧光信号。该第一阶段的最后一步是测量探头尖端上的荧光。测定的该第二阶段是随时间进行后续荧光测量以监测指示该免疫复合物解离的荧光损失以及计算该抗体与该抗原结合的该解离速率。
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