本发明提供了一种制备能够促进生物转化的羧甲基化木质素的方法与应用，属于木质素加工技术领域，本发明通过对木质素进行改性制备获得了一种溶解性达到98.7％的羧甲基化木质素，且以改性后的羧甲基化木质素为碳源，发酵培养菌株Pseudomonasputida KT2440时，能够促进P.putida KT2440的生长代谢及PHA积累，在发酵36h时活菌数达到最大值1.26×107CFU/mL，在发酵48h后PHA的产量达到最大值0.45mg/mL。即，本发明获得的羧甲基化木质素能够有效促进木质素生物转化为PHA，在木质素发酵性能改善方面能够发挥积极作用。