本发明涉及一种针对L‑色氨酸甲基化的甲基转移酶突变体及其编码基因、载体、重组菌与应用。本发明通过对来自Mycolicibacterium smegmatis ATCC700084的甲基转移酶进行突变，将163位Thr突变为Gly,252位Met突变成Val和282位Glu突变成Ala，使其能以L‑色氨酸为底物经三次迭代甲基化催化合成L‑刺桐碱，有望实现利用E.coli全细胞合成L‑刺桐碱，为建立生产成本低、生产强度高和环境污染小的工业化生产L‑刺桐碱工艺提供理论和技术基础。