公开(公告)号：KR1020110118084A

公开(公告)日：2011-10-28

申请号：KR1020110035628

申请日：2011-04-18

Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단

Inventor： 박경호 ,  김창현

IPC: C12N5/074 ,  C12N5/02 ,  A61K35/30 ,  A61P27/16

Abstract: 본 발명은 고막조직에서 유래된 다분화능 성체줄기세포, 이의 제조방법 및 이로부터 분화된 세포에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 인간의 고막조직을 혈청이 없는 DMEM 배지에서 배양하는 단계; 0.2~0.3%의 트립신-EDTA를 첨가하여 배양한 후, 프로테아제 또는 DNase를 8~12ug/ml 처리한 다음, 원심분리하여 상층액을 제거하는 단계; 상층액이 제거된 펠렛에 0.2~0.3%의 트립신-EDTA를 첨가하여 배양한 후, 상기 트립신-EDTA와 동량의 소태아 혈청(FBS)을 첨가하여 피펫팅(pipetting)한 다음, 원심분리하는 단계; 및 원심분리 후 얻은 펠렛을 불활성화된 소태아 혈청 및 항생제가 함유된 최소필수배지 알파(MEM-a) 배양액 상에서 배양시키면서 2~3일 간격으로 15~25ng의 bFGF를 첨가하여 5~12일 동안 배양하는 단계를 포함하는 인간 고막조직 유래의 다분화능 성체줄기세포의 제조방법 및 상기 성체줄기세포를 목적 분화 세포 배양용 배지에서 배양하는 단계 및 배양 중에 목적 분화 세포의 마커를 발현하는 목적 분화 세포를 분리하는 단계를 포함하는 인간 고막조직 유래의 다분화능 성체줄기세포로부터 분화된 세포를 제조하는 방법에 관한 것이다.