公开(公告)号：CN114957478A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210603341.2

申请日：2022-05-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  张咏仪 ,  王弘 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种抗肉桂酰胺类杀菌剂纳米抗体及其应用。本发明所述纳米抗体可单独或同时识别肉桂酰胺类杀菌剂，烯酰吗啉和氟吗啉，且具有良好的热稳定性、有机溶剂耐受性及优异的耐酸性，可用于烯酰吗啉和/或氟吗啉的检测或用于制备相应的检测产品。此外，本发明还提供了一种检测肉桂酰胺类杀菌剂的方法，对肉桂酰胺类杀菌剂烯酰吗啉和氟吗啉的检测灵敏度(IC50)分别为2.63和5.18ng/mL，线性范围分别为0.70～9.89ng/mL和0.95～28.22ng/mL，检测灵敏度高，准确性好，且操作简单耗时短，适于推广使用。

公开(公告)号：CN114778820A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210435654.1

申请日：2022-04-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李露 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  王弘 ,  孙远明

IPC: G01N33/533 ,  G01N33/577 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种检测泰妙菌素的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用，以铕‑(Eu‑)荧光纳米粒子为示踪物标记泰妙菌素单克隆抗体，选择合适的荧光微球粒径，活化缓冲溶液的pH值，抗体稀释液和抗体用量，制备标记泰妙菌素单克隆抗体的时间分辨荧光微球探针，能提高时间分辨荧光微球与抗体的结合效率，促进探针释放，提高其检测灵敏度，减少抗原、抗体用量，适用于检测鸡蛋、鸡肉和猪肉等样品中的泰妙菌素。样品前处理方法简单，对鸡蛋、鸡肉和猪肉等样品中的泰妙菌素裸眼检测限为0.5ng/mL，定量检测限为0.07～0.13ng/mL，回收率为75.0％～101.8％，标准偏差为2.2％～29.5％。

公开(公告)号：CN114634550A

公开(公告)日：2022-06-17

申请号：CN202210198282.5

申请日：2022-03-01

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  李亚茹 ,  罗林 ,  韦柳娜 ,  雷红涛 ,  李向梅 ,  沈玉栋 ,  王弘

IPC: C07K7/06 ,  C12N15/11 ,  C12N7/01 ,  G01N33/577 ,  G01N33/58 ,  G01N33/53 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明公开了一种河豚毒素的非诊断目的的检测方法，其用得到的氨基酸序列如SEQID NO:1、3、5、7、9或11所示模拟表位肽的噬菌体建立了灵敏、快速的竞争型酶联免疫分析法；该方法IC50为9.8ng/mL，检测范围为3.4～52.8ng/mL。与传统的基于半抗原的免疫分析方法灵敏度相比，本方法更加灵敏；该方法对其他海洋毒素的交叉反应良好。

公开(公告)号：CN114539170A

公开(公告)日：2022-05-27

申请号：CN202111679788.X

申请日：2021-12-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨金易 ,  沈玉栋 ,  贺颖 ,  王弘 ,  徐振林 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D241/44 ,  C07K14/77 ,  C07K14/79 ,  C07K14/795 ,  C07K16/06 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测金刚烷胺、喹乙醇、氯霉素的半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。所述半抗原的结构式如式Ⅰ所示，是将金刚烷胺(AMD)、3‑甲基‑喹恶啉‑2‑羧酸(MQCA)和氯霉素胺(CAPA)3种药物骨架结构分别采用不同碳链长度的氨基酸和烷基二酸依次连接形成多簇串联线性半抗原，并将该半抗原偶联载体蛋白制备获得人工抗原。采用该人工抗原获得的多抗血清效价在8～32K之间，对半抗原抑制率在63～90％之间，表明本发明制备的多簇串联线性半抗原及其人工抗原具有良好的免疫原性，可以用于后续制备单克隆抗体、单链抗体和纳米抗体。

公开(公告)号：CN113307776B

公开(公告)日：2022-05-03

申请号：CN202110428475.0

申请日：2021-04-20

Applicant: 华南农业大学 ,  广州万联生物科技有限公司

Inventor： 徐振林 ,  梁植雯 ,  陈子键 ,  孙远明 ,  陈殿 ,  肖泽苗 ,  沈玉栋 ,  罗林

IPC: C07D235/32 ,  C07K14/765 ,  C07K14/79 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种双特异性识别阿苯达唑和多菌灵的抗体制备和应用。本发明通过将半抗原偶联到载体蛋白上，制得两种人工抗原，将两个人工抗原分别用于动物免疫和作为包被原，通过细胞融合，制备能分泌抗阿苯达唑和/或多菌灵抗体的杂交瘤细胞，再利用包被原进一步建立一种基于间接竞争酶联免疫法的检测方法。该检测方法检测阿苯达唑和/或多菌灵具有特异性强、灵敏度高、快速简便等特点，其中，阿苯达唑IC50值为0.04ng/mL，线性范围为0.02～0.09ng/mL；多菌灵IC50值为3.35ng/mL，线性范围为0.95～11.77ng/mL。并且根据该检测方法既可以用于动物性食品中阿苯达唑的检测，也可以用于蔬菜中多菌灵的检测，实现多种用途。

公开(公告)号：CN114276335A

公开(公告)日：2022-04-05

申请号：CN202111425846.6

申请日：2021-11-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  贺颖 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  王弘 ,  肖治理 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D405/06 ,  C07K14/77 ,  C07K14/79 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种苯醚甲环唑半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。所述苯醚甲环唑半抗原的结构式如式I所示，通过在苯醚甲环唑的三唑上连接戊酸手臂制成，该半抗原未改变苯醚甲环唑骨架结构和原有侧链，与苯醚甲环唑结构高度一致，有利于高特异性抗体的诱导。基于该半抗原制备人工抗原，再以人工抗原免疫动物制备获得针对苯醚甲环唑的高质量单克隆抗体，基于该抗体所建立的检测苯醚甲环唑的免疫分析方法，其IC50为1.38ng/mL，最低检测限为0.32ng/mL，线性范围为0.49～3.90ng/mL，与其它结构与功能类似物交叉反应率均小于0.2％，特异性较高，可以有效检测食品中的苯醚甲环唑。表明本发明制备的人工抗原具有良好的免疫原性，可以用于制备苯醚甲环唑多克隆抗体、单链抗体和纳米抗体并建立相对应免疫分析法。

公开(公告)号：CN113087653B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN202110373358.9

申请日：2021-04-07

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗林 ,  林诗淇 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  肖治理 ,  沈玉栋 ,  雷红涛

IPC: C07D209/44 ,  C07K14/47 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明提供一种1‑磺酸基‑异吲哚半抗原、人工抗原、抗体及其制备与应用。一种1‑磺酸基‑异吲哚半抗原，其结构式如式(Ⅰ)所示：其中，R为—(CH2)n—，其中n＝1～6。本发明通过将亚硫酸盐与邻苯二甲醛衍及一定碳链长度的脂肪族氨基酸生反应，在半抗原结构中引入芳香环结构(吲哚环)同时保留了亚硫酸盐的特征结构磺酸基，有利于刺激动物免疫应答产生特异性更强、灵敏度更高的抗体。

公开(公告)号：CN114195179A

公开(公告)日：2022-03-18

申请号：CN202111243750.8

申请日：2021-10-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  孟静南 ,  刘英菊 ,  沈兴 ,  王涓 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  沈玉栋

IPC: C01F17/235 ,  C01F17/10 ,  B22F9/24 ,  B22F1/054 ,  B82Y40/00 ,  B82Y30/00 ,  G01N33/551 ,  G01N33/58 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种非诊断目的双抗夹心酶联免疫检测蜡样芽胞杆菌的方法，本发明利用合成Cu/CeO2纳米颗粒作为模拟酶，替代HRP与二抗标记(偶联)，其具有辣根过氧化物酶(HRP)活性。进一步以抗B.cereus的单克隆抗体作为捕获抗体(包被抗体)，抗B.cereus的多克隆抗体作为检测抗体，Cu/CeO2纳米颗粒作为模拟酶标记二抗，建立了B.cereus的夹心ELISA分析方法，该方法具有灵敏度高、特异型好、成本低、操作简单，其用于食品中蜡样芽胞杆菌B.cereus的快速、高通量、低成本检测。

公开(公告)号：CN111825759B

公开(公告)日：2022-03-11

申请号：CN202010462243.2

申请日：2020-05-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 肖治理 ,  李莉萍 ,  田巍 ,  孙远明 ,  徐振林 ,  沈玉栋 ,  罗林 ,  柳心梅 ,  谢波

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种间接检测甲基嘧啶磷的酶联免疫吸附分析方法，以牛血清白蛋白偶联2‑二乙基氨基‑6‑甲基‑4‑嘧啶醇的人工抗原为免疫原，以鸡卵清白蛋白偶联2‑二乙基氨基‑6‑甲基‑4‑嘧啶醇的人工抗原为包被原。以人工免疫原免疫试验动物，使其机体产生特异性针对甲基嘧啶磷水解产物的抗体，所述抗体可以特异性识别甲基嘧啶磷水解产物‑‑2‑二乙基氨基‑6‑甲基‑4‑嘧啶醇，用于农药原药水解后间接检测食品中甲基嘧啶磷的含量。该方法检测限为3.2ng/mL，半抑制浓度(IC50)为23.42ng/mL，线性检测范围为6.09～90.07ng/mL，曲线相关系数为0.9996。本发明方法特异性强，灵敏度高，简便快捷，在食品中甲基嘧啶磷残留检测方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN114045266A

公开(公告)日：2022-02-15

申请号：CN202111456116.2

申请日：2021-12-01

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  曹雪铭 ,  王宇 ,  雷红涛 ,  孙远明 ,  罗林 ,  王弘 ,  沈玉栋

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/12 ,  C07K14/77 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  G01N33/533 ,  G01N33/53 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种抗米酵菌酸的单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体为基础的所建立的免疫分析法灵敏度高，可补充目前灵敏度低的需求。其中酶联免疫方法对米酵菌酸的线性检测范围为9.72～32.98ng/mL，检测限为5.79ng/mL；其中双模式‑比色荧光传感器分析方法中，比色法对米酵菌酸检测的线性检测范围为11.29～30.46ng/mL，检测限为8.45ng/mL，提高可视化检测的准确性，而荧光法对米酵菌酸检测的线性检测范围为8.49～46.19ng/mL，检测限为4.78ng/mL，两者的结合是独立响应但又相互确认而显示出对目标物的优异检测性能。