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公开(公告)号:CN102485894B
公开(公告)日:2013-10-23
申请号:CN201010582387.8
申请日:2010-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82
Abstract: 本发明涉及植物基因工程领域。特征是:克隆鉴定了海岛棉GbEXPA1和GbEXPATR基因的启动子。其启动子的核苷酸序列如序列表1和序列表2所示。这两个启动子在棉花中是纤维特异/优势表达启动子。将启动子PGbEXPA1和PGbEXPATR DNA序列分别与GUS基因融合构建的植物表达载体经农杆菌介导的遗传转化方法转化棉花,获得转基因植株经染色鉴定,GUS基因在棉花纤维中优势表达。这两个启动子表达模式基本一致,但有微弱差异。通过一系列截短启动子序列与GUS融合,转基因棉花验证结果表明-461bp~-1bp的序列是该启动子PGbEXPA1的核心序列。本发明还公开了含有启动子PGbEXPA1的重组表达载体,该重组表达载体可应用于培育在植物根中特异表达目的基因的转基因植株。
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公开(公告)号:CN102747154A
公开(公告)日:2012-10-24
申请号:CN201210230401.7
申请日:2012-07-05
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于EST数据挖掘的抗病基因同源物的标记方法,其步骤:(1)序列挖掘及引物设计;(2)RGA序列挖掘及引物设计:通过文献收集了96条不同物种的R蛋白序列,同时下载拟南芥中196条R蛋白序列,从TIGR中下载3个棉种的EST数据;(3)对开发的标记进行遗传定位:所用的海陆种间BC1群体,然后在单链构象多态性电泳条件下利用亲本鄂棉22和3-79筛选多态性,筛选出的多态性标记对BC1群体进行多态性分析,数据导入JoinMap3.0构建。本发明成本更低,无需简并引物扩增与大量单克隆测序非费用,而且得到的序列数目更多,序列类型也更加丰富。能够为分子育种提供有效的分子标记。
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公开(公告)号:CN1254538C
公开(公告)日:2006-05-03
申请号:CN03119012.X
申请日:2003-04-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用SRAP分子标记进行棉花连锁遗传作图的方法。作图群体为海岛棉与陆地棉杂交产生F2单株。应用序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记,PCR扩增检测所述群体的多态性并进行遗传作图,得到285个多态性条带,平均每个引物组合产生3.75个多态性条带,最多可产生13条多态性条带,比现有棉花分子遗传连锁图构建的其它标记的产率高。对285个标记用MAPMAKER构建连锁群,237个标记进入39个连锁群,每个连锁群有2~13个标记,总长3030.7cm,覆盖整个棉花基因组的65.4%,标记间平均间距12.79cm。标记在整个连锁群中分布比较均匀,没有标记聚集在一起的现象。本发明还提出了具体的分子标记操作的步骤和电泳参数。
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公开(公告)号:CN1541514A
公开(公告)日:2004-11-03
申请号:CN03119012.X
申请日:2003-04-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用SRAP分子标记进行棉花连锁遗传作图的方法。作图群体为海岛棉与陆地棉杂交产生F2单株。应用序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记,PCR扩增检测所述群体的多态性并进行遗传作图,得到285个多态性条带,平均每个引物组合产生3.75个多态性条带,最多可产生13条多态性条带,比现有棉花分子遗传连锁图构建的其它标记的产率高。对285个标记用MAPMAKER构建连锁群,237个标记进入39个连锁群,每个连锁群有2~13个标记,总长3030.7 cM,覆盖整个棉花基因组的65.4%,标记间平均间距12.79cM。标记在整个连锁群中分布比较均匀,没有标记聚集在一起的现象。本发明还提出了具体的分子标记操作的步骤和电泳参数。
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公开(公告)号:CN1168377C
公开(公告)日:2004-09-29
申请号:CN01131087.1
申请日:2001-09-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种获得棉花转基因植株的方法,属于新植物技术领域。其特征在于,利用组织培养诱导棉花下胚轴获得愈伤组织,经继代培养得到胚性愈伤组织;然后利用预培养12天的胚性愈伤组织作为农杆菌感染受体进行共培养,所述的共培养温度为16-26℃,农杆菌菌液浓度0D值为0.3-0.5;共培养48小时后,使用0.01% HgCl2处理农杆菌感染的胚性愈伤组织5-10分钟脱菌;再转入添加有50mg/L卡那霉素的选择培养基上,连续选择2-3次,通过选择培养基筛选获得抗性愈伤组织;将该愈伤组织继代培养于分化培养基上获得完整的再生植株,经分子检测获得抗衰老转基因棉花植株。
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公开(公告)号:CN1404723A
公开(公告)日:2003-03-26
申请号:CN01131087.1
申请日:2001-09-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明属于棉花转基因育种技术领域。其特征是,利用组织培养诱导棉花下胚轴获得愈伤组织,经继代培养得到胚性愈伤组织,以所得到的胚性愈伤组织作为农杆菌感染受体,通过选择培养基筛选获得抗性愈伤,然后再生植株,经分子检测,获得抗衰老转基因棉花。与已有技术相比,本发明能够大幅度提高棉花转化效率,转化的周期大大缩短,可在6个月内获得转基因植株,转化体可大幅度增加。已成功获得抗衰老转基因(ipt)棉花Coker201(ipt)、鄂抗3号(ipt)和YZ1(ipt)。
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