公开(公告)号：CN103255135B

公开(公告)日：2014-10-15

申请号：CN201210039360.3

申请日：2012-02-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  林斌 ,  徐在言 ,  熊远著

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明属于猪分子标记制备技术领域，具体涉及一种与猪脂肪沉积性状相关的遗传标记、制备方法及应用。从猪PPARδ基因5’调控区片段克隆得到猪脂肪性状关的标记，其序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，在所述序列第316碱基处有一个A/G碱基突变，导致EcoR I-RFLP多态性。主要步骤：从猪血液中提取基因组DNA，设计引物，PCR扩增，PCR产物克隆、测序，序列比较分析，SNP检测，标记与脂肪沉积性状间相关性分析，突变影响转录活性变化的试验验证等。还公开了猪PPARδ基因5’调控区的SNP分型检测技术，发现该A/G突变位点与背膘厚等脂肪沉积性状呈显著相关。

公开(公告)号：CN118813828A

公开(公告)日：2024-10-22

申请号：CN202411118419.7

申请日：2024-08-14

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  牛晓玉 ,  赵书文 ,  徐在言

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种与猪产肉效率和生长速度相关的SNP分子标记及其应用，该标记对应国际参考基因组Sscrofa11.1版本猪15号染色体的第126105855位点处。LOC106507223在猪肌肉组织中高表达，在LOC106507223启动子上游1253bp处存在一个C>T的碱基替换，导致多态性。对SNP位点进行分型，关联分析表明，相比于其他基因个体，TT基因型个体具有达100kg体重活体背膘薄、眼肌面积大以及日龄缩短等性状。本发明为猪分子标记辅助选择提供了一种新标记，将其应用于猪产肉效率和生长速度改善的遗传改良中，提高猪的产肉效率和瘦肉率，缩短猪育种周期，加快优质猪育种改良进程。

公开(公告)号：CN113088576A

公开(公告)日：2021-07-09

申请号：CN202110574878.6

申请日：2021-05-26

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  赵诗瑜 ,  徐在言 ,  吕威 ,  靳建军 ,  魏泓

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6858

Abstract: 本发明属于猪的遗传标记筛选和应用领域，具体涉及与猪生长育肥性状关联的遗传标记及应用，所述猪生长育肥性状为达100kg体重日龄和眼肌面积，所述猪的品种为美系大白猪，所述遗传标记从猪SYISL基因中筛选得到，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1和图1所示。上述序列第123位和第126位碱基存在两个等位基因替换，即G/A和T/C替换，所述替换导致SYISL基因产生多态性。本发明为猪的标记辅助选择提供了新的标记资源。

公开(公告)号：CN109112161A

公开(公告)日：2019-01-01

申请号：CN201810938942.2

申请日：2018-08-17

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  顾浩 ,  李嘉楠 ,  徐在言

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种制备ROSA26基因突变及肌内脂肪提高的动物的方法。本发明提供了突变ROSA26基因的方法，所述方法采用CRISPR/Cas9系统进行，所述CRISPR/Cas9系统包括靶向ROSA26基因的sgRNA，所述sgRNA的靶序列为SEQ ID No.1。该方法通过向受体细胞中导入sgRNA和Cas9以及含有PPARγ基因表达盒的供体DNA实现ROSA26基因的定点整合。实验证明，利用本发明的方法可以成功于ROSA26基因位点定点整合PPARγ2基因，最终成功得到表达PPARγ2的动物。

公开(公告)号：CN108342496A

公开(公告)日：2018-07-31

申请号：CN201810497601.6

申请日：2018-05-22

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  徐在言 ,  李明扬 ,  刘军

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于猪的遗传标记制备技术领域，具体涉及HBEGF基因片段作为猪繁殖性状相关的遗传标记，该遗传标记从猪HBEGF基因中筛选得到，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，在该序列274位碱基处发生一个T/C碱基突变，导致HBEGF基因的多态性。本发明的步骤为：从猪血液中提取基因组DNA，设计引物，PCR扩增，PCR产物克隆、测序，序列比较分析，SNP检测，标记与猪繁殖性状间相关性分析。公开了猪HBEGF基因内含子区内的SNP分型检测技术，发现该T/C突变位点与初生窝重和弱仔数等繁殖性状极显著相关。本发明为猪标记辅助选择提供了新的标记资源。

公开(公告)号：CN107384931A

公开(公告)日：2017-11-24

申请号：CN201710798634.X

申请日：2017-09-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  徐在言 ,  许海洋

IPC: C12N15/12 ,  A01K67/027

CPC classification number: C07K14/4702 ,  A01K67/0278 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/052 ,  A01K2267/02

Abstract: 本发明属于动物转基因技术领域，公开了FHL3基因在促进动物生长中的应用，将FHL3基因在动物体内过表达，能显著提高动物的生长速度和肌肉量。本发明首次揭示了超表达FHL3基因能够促进个体的生长和肌肉量的提高，首次发现了FHL3基因在此方面的功能。表明FHL3基因能够作为制备生长速度快、肌肉产量高的转基因家畜的候选基因。

公开(公告)号：CN119530225A

公开(公告)日：2025-02-28

申请号：CN202411720308.3

申请日：2024-11-28

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  阮兴友 ,  何春鹏 ,  彭雅鑫 ,  徐在言

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明提供了一种提高CRISPR/Cas13d系统敲降RNA效率的方法及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过在CRISPR/Cas13d系统的gRNA上添加辅助元件10‑23DNAzyme(DZ13)，构建成gRNA_DZ13序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；用于提高Cas13d的敲降效率，通过实验验证，可以使得敲除效率与传统CRISPR/Cas13d系统相比提高19％～28％以上。本发明提供的一种提高CRISPR/Cas13d系统敲降RNA效率的方法，为进一步研究RNA功能提供了有力的支持。

公开(公告)号：CN119331989A

公开(公告)日：2025-01-21

申请号：CN202411722516.7

申请日：2024-11-27

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  缪阳 ,  张雅文 ,  牛晓玉 ,  徐在言

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于分子生物技术和分子标记技术领域，具体涉及一种与猪背膘厚和眼肌面积性状关联的SNP分子标记及应用；利用高通量测序技术，鉴定出与猪产肉性能相关的SNP位点，一方面探究其对产肉效率的影响，另一方面为改善猪遗传育种新应用提供可用的分子标记。该标记对应国际参考基因组Sscrofa11.1版本猪1号染色体的7061212位点处。在LOC106508795第一个外显子区84bp处存在一个C>A的碱基替换，导致单核苷酸多态性。对该SNP位点进行基因分型，关联分析表明，AA基因型个体具有达100kg体重活体背膘薄和眼肌面积大等优良性状。

公开(公告)号：CN118600026A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410764016.3

申请日：2024-06-13

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  彭雅鑫 ,  刘畅 ,  徐在言 ,  洪亚婷

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于分子生物技术和分子标记技术领域，涉及一种与猪产肉效率相关的SNP分子标记及其应用，该标记来自猪15号染色体的第93707553位点。选择大白猪和长白猪作为试验材料，从猪血液中提取全基因组DNA，根据NCBI数据库公布的猪基因组序列(NC_010457.5)设计引物。在其第306位存在一个A或G的碱基替换，导致多态性。对SNP位点进行分型，关联分析表明，相比于其他基因个体，AA基因型个体活体背膘薄、眼肌面积大等性状。本发明为猪分子标记辅助选择提供了一种新标记，将其应用于猪产肉效率改善的遗传改良中，加快优质猪育种改良进程。

公开(公告)号：CN111218451B

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN202010080993.3

申请日：2020-02-05

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 左波 ,  靳建军 ,  徐在言 ,  张佳丽 ,  吕威

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明属于猪分子标记筛选与应用技术领域，具体涉及一种提高猪肌肉量的方法。本发明利用干扰和超表达MN864465基因提高猪肌肉量和肌纤维密度。所述的MN864465基因是从大白猪基因组中扩增得到，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，该序列位于猪8号染色体中104,826,111‑104,827,563区域。构建得到两种载体，在猪骨骼肌卫星细胞中分别超表达和干涉该基因，发现该基因可促进猪骨骼肌卫星细胞增殖，抑制猪骨骼肌卫星细胞分化，即可以提高猪肌肉量和肌纤维密度。利用该基因的超表达慢病毒注射猪和小鼠腿肌，可抑制肌肉的生长发育。本发明为猪的肌肉改良提供了新的资源。