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公开(公告)号：CN101665421A
公开(公告)日：2010-03-10
申请号：CN200910183381.0
申请日：2009-09-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07C49/433 , C07C45/28
Abstract: 本发明是一种樟脑醌的合成方法。原料α-蒎烯与干燥的氯化氢气体在-5～35℃下反应5-10小时，所得反应液用10％NaHCO 3 溶液洗涤，除去过量的HCl，有机层经无水Na 2 SO 4 干燥，常压下蒸去溶剂后得到固体粗品2-氯莰烷，再经重结晶，得到中间体2-氯莰烷；2-氯莰烷经脱氯化氢后，得到冰片烯；以高锰酸钾作为氧化剂，氧化反应温度为-15～35℃，反应时间为3～24小时；反应液经离心除去副产物MnO 2 ，溶液经蒸馏去除丙酮后，加入乙酸乙酯溶解，用蒸馏水洗涤去除高锰酸钾，有机层经无水Na 2 SO 4 干燥后，蒸去溶剂得到黄色晶体樟脑醌。优点：降低了樟脑醌的生产成本，拓宽了樟脑醌的应用范围，提高了生产安全性。
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公开(公告)号：CN101503354A
公开(公告)日：2009-08-12
申请号：CN200910029967.1
申请日：2009-03-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07C69/145 , C07C67/08 , B01J27/16 , B01J27/135
CPC classification number: Y02P20/582
Abstract: 本发明是一种制备乙酸松油酯的方法，将松油醇和乙酸酐分别加入反应釜中搅拌，加入磷酸，搅匀后，在室温下加入SnCl4·5H2O，待SnCl4·5H2O完全溶解后，慢慢升温，在搅拌下反应；将反应液冷却到室温后，加入Na2CO3中和H3PO4和SnCl4，碳酸中和后的反应液直接蒸馏，蒸出大部分的乙酸；经过10％NaOH溶液及饱和食盐水洗涤，除去残余的乙酸，至中性后分馏得到乙酸松油酯产品。优点：提供了一种新型复合催化剂体系和合成乙酸松油酯新工艺，成本低、后处理简单、具有较高催化活性和反应选择性的催化剂体系和后处理工艺。保证乙酸松油酯得率、缩短反应时间，减少生产废水量，提高乙酸副产品的回收率和乙酸的浓度。
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公开(公告)号：CN112210586B
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202010062495.6
申请日：2020-01-19
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测凋落物β‑葡萄糖醛酸苷酶活性的方法，涉及凋落物酶活性检测的技术领域。该方法包括以下步骤：1)在凋落物碎屑中加入培养缓冲液，低温孵育，离心收集滤液，进一步稀释得到酶活测试液；并制备灭活对照酶液；2)制作MUB浓度与吸光值之间关系的标准曲线；3)将酶活测试液和灭活对照酶液分别添加到酶活测试孔和阴性孔，然后加入4‑MUB‑β‑D‑葡萄糖醛酸苷工作液，避光震荡孵育，反应结束后加入终止液终止反应，在检测条件下，读取荧光值；4)根据标准曲线，计算β‑葡萄糖醛酸苷酶比酶活。本发明酶液耗量少、操作强度小；灵敏度呈数量级提高；且测试液pH对上机数据没有影响，能够真实反映凋落物中酶活性。
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公开(公告)号：CN111707645B
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202010063061.8
申请日：2020-01-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/34
Abstract: 本发明公开了一种检测凋落物乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的方法，属于酶活检测技术领域。本发明提供的方法为：将凋落物样品破碎后装到离心过滤管中，添加培养缓冲液低温培养后高速离心并混合滤液定容至一定体积，制备灭活酶液；将酶活性液和灭活酶液依次分别添加酶活性孔和阴性对照孔，再添加4‑MUB‑β‑D‑乙酰氨基葡萄糖苷工作液，在遮光条件下震荡培养；培养后，向所有酶标孔添加Tris终止液；利用多功能酶标仪进行MUB荧光检测；计算乙酰氨基葡萄糖苷酶比酶活。本发明采用离心过滤管，降低了酶液中的干扰物质；优化了反应体系，灵敏度高，酶液耗量少，反应终止后，测试液pH对上机数据没有影响，真实有效反映凋落物中酶活性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101665421B
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN200910183381.0
申请日：2009-09-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07C49/433 , C07C45/28
Abstract: 本发明是一种樟脑醌的合成方法。原料α-蒎烯与干燥的氯化氢气体在-5～35℃下反应5-10小时，所得反应液用10％NaHCO3溶液洗涤，除去过量的HCl，有机层经无水Na2SO4干燥，常压下蒸去溶剂后得到固体粗品2-氯莰烷，再经重结晶，得到中间体2-氯莰烷；2-氯莰烷经脱氯化氢后，得到冰片烯；以高锰酸钾作为氧化剂，氧化反应温度为-15～35℃，反应时间为3～24小时；反应液经离心除去副产物MnO2，溶液经蒸馏去除丙酮后，加入乙酸乙酯溶解，用蒸馏水洗涤去除高锰酸钾，有机层经无水Na2SO4干燥后，蒸去溶剂得到黄色晶体樟脑醌。优点：降低了樟脑醌的生产成本，拓宽了樟脑醌的应用范围，提高了生产安全性。
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公开(公告)号：CN101475450B
公开(公告)日：2011-07-27
申请号：CN200910028542.9
申请日：2009-02-04
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明是以咪唑作为没食子酸脱羧催化剂制备焦性没食子酸的方法，将无水没食子酸和咪唑固体搅拌混合，常压条件下逐步升温，物料成熔融状，同时有大量的CO2气体逸出，保持反应温度在145～150℃直至反应产物中无气泡逸出并采用TLC检测至无没食子酸原料为止。将上述反应产物在减压下(体系压力为2.0～2.67kPa)逐步升温至155～160℃，此时有升华产物逸出，保持此温度直至无升华产物逸出为止。将上述升华产物研碎，获得焦性没食子酸产品。优点；脱羧温度低，反应速度快、过程简单，催化剂价格低廉、催化效果好且碱性较低，副产物少、催化剂沸点高而保证产品质量，焦性没食子酸收率高，无需任何后处理即可得到高纯产品。
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公开(公告)号：CN111707645A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010063061.8
申请日：2020-01-19
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测凋落物乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的方法，属于酶活检测技术领域。本发明提供的方法为：将凋落物样品破碎后装到离心过滤管中，添加培养缓冲液低温培养后高速离心并混合滤液定容至一定体积，制备灭活酶液；将酶活性液和灭活酶液依次分别添加酶活性孔和阴性对照孔，再添加4-MUB-β-D-乙酰氨基葡萄糖苷工作液，在遮光条件下震荡培养；培养后，向所有酶标孔添加Tris终止液；利用多功能酶标仪进行MUB荧光检测；计算乙酰氨基葡萄糖苷酶比酶活。本发明采用离心过滤管，降低了酶液中的干扰物质；优化了反应体系，灵敏度高，酶液耗量少，反应终止后，测试液pH对上机数据没有影响，真实有效反映凋落物中酶活性。
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公开(公告)号：CN111705108A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010063064.1
申请日：2020-01-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/34
Abstract: 本发明公开了一种检测凋落物β-葡萄糖苷酶活性的方法，属于生物化学技术领域。本发明提供的检测凋落物中β-葡萄糖苷酶活性的方法主要步骤为：称取剪碎过筛的凋落物到离心过滤管中，加入培养缓冲液进行孵育，高速离心后混合上清液并调节至一定体积作为酶活待测液；将酶活待测液和灭活的酶活待测液分别加入样品活性孔和阴性对照孔，再加入荧光底物工作液4-MUB-β-D-葡萄糖苷溶液，在避光条件下震荡孵育；再向酶标孔加入Tris终止液；采用多功能酶标仪进行荧光检测；计算β-葡萄糖苷酶活性。本发明的优点为：反应体系优化后，灵敏度高，检测消耗待测酶液的量少，缩短了操作时间，短时间内能大批量获得测定数据，操作简单，效率高。
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公开(公告)号：CN111057782A
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN202010063347.6
申请日：2020-01-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/06
Abstract: 本发明公开了一种基于实时荧光定量PCR检测土壤细菌数量的方法，属于生物技术领域。本方法包括以下步骤：1)提取土壤样品总DNA并调整到预设浓度，制备成待测土壤样品模板DNA溶液；2)提取模板大肠杆菌总DNA，测定DNA浓度，并制备标准曲线模板DNA溶液；3)对待测土壤样品模板DNA溶液和标准曲线模板DNA溶液进行实时荧光定量PCR扩增；4)绘制出标准曲线；5)计算每克干土中细菌数量。本方法省去添加内标菌株荧光镜检等步骤，大大降低操作难度；且不需要经过连接、转化，再以qPCR扩增，操作简便易学；目标片段特异性好，数据精准度高，重现性好。
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