一种快速检测未分化、分化精原细胞钙信号的方法

    公开(公告)号:CN116990214A

    公开(公告)日:2023-11-03

    申请号:CN202310916412.9

    申请日:2023-07-25

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测未分化、分化精原细胞钙信号的方法。该方法使用温和酶解法制备睾丸单细胞悬液,利用indo‑1 AM、Thy‑APC、c‑kit‑PE、进行染色标记,基于睾丸细胞样本中细胞侧向散射光‑面积和前向散射光‑面积的差异确定所要分析的细胞群,然后利用Thy‑APC、c‑kit‑PE分别标记未分化精原细胞和分化后精原细胞,进一步选定特定细胞类群,最后检测每类特定细胞亚群中indo‑1 AM的荧光强度变化,从而得到未分化、未分化向分化转变及分化精原细胞中钙离子浓度的变化情况。采用该方法可以实现快速分析未分化、未分化向分化转变的及分化精原细胞的钙离子浓度,方法简单,便捷,为研究钙信号失衡导致的精原细胞功能异常鉴定了基础。

    一种改善精子功能的含有IDGR序列的多肽及其应用

    公开(公告)号:CN114621337B

    公开(公告)日:2023-08-01

    申请号:CN202210210465.4

    申请日:2022-03-31

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种改善精子功能的含有IDGR序列的多肽及其应用,属于医学技术领域。该方法包括正常人精浆外泌体的分离、Xa因子蛋白酶解、蛋白质谱鉴定和TDP1多肽合成三个步骤。本发明通过利用人工合成多肽TDP1,人工合成方法简单,经济成本低,水溶性好,毒副作用极小,TDP1多肽衍生于人体精浆外泌体成分,精浆外泌体作为精浆微环境的重要组成成分,既参与精子发生,又在调节成熟精子功能中起到重要作用,可在体外干预精子,改善精子功能,以期通过人工受精等简单的非创伤手段干预和治疗不育症,改善患者的生育结局。

    一种快速分离精子头、精子尾和正常有活力精子的方法

    公开(公告)号:CN111323361A

    公开(公告)日:2020-06-23

    申请号:CN202010186121.5

    申请日:2020-03-17

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速分离精子头、精子尾和正常有活力精子的方法,属于生殖医学技术领域。通过采用流式细胞仪根据精子样本中细胞侧向散射光-面积(SSC-A)和前向散射光-面积(FSC-A)、侧向散射光-宽度(SSC-W)和侧向散射光-高度(SSC-H)的不同,从而分选得到精子、精子头与精子尾。采用本发明的方法,可以实现快速分离精子头、精子尾和正常有活力精子,且纯度高、简便。

    一种孕酮响应缺陷不育人精子样本的高通量筛选方法

    公开(公告)号:CN110873706A

    公开(公告)日:2020-03-10

    申请号:CN201911093793.5

    申请日:2019-11-11

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种孕酮响应缺陷不育人精子样本的高通量筛选方法。通过以健康生育男性作为正常对照,以不明原因不育男性患者作为研究对象,观察并高通量筛选不同人精子样本之间孕酮对其头部细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的作用,在避免加药时间差的同时高效快速筛选孕酮响应缺陷的人精子不育样本,进一步探究孕酮对人精子功能的影响及其分子机制,同时以期阐明精子膜孕酮受体功能缺陷在评价男性不育病因中的临床意义。

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