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公开(公告)号:CN112079904B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN202011000015.X
申请日:2020-09-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用,基于重组杆状病毒昆虫细胞培养系统,分别构建了表达H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白、NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒。将三株重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞,可收获到在细胞内自行组装的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。经超滤管与不同梯度浓度蔗糖浓缩纯化后,与佐剂混和乳化制备疫苗。制备的疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体,具有免疫原性强、安全性好、遗传稳定性高等优点。以致死剂量的H7N9亚型高致病性禽流感病毒攻击后,能够提供完全的临床保护且显著抑制鸡的排毒。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法,也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号:CN114230642A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202111263546.2
申请日:2021-10-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种区分H7N9亚型禽流感病毒感染与免疫动物的多肽及检测方法,所述多肽序列为KNVPEIPKGRG。本发明用生物信息学方法筛选了一条跨越H7N9亚型AIV HA蛋白裂解位点的多肽,并以该多肽为基础建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)。该方法能够清晰地区分H7N9病毒感染与疫苗免疫动物,达到DIVA的目的。本发明提供的多肽可作为家禽或人H7N9亚型AIV的DIVA监测的新靶标,所建立的诊断方法在疫病防控与公共卫生领域有较好的应用潜力。
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公开(公告)号:CN113943751A
公开(公告)日:2022-01-18
申请号:CN202111237226.X
申请日:2021-10-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/65 , C12N5/10 , C12N15/44 , C12Q1/02
Abstract: 本发明提供了一种用于H7N9亚型禽流感血清杀伤效应测定的靶细胞及鉴定方法,其包括如下步骤:PCR扩增目标基因片段、目的基因包装到载体中、转染、慢病毒分离和检测、测定HA蛋白表达情况、测定血清杀伤活性。本发明有着如下有益效果:本发明构建的细胞株高效均一地表达HA蛋白,在普通二级实验室即可操作,为测定H7N9血清杀伤效应提供稳定、可靠的靶细胞来源;本发明提供的细胞系带有ZSgreen荧光报告基因,无需额外的标记,且能区分靶细胞与效应细胞;本发明建立的检测H7N9禽流感免疫血清Fc效应的方法,为全面认识H7N9疫苗的免疫保护机理提供有力工具;除了针对特定的病菌外,本发明还可以对其他家禽疫苗抗体Fc免疫效应的测定提供了技术参考。
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公开(公告)号:CN108888761A
公开(公告)日:2018-11-27
申请号:CN201810489385.0
申请日:2018-05-21
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K39/145 , A61K39/39 , C12N15/866 , C12N15/41 , A61P31/16
Abstract: 本发明涉及一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗及其制备方法与应用。该疫苗包括:重组杆状病毒rBac-JX148HA,该重组杆状病毒能够表达H7N9禽流感病毒主要免疫抗原HA蛋白,其免疫佐剂为SEPPIC佐剂;其中所述的HA蛋白的核酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明疫苗免疫鸡后,能诱导较高的抗体滴度、提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒的完全临床保护、有效抑制排毒。该疫苗安全性高,克服了传统的鸡胚生产疫苗具有鸡胚供应不稳定、外源病毒污染、废弃物产量大等缺陷,在H7N9亚型禽流感的防控上具有较好的应用前景,且符合兽用疫苗利用悬浮细胞培养技术进行大规模生产的趋势。
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公开(公告)号:CN106498092A
公开(公告)日:2017-03-15
申请号:CN201610960388.9
申请日:2016-10-28
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明属于生命科学与生物技术领域,涉及一种联合检测H5亚型禽流感病毒与新城疫强毒的一步法实时荧光定量PCR的试剂盒。该试剂盒包括引物、探针、及PCR试剂,所述引物及探针包括:(1)序列如SEQ ID NO:1-3所示的检测H5亚型禽流感病毒的引物及探针:(2)序列如SEQ ID NO:4-6所示的检测新城疫强毒的引物及探针。本发明所太守的试剂盒适用于H5亚型禽流感病毒和新城疫强毒的定量检测和流行病学实时监测。
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公开(公告)号:CN106399267A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610975111.3
申请日:2016-10-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/869 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/00 , C12N15/86 , C12N2710/16021 , C12N2710/16043 , C12N2760/16122 , C12N2760/16134
Abstract: 本发明属于分子生物学和生物技术领域的重组病毒载体疫苗,具体涉及一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组火鸡疱疹病毒株rHOH及构建方法。所述重组火鸡疱疹病毒株rHOH,其保藏号是CGMCC NO.12985。所述的重组火鸡疱疹病毒株rHOH,它的gB启动子来源于火鸡疱疹病毒载体FC126自身;表达的外源抗原(血凝素蛋白)基因经Gallus Gallus的密码子偏嗜性优化,核苷酸的序列发生改变,但不改任何变氨基酸序列。该重组火鸡疱疹病毒株rHOH可用于制备预防H7N9亚型禽流感病毒的疫苗;接种孵化后第18日龄的鸡胚或1日龄的雏鸡,预防和控制家禽的H7N9疫情,保护公众卫生和安全。
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公开(公告)号:CN118994381A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202410987980.2
申请日:2024-07-23
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物制品领域,具体涉及一株靶向呼吸道递送H7亚型禽流感广谱中和抗体的重组新城疫病毒及其应用,本发明以NDV为载体,在其基因组中表达H7亚型AIV广谱中和抗体的基因,构建一株重组病毒。本发明提供的重组NDV在H7亚型AIV的抗病毒防治中具有较好的应用潜力,为抗体制剂的靶向递送提供了全新的技术路径,为重要传染病的抗体防治提供了更好的方案。
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公开(公告)号:CN118987190A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202411145056.6
申请日:2024-08-20
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K39/17 , A61K31/4184 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于兽用疫苗领域,涉及RIPK3蛋白在提高新城疫活疫苗胚胎免疫安全性和免疫原性中的应用,本发明发现细胞坏死性凋亡关键蛋白RIPK3对NDV弱毒疫苗的胚胎毒性具有重要影响,抑制RIPK3的活性可显著提高病毒接种鸡胚的孵化率与存活率,并显著提高HI抗体水平。本发明提供了RIPK3蛋白在提升NDV弱毒活疫苗胚胎安全性与免疫原性方面的新的应用,在研制安全、高效的新城疫胚胎疫苗方面具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN118530350A
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410947999.4
申请日:2024-07-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种能够识别新型鸭呼肠孤病毒NDRV σC蛋白的单克隆抗体、制备方法及其应用,所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区;所述重链可变区包括如SEQ ID NO:3、4、5所示氨基酸序列的VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3,所述轻链可变区包括如SEQ ID NO:6、7、8所示氨基酸序列的VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3。本发明还公布了单克隆抗体的制备方法,及基于该抗体和σC兔多克隆抗体建立的双抗夹心ELISA方法。该方法可用于NDRV亚单位疫苗抗原的定量与动物免疫剂量的确定。该ELISA方法相较于文献报道的方法,操作更简单、实际应用潜力大。本发明为NDRV免疫效力评价与疫苗质量控制提供了新方法,可保障NDRV疫苗的升级换代。
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公开(公告)号:CN112079905A
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN202011000033.8
申请日:2020-09-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒样颗粒抗原、疫苗及其制备方法和应用,将一株基于串联表达H7N9亚型禽流感病毒HA、NA、M1基因的重组杆状病毒转染昆虫细胞自行组装形成禽流感病毒样颗粒抗原;将本发明所制备的病毒样颗粒抗原用于制备疫苗。本发明制备的疫苗免疫鸡群后能够产生较高滴度的HI抗体、中和抗体和IgY抗体,能够提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒100%的临床保护,并能有效抑制排毒。本发明不依赖于鸡胚,生产成本低、周期短;仅以低剂量一次免疫就可诱导较强的保护能力。本发明为VLP疫苗的工业化生产提供了基础。
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