一种定量检测微囊藻的方法及其专用标准品

    公开(公告)号:CN101974633A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010525990.2

    申请日:2010-10-25

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种定量检测微囊藻的方法及其专用标准品。本发明提供一种检测样品中微囊藻的标准品,为含有16S rRNA基因的重组质粒或重组菌或重组细胞;所述16S rRNA基因的序列是序列表中的序列1。所述重组质粒中的出发质粒是pMD-18T。本发明的定量检测微囊藻的标准品具有广谱识别和特异性相结合的特点,敏感性高,制备方法简便,可以长期保存,纯度好,线性检测范围宽,可以用于水环境样品中微囊藻的快速定量检测。

    一种微囊藻毒素单克隆抗体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN100567324C

    公开(公告)日:2009-12-09

    申请号:CN200710119212.1

    申请日:2007-07-18

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种微囊藻毒素单克隆抗体及其制备方法与应用。本发明的微囊藻毒素单克隆抗体是微囊藻毒素-LR的单克隆抗体,它按照包括以下步骤的方法制备:1)在微囊藻毒素-LR的第七位氨基酸残基N-甲基脱氢丙氨酸上引入一个氨基,得到经氨基修饰的微囊藻毒素-LR多肽;将该经氨基修饰的微囊藻毒素-LR多肽与载体蛋白偶联得到完全抗原A;2)将步骤1)的完全抗原A免疫小鼠,取免疫小鼠的脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株;培养所述阳性杂交瘤细胞株或将所述阳性杂交瘤细胞株注入同系小鼠腹腔诱生腹水,得到微囊藻毒素-LR的单克隆抗体。该单克隆抗体可用于微囊藻毒素-LR的检测及其免疫亲和纯化。

    大肠杆菌鞭毛多克隆抗体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN100535011C

    公开(公告)日:2009-09-02

    申请号:CN200610113829.8

    申请日:2006-10-18

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌鞭毛多克隆抗体及其制备方法与应用,其目的是提供一种大肠杆菌鞭毛多克隆抗体及其制备方法与其在检测大肠杆菌中的应用。该制备方法包括以下步骤:1)分离出大肠杆菌;2)将分离的大肠杆菌传代培养至少3次后,用含体积百分浓度为0.1-1.0%甲醛的生理盐水灭活,再用生理盐水制成菌悬液,得到大肠杆菌鞭毛抗原;3)将大肠杆菌鞭毛抗原免疫动物;4)从经免疫的动物中分离、纯化抗血清,得到大肠杆菌鞭毛多克隆抗体。用本发明方法制备的大肠杆菌鞭毛多克隆抗体具有特异性高,纯度及效价高(大于25600),可长期保存的优点,将其用于环境及食品检测领域中大肠杆菌的免疫检测中,将具有精确性、灵敏度高和检测步骤少的优势,应用前景广阔。

    检测水质毒性的套管式发光细菌光纤探头及其制备方法

    公开(公告)号:CN100514061C

    公开(公告)日:2009-07-15

    申请号:CN200710121175.8

    申请日:2007-08-31

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明涉及一种检测水质毒性的套管式发光细菌光纤探头及其制备方法,属于环境监测技术领域。探头包括套管、发光细菌凝胶和光纤,所述的发光细菌凝胶置于套管内的端部,所述的光纤插入发光细菌凝胶中。制备方法为首先将发光细菌接种于细菌培养基中,将经培养的菌液加入已经溶解的凝胶溶液中,将含有菌业的凝胶溶液填充入套管,将套管浸入固化液中,得到圆柱型发光细菌凝胶块待用;沿套管中心插入光纤,将圆柱型发光细菌凝胶推入套管中。本发明探头采用价格低廉的塑料光纤作为传光元件和套管式结构,由探头构建的发光细菌光纤传感器,可用于湖泊、河流、水厂等有毒化学污染的快速监测,结构简单,操作方便,成本低,可快速进行野外分析。

    全光纤倏逝波生物传感器

    公开(公告)号:CN100470279C

    公开(公告)日:2009-03-18

    申请号:CN200610089497.4

    申请日:2006-06-30

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 施汉昌 龙峰 何苗

    Abstract: 全光纤倏逝波生物传感器属于生物检测技术领域,特别涉及到利用激光激发标记有荧光分子的生物物质发光,从而实现生物检测的技术。其特征在于,该传感器的激光传输和荧光接收光路含有置于样品流路中的光纤探头和一个单、多模光纤耦合器,该单、多模光纤耦合器含有一根单模光纤和一根多模光纤,激光发射装置的激光出射端通过一个激光到光纤耦合器耦合到单模光纤的一端,单模光纤的另一端耦合到多模光纤中,该多模光纤的一端连接光纤探头,其另一端置于荧光采集及数据处理装置的光入射端。本发明能够有效减少光传输的能量损失,提高荧光的耦合效率,进一步提高了光的传递效率和仪器的信噪比,并尽可能地减少了光学分离元件,简化了仪器结构。

    提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法及其专用缓冲溶液

    公开(公告)号:CN100465642C

    公开(公告)日:2009-03-04

    申请号:CN200710119210.2

    申请日:2007-07-18

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法及其专用缓冲溶液。本发明所提供的环境样品免疫检测专用缓冲溶液,是在现有的浓度为0.05-0.12mol/L、pH为7.0-8.0的缓冲液中,加入下述a)、b)和c)的物质:a)NaCl,使其终浓度为10-100g/L;b)惰性蛋白或明胶,使其终浓度为2-20g/L;所述惰性蛋白是不与免疫反应体系发生反应的蛋白;c)乙二胺四乙酸二钠,使其终浓度为2-20g/L。本发明的提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法及其专用缓冲溶液可用于各种环境样品(如水样)的免疫检测中,可有效地减小或消除来自环境样品(如水样)中各种复杂基质在其自然界存在的边界范围内给免疫检测带来的干扰,使实际环境样品免疫检测的稳定性增强。

    生物传感芯片及其制备方法

    公开(公告)号:CN101363870A

    公开(公告)日:2009-02-11

    申请号:CN200810222525.4

    申请日:2008-09-18

    Abstract: 本发明公开了一种光学生物传感芯片及其制备方法。该制备方法包括以下步骤:1)玻璃基底采用氧化物光学镀膜;2)镀膜后玻璃基片采用带有活性功能基团的硅烷化试剂进行化学修饰;3)功能性高分子聚合物对玻璃基片进一步修饰;4)将蛋白质分子固定到高分子聚合物修饰的玻璃基片上;将有机小分子配基固定到高分子聚合物修饰的玻璃基片上。该方法采用硅烷化试剂和功能性高分子聚合物联合修饰玻璃基片表面,使基片表面带有一层致密的高分子聚合物层,含有大量可用于生物分子或有机小分子配基固定的活性基团,可有效抑制非特异性吸附。制备的生物传感芯片具有高载量、高稳定性、低非特异性吸附、可重复使用的优点,具有很高的应用价值。

    一种定量检测轮状病毒的方法及其专用标准品

    公开(公告)号:CN100434535C

    公开(公告)日:2008-11-19

    申请号:CN200710099584.2

    申请日:2007-05-24

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种定量检测轮状病毒的方法及其专用标准品。本发明的定量检测轮状病毒的标准品,是含有序列表中序列1的核苷酸序列的重组载体,或是含有所述重组载体的转基因宿主细胞。本发明的定量检测轮状病毒的方法,是分别以待检测样品和该标准品的基因组DNA为模板,或以分别由所述待检测样品和该标准品的总RNA反转录得到的cDNA为模板,利用由核苷酸序列是序列表中序列2的核苷酸片段和核苷酸序列是序列表中序列3的核苷酸片段组成的引物对进行PCR,对待检测样品进行轮状病毒定量。该标准品具有广谱识别和感染性特异相结合的特点,敏感性高,制备方法简便,可长期保存,纯度好,检测线性范围较宽,可以普遍用于各种样品,中轮状病毒的快速定量检测。

    一种检测2,4-滴的一次性安培型免疫传感器的制备方法

    公开(公告)号:CN100374852C

    公开(公告)日:2008-03-12

    申请号:CN200410096073.1

    申请日:2004-11-29

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 施汉昌 何苗 蔡强

    Abstract: 本发明涉及一种检测2,4-滴的一次性安培型免疫传感器的制备方法,属于环境监测领域。该方法包括:丝网印刷工艺制备传感器;2,4-滴-多聚赖氨酸的合成;2,4-滴抗血清的选用;2,4-滴敏感生物分子在传感器表面的固定化。该方法制备的传感器结构简单,与其他对称式三电极结构相比,具有电场分布均匀,呈环形对称,与电子媒介体的扩散方向一致,可以较好地抑制电流噪声、消除干扰。该制备和使用方法操作方便,成本低,可快速进行2,4-滴的野外分析。

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