公开(公告)号：CN101361420A

公开(公告)日：2009-02-11

申请号：CN200810137271.6

申请日：2008-10-09

Applicant: 东北林业大学 ,  祖元刚

Inventor： 祖元刚 ,  王文杰 ,  黄路明 ,  于兴洋 ,  张宝友 ,  王慧梅 ,  许慧男 ,  李冉 ,  王莹 ,  邱岭 ,  王春丽 ,  金铁光 ,  李弘

IPC: A01B79/00 ,  A01G1/04 ,  B09C1/00 ,  B09C1/10

Abstract: 一种深槽改良原位修复盐碱地栽植双孢菇的方法，为栽植双孢菇，首先进行双孢菇培养料的调制，同时在盐碱地上进行深槽带状整地。深槽四壁竖直铺上玉米秸秆帐。在槽底部铺垫一层玉米秸秆、一层牛粪、一层玉米秸秆，再加一层淋溶土，其上再加同等量的玉米秸秆+牛粪+玉米秸秆+淋溶土至地表，浇灌降盐碱剂。待双孢菇培养料调制完毕后，将蘑菇培养料施于浇灌降盐碱剂的玉米秸秆+牛粪+玉米秸秆+淋溶土的四层结构上。按照深槽尺寸建立塑料大棚，在其上铺上玉米秸秆帐，其上再铺一层遮光布。在相邻的槽间建立排水沟，槽边设有蓄水池。最后在培养料上播撒菌种栽植双孢菇，控制温度和湿度培养20－30天，覆土后进行正常采菇管理。

公开(公告)号：CN104017822A

公开(公告)日：2014-09-03

申请号：CN201310190956.8

申请日：2013-05-22

Applicant: 东北林业大学 ,  王慧梅

Inventor： 王慧梅 ,  付玉杰 ,  王文杰 ,  祖元刚 ,  曲丹 ,  任洁

IPC: C12N15/84 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明提供一种利用木豆无菌苗叶片进行外植体转化，建立木豆毛状根培养体系方法。本发明采用叶片为外植体,建立毛状根培养体系：叶片在1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L的培养基上预培养两天后进行菌液侵染，菌液浓度OD600为0.6-0.8，侵染5-10min后转入1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L培养基上共培养3天，然后转入抑菌培养基1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+400mg/L羧苄青霉素，约一周左右便可形成毛状根。PCR检测证明外源基因已经转入到木豆毛状根中，转化率为60%。转化后毛状根在无激素培养基上生长速度非常快，一个月能增殖7-8倍。次生代谢产物含量高，芹菜素和染料木素含量分别为0.58mg/g(DW)和1.32mg/g(DW)，显著高于实生苗根中含量。本发明提供的培养简单、再生周期短、可持续获得木豆毛状根方法，可用于规模化培养木豆毛状根来提取有价值次生代谢产物，具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN103383335A

公开(公告)日：2013-11-06

申请号：CN201310239703.5

申请日：2013-06-18

Applicant: 东北林业大学 ,  王文杰

Inventor： 王文杰 ,  李艳红 ,  王琼 ,  祖元刚 ,  王慧梅 ,  任洁 ,  仲召亮 ,  裴忠雪

IPC: G01N15/02 ,  G01Q60/24 ,  G01N23/22 ,  G01N23/20 ,  G01N21/25

Abstract: 一种测定外生菌根真菌影响土壤胶体表面特征与组成的方法，首先制备真菌菌液和土壤胶体溶液，然后取4ml土壤胶体溶液与10μl真菌菌液反应，做成不同的样品，进行激光粒度仪、原子力显微镜、扫描电镜、X射线衍射、红外光谱、X射线光电子能谱的分析。通过激光粒度仪观察土壤胶体粒径大小及分布的变化，原子力显微镜和扫描电镜观察土壤胶体表面特征的变化，X射线衍射辨认土壤的矿物组成，并分析各矿物质晶粒尺寸和相对结晶度的变化，红外光谱和X射线光电子能谱来研究土壤官能团及有机元素组成的变化。通过以上分析方法探究真菌对土壤胶体表面结构特征、矿物组成和有机组成的影响，旨为揭示真菌影响土壤的深层机理提供技术支持。

公开(公告)号：CN101406140A

公开(公告)日：2009-04-15

申请号：CN200810209534.X

申请日：2008-11-27

Applicant: 东北林业大学 ,  祖元刚

Inventor： 祖元刚 ,  祖柏实 ,  王文杰 ,  李冉 ,  于兴洋 ,  黄路明 ,  张宝友 ,  张学科 ,  段喜华 ,  王慧梅 ,  张彦滨

IPC: A01G1/04 ,  A01B79/00 ,  B09C1/00

Abstract: 一种深槽改良盐碱地搭建简易双孢菇培养房的方法，为搭建双孢菇培养房，首先在盐碱地上深槽带状整地，用秸秆帐竖直铺在槽的四壁以及作业通道两侧。在槽底部铺垫两层玉米秸秆+牛粪+玉米秸秆+淋溶土层至地表，浇灌降盐碱剂。用墙体砌块构筑培养房的四壁。在长方形培养房的长边上建立间墙，间墙之间铺设棚架。培养房设有前、后门和两个侧门并用秸秆建造房顶。在相邻培养房间建立排水沟，槽边设蓄水池。将蘑菇培养料施于地床和棚架上并开始种植。当双孢菇种植周期结束后将废弃的墙体砌块、秸秆和蘑菇培养料混合回填地表，用以改良盐碱地。

公开(公告)号：CN1687416A

公开(公告)日：2005-10-26

申请号：CN200510009936.1

申请日：2005-04-27

Applicant: 东北林业大学 ,  祖元刚

Inventor： 祖元刚 ,  聂明珠 ,  于景华 ,  唐中华 ,  王慧梅 ,  郭晓瑞 ,  房思梁 ,  王延兵

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/79 ,  C12Q1/68

Abstract: 一种长春花干旱胁迫条件下长春花叶片中诱导的新的抗旱基因及其编码产物的氨基酸序列。它涉及一种新的基因序列。其特征在于：该基因全长698bp，在33bp处具有起始密码子ATG，401bp处具有终止密码子TAA，在680bp处具有polyA附加信号。该序列无内含子，具有369bp完整的开放读码框，编码122个氨基酸。所述的氨基酸序列与马铃薯LTP序列的同源性达45％。本发明还提供了一种快速得到全长胁迫基因的方法。首先使用适度的干旱处理条件，使植物抗旱基因表达富集；然后通过构建全长的cDNA文库及测序，在最短的时间内得到抗干旱胁迫相关的全长基因。获得的抗旱基因直接构建在真核表达载体pCMV质粒上，可使用t3、t7通用引物进行测序。同时，可通过真核生物表达来直接进行筛选。本发明从植物cDNA中分离出了脂质转移蛋白的全长基因，该基因具有较强的抗旱功能，同时，对增强植物其它逆境抗性也起到重要的作用。该基因的克隆扩大了植物抗旱研究的基因资源，为运用基因工程技术提高植物抗干旱胁迫及品质改良提供了更加丰富的优良候选基因。

公开(公告)号：CN1644682A

公开(公告)日：2005-07-27

申请号：CN200410044119.5

申请日：2004-12-13

Applicant: 东北林业大学 ,  祖元刚

Inventor： 祖元刚 ,  王慧梅 ,  王文杰 ,  董凤丽 ,  于景华 ,  杨逢建

IPC: C12N5/04

Abstract: 一种高效诱导喜树离体叶片不定芽再生的培养基，由硝酸铵、硫酸钾、七水硫酸镁、磷酸二氢钾、二水氯化钙、四水硝酸钙、七水硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠、硼酸、一水硫酸锰、七水硫酸锌、二水钼酸钠、五水硫酸铜、烟酸、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、肌醇组成WPM培养基的基础上还增加了植物激素6－BA(6－苄基氨基腺嘌呤)、IBA(吲哚丁酸)、NAA(萘乙酸)及琼脂与蔗糖。本发明中的培养基使喜树离体叶片愈伤组织诱导率高，愈伤组织不定芽发生频率高，可达70％，而且每片叶片不定芽发生数目多，平均为11个。这种培养基使喜树离体叶片不定芽发生的再生系统具有高频性和可重复性，为喜树次生代谢基因工程打下了良好的基础。

公开(公告)号：CN1334003A

公开(公告)日：2002-02-06

申请号：CN00134313.0

申请日：2000-12-13

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 祖元刚 ,  孔瑾 ,  王慧梅 ,  聂明珠 ,  石福臣 ,  谷会岩 ,  杨逢建 ,  张宝友

IPC: A01H4/00

Abstract: 一种从白桦的叶片诱导不定芽的培养基,由硝酸钾、硝酸铵、七水硫酸镁、二水氯化钙、磷酸二氢钾、四水硫酸锰、七水硫酸锌、硼酸、五水硫酸铜、碘化钾、二水钼酸钠、乙二胺四乙酸二铁、六水氯化钴、烟酸、肌醇、盐酸硫胺、盐酸吡哆醇、琼脂、蔗糖组成MSB5培养基的基础上还增加6－BA、NAA及IBA。本发明培养基诱导率高,增殖率高,可以在较短的时间内得到大量的再生苗,建立优良的再生体系,并为根癌农杆菌的转化提供了保障。