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公开(公告)号：CN108676822B
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN201810554930.X
申请日：2018-05-31
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一锅法酶水解‑氧化纤维素制备葡萄糖酸的方法，在含有纤维素原料的酶解体系中，加入里氏木霉纤维素酶，草菇纤维二糖脱氢酶、黑曲霉葡萄糖氧化酶，进行协同酶解反应，一锅法制备出葡萄糖酸。本发明利用纤维二糖脱氢酶氧化纤维素酶解主要产物纤维二糖为新的切入点，可消除葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖为葡萄糖酸单一路径的诸多不足，极大地定向强化水解酶系‑氧化酶系相互协同作用，提高木质纤维素酶水解效率和葡萄糖酸得率。该方法相比目前纤维素酶/葡萄糖氧化酶法分步水解和氧化技术，采用一锅法技术实现纤维素高效同步酶水解和氧化，具有纤维素酶水解和氧化效率高，工艺和设备简单，成本更低等优点，在利用木质纤维素制备葡萄糖酸中具有良好的应用潜力。
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公开(公告)号：CN111269948A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010199444.8
申请日：2020-03-19
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开一种利用甘油制备4-乙基苯酚方法，属于生物工程技术领域。该方法在大肠杆菌中构建了4-乙基苯酚的生物合成途径：以甘油为底物，在大肠杆菌中通过糖酵解途径和莽草酸途径合成酪氨酸，然后在酪氨酸氨解酶催化作用下，酪氨酸被转化为对香豆酸，随后，对香豆酸在酚酸脱羧酶的催化下生成4-乙烯基苯酚。最后，在苯酚还原酶的催化下，4-乙烯基苯酚被转化为4-乙基苯酚。本发明提供了一个新的4-乙基苯酚生产途径，该方法具有生产成本低，生产能耗低，环境污染小等优点，也为将来的大规模工业应用奠定了基础，具有重要的经济价值和社会效益。
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公开(公告)号：CN110184315A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910397024.8
申请日：2019-05-14
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种制备高浓度2-甲氧基-4-乙烯基苯酚的方法，以含有来自萎缩芽孢杆菌的酚酸脱羧酶BaPAD的重组大肠杆菌为生物催化剂，以5L生物反应器为反应容器，采用流加高浓度底物阿魏酸的方法，通过水/正辛醇两相体系制备高浓度2-甲氧基-4-乙烯基苯酚；在本发明中，2-甲氧基-4-乙烯基苯酚会选择性的进入有机相正辛醇中而阿魏酸却会保留在水相中，阿魏酸干粉既是该催化反应的底物，也可以用来调节体系的pH平衡，正辛醇是通过实验筛选出的最适用于催化阿魏酸制备2-甲氧基-4-乙烯基苯酚的有机试剂，最终2-甲氧基4-乙烯基苯酚浓度为1.6M，摩尔转化率为100％，已达到能够满足工业化生产需求的水平。
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公开(公告)号：CN109825485A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910230349.7
申请日：2019-03-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种阿魏酸酯酶EpFAE1及其编码基因和应用。所述的阿魏酸酯酶EpFAE1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因的DNA序列如SEQ ID NO.2所示。本发明从微细正青霉4-14中克隆得到阿魏酸酯酶EpFAE1的编码基因，并通过毕赤酵母对其重组载体进行表达，获得纯酶。通过试验证实，本发明的阿魏酸酯酶EpFAE1具有高比活性、高的酶解效率、高稳定性和一定的耐金属离子和耐盐性等优势，在医药保健、食品、饲料以及生物能源等领域具有重要应用前景。
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公开(公告)号：CN107059454B
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201710315856.1
申请日：2017-05-08
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: Y02W30/648
Abstract: 本发明公开了一种利用双功能融合酶Lip‑EG1CD进行废纸脱墨的方法，包括：废纸预处理，采用双功能融合酶脱墨处理，以及收集纸浆；其中，双功能融合酶为含内切型纤维素酶和脂肪酶活性的双功能融合酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1 所示。本发明将内切型纤维素酶和脂肪酶通过linkers连接起来，构建出含内切型纤维素酶和脂肪酶活性的双功能融合酶，具有较好的热稳定性、pH耐受性，是一种工业化应用的优质酶源。可以在中性条件下同时协同发挥二种酶的脱墨作用，可以降低酶成本，提高脱墨效率，在工业化应用中具有良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107586767A
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201711088472.7
申请日：2017-11-08
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种耐高温的内切木聚糖酶EpXYN1及其编码基因和应用，耐高温的内切木聚糖酶EpXYN1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的耐高温的内切木聚糖酶EpXYN1是微细正青霉中克隆得到的新的内切木聚糖酶，其最适温度为75℃，最适pH为5.5，能够耐受65℃的高温和良好的pH稳定性，对木聚糖的水解产物主要为木二糖，因此其在工业化应用中具有良好的应用前景。作为一种新型的木聚糖酶，其可广泛应用于生物质能源、食品、饲料、造纸以及医药保健等行业。
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公开(公告)号：CN105238821A
公开(公告)日：2016-01-13
申请号：CN201510748054.0
申请日：2015-11-06
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种制备4-乙烯基愈创木酚的方法，以地衣芽孢杆菌71722为生物催化剂，以高浓度阿魏酸为底物，通过水/有机溶剂两相体系高效制备4-乙烯基愈创木酚。本发明的制备4-乙烯基愈创木酚的方法，采用由水相和水不溶性有机溶剂组成的两相反应体系，在这个反应体系中，4-乙烯基愈创木酚会选择性的进入有机相而阿魏酸却会保留在水相中，从而提高产物的产量以及转化率。同时，地衣芽孢杆菌71722转化高浓度阿魏酸高效制备4-乙烯基愈创木酚的方法有条件温和，环境污染小，产物得率高，副产物少，生产步骤简单等优点，具有很大应用前景。
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公开(公告)号：CN104212786A
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201410426053.X
申请日：2014-08-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种对香豆酸脱羧酶BLPAD及其编码基因和应用，所述对香豆酸脱羧酶BLPAD的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明的对香豆酸脱羧酶BLPAD是从本实验室于堆肥中筛选得到的地衣芽孢杆菌CGMCC7172中克隆得到的新的对香豆酸脱羧酶，其最适温度为37℃，最适pH为6.0，具有良好的温度和pH稳定性，对多种有机溶剂有较好的耐受性，在进行两相体系转化对香豆酸及阿魏酸生产4-乙烯基酚类物质时，当底物浓度分别达到500mM时，摩尔转化率仍能分别达到97.02%和70.96%，最终产物4-乙烯基苯酚及4-乙烯基愈创木酚分别达到60.63g/L及58.30g/。因此其在生物法生产4-乙烯基酚类物质的工业化应用中具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN103255084B
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201310140820.6
申请日：2013-04-23
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种地衣芽孢杆菌，其分类命名为地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）7172，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.7172，保藏日期2013年1月18日，保藏地址中国北京。本发明的地衣芽孢杆菌7172及其应用，使用地衣芽孢杆菌生物转化阿魏酸生产香兰素是在高温条件下进行的，可以有效控制杂菌的生长，有利于工业生产。同时采用该方法环境污染小，生产周期短，产品环境友好，安全可靠，克服了长期以来采用化学合成法生产香兰素的弊端，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN103805586A
公开(公告)日：2014-05-21
申请号：CN201410084597.2
申请日：2014-03-10
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种碱性果胶酸裂解酶PelA及其编码基因和应用，所述碱性果胶酸裂解酶PelA的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明的碱性果胶酸裂解酶PelA是从食用菌草菇中克隆得到的新的果胶裂解酶酶，其最适温度为60℃，最适pH为10.0，具有良好的温度和pH稳定性，并且在无外源钙离子条件下仍具有高催化性能，因此其在工业化应用中具有良好的应用前景。另外其来源为食用菌因此安全性可靠，可广泛应用于食品，饲料以及医药等行业。
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