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公开(公告)号：CN104232698A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410268939.6
申请日：2014-06-17
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 一种利用固定化皱褶假丝酵母细胞制备3-羟基丙酸的方法，包括以下步骤：（1）固定化皱褶假丝酵母细胞的制备；（2）将固定化皱褶假丝酵母细胞接种至发酵培养基中摇床培养；（3）待培养结束后，无菌纱布过滤分离固定化皱褶假丝酵母细胞和发酵培养基，再重新加入与步骤（2）等体积的新鲜发酵培养基，培养条件同步骤（2）；（4）重复步骤（3）至固定化皱褶假丝酵母细胞完全破裂时终止培养；（5）利用高效液相色谱测定每次过滤分离的发酵培养基中3-羟基丙酸含量。本发明制备方法简便，操作程序易于控制，产量高，客服了传统未固定化菌种与发酵培养基难分离的问题，具有可重复利用，节约成本等优点。
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公开(公告)号：CN113774093B
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202111181253.X
申请日：2021-10-11
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种3‑羟基丙酸的补料发酵生产方法，属于微生物发酵技术领域；本发明所用菌株为汉逊德巴利酵母(Debaryomyceshansenii.)菌株IS451，保藏号为：CGMCC No.11893；发酵过程分为三个阶段：第一阶段为接种后48h内，第二阶段为接种后的第49‑96h，第三阶段为接种后的第97‑114h，所述第二阶段进行补料操作，补料成分为：葡萄糖、(NH4)2SO4、丙酸和甘油；所述第三阶段进行补料操作，补料成分为：葡萄糖、丙酸和植物油；利用本发明的生产方法，使得3‑羟基丙酸的发酵产量提升至58.39g/L，发酵周期降低至114h。
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公开(公告)号：CN113774093A
公开(公告)日：2021-12-10
申请号：CN202111181253.X
申请日：2021-10-11
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种3‑羟基丙酸的补料发酵生产方法，属于微生物发酵技术领域；本发明所用菌株为汉逊德巴利酵母(Debaryomyceshansenii.)菌株IS451，保藏号为：CGMCC No.11893；发酵过程分为三个阶段：第一阶段为接种后48h内，第二阶段为接种后的第49‑96h，第三阶段为接种后的第97‑114h，所述第二阶段进行补料操作，补料成分为：葡萄糖、(NH4)2SO4、丙酸和甘油；所述第三阶段进行补料操作，补料成分为：葡萄糖、丙酸和植物油；利用本发明的生产方法，使得3‑羟基丙酸的发酵产量提升至58.39g/L，发酵周期降低至114h。
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公开(公告)号：CN113683502A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202111137510.X
申请日：2021-09-27
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种3‑羟基丙酸粗品的提取方法，属于发酵液提取领域；包括以下步骤：(1)在3‑羟基丙酸发酵液中加入聚合氯化铝，在外加磁场作用下进行絮凝处理，之后过滤分离出水液；(2)在步骤(1)得到的水液中加入二氯甲烷，进行萃取，分离出二氯甲烷相；(3)将步骤(2)得到的二氯甲烷相中的二氯甲烷蒸干，加入去离子水进行溶解，再加入活性炭，进行脱色处理，过滤得到脱色后水液；步骤(3)得到的脱色后水液，加入二氯甲烷，再次进行萃取，分离出二氯甲烷相；(5)将步骤(4)得到的二氯甲烷相蒸干，加入甲苯溶解后，降温结晶，得到3‑羟基丙酸粗品；采用本发明的提取方法有效提升了3‑羟基丙酸粗品的一次提取率和产品纯度。
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公开(公告)号：CN113150992A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110479139.9
申请日：2021-04-23
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开一种产细菌素与阿魏酸酯酶的凝结芽孢杆菌的培养方法及应用，包括步骤：步骤一、采样及样品处理；步骤二、富集培养；步骤三、初筛；步骤四、复筛。本发明中发酵所产细菌素具有广泛的抗菌谱，对常见的致病菌如单核细胞增生李斯特菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌有较强的抑制作用，并能抑制包括副伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、痢疾杆菌和大肠杆菌在内的革兰氏阴性菌。本发明采用粗料培养基作为发酵原料，具有工艺简单、酶活性高、单位酶活生产成本低廉等优点，为阿魏酸酯酶的低成本化大规模生产提供依据。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112961812A
公开(公告)日：2021-06-15
申请号：CN202110439142.8
申请日：2021-04-23
Applicant: 徐州工程学院
IPC: C12N1/20 , C12N9/18 , C12P21/02 , A23K10/18 , A23K20/189 , A23K20/147 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开一种固态发酵制备富细菌素和阿魏酸酯酶的饲料添加剂的方法，包括步骤：步骤一、液体发酵剂的制备；步骤二、固态发酵培养基的制备；步骤三、固态发酵；步骤四、富细菌素及阿魏酸酯酶饲料添加剂的制备。应用本发明方法，固态发酵同时产生细菌素和阿魏酸酯酶，有效提高了发酵效率，降低了生产成本，一次发酵得到两种目的产物，有效提高阿魏酸酯酶的产量，缩短发酵周期，简化工艺设备，降低成本，益于工业化生产应用；采用固态发酵生产细菌素和阿魏酸酯酶，大大减少液体发酵产生的污水，从根本上有效解决污水排放问题，非常有利于环境保护。
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公开(公告)号：CN107988355A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711385021.X
申请日：2017-12-20
Applicant: 徐州工程学院
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种用于检测与有机磷农药相关的Ⅱ型糖尿病易感基因试剂盒，由PCR扩增引物和用于检测与有机磷农药相关的导致的Ⅱ型糖尿病易感基因的特异性寡核苷酸探针组成；提取样本DNA；将目的基因、目的基因的扩增引物、探针按照确定比例混合；通过荧光定量PCR仪进行实时荧光检测；待测样本基因型判读。本发明的试剂盒操作简单，节省时间、耗材和样本，灵敏度高、经济、安全、无污染，适用于检测人类全血、组织等全基因组DNA样本，且只需10ng-20ng基因组DNA，2小时内即可完成整个实验，最后检测过程只需要20-30分钟，具有很好的应用市场和经济效益，易规模化应用。
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公开(公告)号：CN106831401A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201611191875.X
申请日：2016-12-21
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种基于总线控制的3‑羟基丙酸生物发酵液分离提纯装置及其工作方法，由进液口、结晶桶、驱动电机、放液电磁阀、水箱、结晶析出结构、结晶沉积槽、支撑框架、LonWork总线控制系统组成；进液口位于结晶桶上方，进液口与结晶桶贯通连接，同时放液电磁阀与气液多相流加器串联；结晶桶结构为圆柱形，其外径在1.8m～2.5m之间；支撑框架为不锈钢管焊接而成，结晶桶与支撑框架固定连接；驱动电机固定连接在支撑框架一侧，驱动电机一端与结晶桶驱动连接。本发明的一种基于总线控制的3‑羟基丙酸生物发酵液分离提纯装置，该装置自动化程度高，分离效率高，对粒径大于0.2mm的晶粒分离效率达95％～97％，设备工作效率显著提高。
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公开(公告)号：CN106614758A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611223320.9
申请日：2016-12-27
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种棉花病害生物防治方法，属于棉花病虫害防治技术领域，具体步骤如下：(1)选取籽粒饱满的棉种用水浸泡，并上下搅拌均匀；(2)将浸泡好的棉种捞起晾干后播种在口径180mm花盆中；(3)将甲基营养芽孢杆菌置于液体LB培养基中摇床培养，即得菌悬液；(4)将保存的甘油菌悬液置于恒温培养箱中培养12～20h，即得单菌落；(5)挑取单菌落置于装有100～200mL摇瓶发酵培养基的三角瓶中摇床发酵24～36h，即得发酵液；(6)将发酵液进行离心并除去沉淀，即得上清液；将上清液过滤，即得甲基营养芽孢杆菌发酵液；(7)将甲基营养芽孢杆菌发酵液喷洒在棉苗上。本发明中防治方法对环境无污染且防治效果良好，适合在棉花防治技术领域推广。
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公开(公告)号：CN106479947A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610928917.7
申请日：2016-10-31
Applicant: 徐州工程学院
CPC classification number: C12N9/0008 , C12N15/70 , C12N2800/101 , C12P7/42 , C12Y102/0101
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产3-羟基丙酸基因工程菌及其构建方法与应用，本发明通过将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的乙醛脱氢酶基因和克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)中的甘油脱水酶基因连接到原核表达载体pET30a(+)上，构建了pET30a-ALDH-DHAB双基因原核表达载体，并将之转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，构建了高效发酵生产3-HP的基因工程菌，解决了化学工业合成3-HP耗能高、污染严重，而微生物发酵生产3-HP则产率低的问题。应用该工程菌发酵生产3-HP，产量高达8.442g/L，工艺简单、便于工业化应用。
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