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公开(公告)号：CN103740747A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201410045786.9
申请日：2014-02-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种使用自杀性载体去除大肠杆菌Nissle菌内隐秘质粒的方法，该方法是将自杀性载体与待去除的隐秘质粒构建成重组自杀质粒，所述自杀性载体具有抗性筛选标记和自杀载体特性；用构建的重组自杀质粒转化大肠杆菌Nissle，通过抗性筛选得到仅携带重组自杀质粒的大肠杆菌Nissle；再利用自杀性载体的自杀特性筛选出丢失重组自杀质粒的大肠杆菌Nissle，从而获得去除了隐秘质粒的大肠杆菌Nissle。本发明不存在常规使用的化学、物理方法对宿主菌造成的不良影响。本方法不会对宿主菌的基因组造成影响，亦不会影响宿主菌已知的生物学特性。
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公开(公告)号：CN118086305B
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202410322987.2
申请日：2024-03-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程和疫苗开发研究技术领域，具体涉及一种抑制猪轮状病毒的amiRNA及其应用。本发明提供了一种抑制猪轮状病毒的amiRNA，包括amiRNA‑323或amiRNA‑345。本发明所提供的amiRNA能够有效抑制猪轮状病毒，特别是PORV‑GD‑01‑2015毒株，经实施例验证，本发明所提供的amiRNA能有效抑制猪轮状病毒PORV‑GD‑01‑2015毒株的复制和增殖，也可与抗病毒药物联合使用并用于猪轮状病毒抗病体系的培育，为amiRNA疫苗开发治疗猪轮状病毒提供了一种行之有效的方法，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN118496323B
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202410695247.3
申请日：2024-05-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV‑2）囊膜主要糖蛋白GP5的保守中和表位QT7、核酸分子、表达载体、中和抗体及其应用。本发明将中和表位QT7插入鸡白痢沙门菌Peg菌毛，导入惰性载体菌S9H获得重组菌，重组菌表面能功能性表达展呈中和表位QT7，与猪源免疫血清在玻板上混合，2 min内通过观察是否产生肉眼可见的凝集颗粒判定反应的阴阳性，该凝集试验可以定性定量测定凝集抗体，且中和表位抗原QT7‑‑抗体直接介导的凝集试验测定的凝集抗体水平与经典的细胞中和试验测试的PRRSV‑2中和抗体水平呈强正相关，从而可使用本发明检测血清样品中是否存在抗PRRSV‑2中和抗体及中和抗体水平，在PRRSV‑2疫苗免疫效果，抗PRRSV‑2中和抗体评估和防控中具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN118620042A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410652936.6
申请日：2024-05-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开一株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株，产生抗新型冠状病毒（SARS‑CoV‑2）囊膜刺突S蛋白表面SNNLDSKVGG（SG10）表位的mAb，公开了特异、简捷、快速筛选靶向SG10表位的mAb的制备筛选方法。将SG10插入沙门菌V型分泌系统MisL载客域，在菌体表面表达展呈该表位作为优势免疫原，免疫小鼠制备杂交瘤细胞的免疫小鼠B细胞；将SG10表位插入沙门菌PEG菌毛操纵子并导入惰性载体S9菌，该表位在S9菌体表面功能性表达展呈，基于表达该表位的重组S9菌建立的SG10表位直接介导的间接凝集检测方法能特异性识别分泌mAb的杂交瘤细胞上清，产生SG10表位‑mAb直接介导的特异性凝集试验，精准和便捷地筛选出分泌抗SG10表位的mAb的阳性杂交瘤细胞，病毒感染细胞的间接免疫荧光方法验证该mAb特异性。
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公开(公告)号：CN118496323A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410695247.3
申请日：2024-05-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV‑2）囊膜主要糖蛋白GP5的保守中和表位QT7、核酸分子、表达载体、中和抗体及其应用。本发明将中和表位QT7插入鸡白痢沙门菌Peg菌毛，导入惰性载体菌S9H获得重组菌，重组菌表面能功能性表达展呈中和表位QT7，与猪源免疫血清在玻板上混合，2 min内通过观察是否产生肉眼可见的凝集颗粒判定反应的阴阳性，该凝集试验可以定性定量测定凝集抗体，且中和表位抗原QT7‑‑抗体直接介导的凝集试验测定的凝集抗体水平与经典的细胞中和试验测试的PRRSV‑2中和抗体水平呈强正相关，从而可使用本发明检测血清样品中是否存在抗PRRSV‑2中和抗体及中和抗体水平，在PRRSV‑2疫苗免疫效果，抗PRRSV‑2中和抗体评估和防控中具有潜在的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118480084A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410511457.2
申请日：2024-04-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种侵袭素D保守的B细胞表位及其在诊断沙门氏菌属病原体内感染中的应用。本发明所述的SipD存在目前公开所有基因组信息的912株肠道沙门氏菌和9株邦戈尔沙门氏菌中保守。在SipD蛋白保守的序列中，通过SipD B细胞表位预测获得都具有的保守的B细胞表位特征序列SEENNDERTL。该B细胞表位能在惰性载体S9菌体表面功能性表达展呈，基于S9菌体表面表达SL10建立的间接凝集检测方法仅与沙门氏菌属病原感染的血清样品发生特异性反应，与肠杆菌科其他的病原感染阳性血清无交叉反应以及无非特异性反应。该诊断方法具有特异、敏感、便捷和成本低廉等优势，有望成为沙门氏菌属病原体内感染诊断的技术手段。
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公开(公告)号：CN116715737B
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202211488632.8
申请日：2022-11-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/74 , C12N1/21 , G01N33/68 , G01N33/569 , C07K16/10 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了新型冠状病毒受体结合域B细胞表位的靶标抗原及其在鸡白痢沙门氏菌Peg菌毛展呈表达及其凝集抗体检测中的应用。本发明能检测到新冠灭活疫苗特异性凝集抗体，该敏感性显著高于传统血清学检测技术，且能检测到新冠灭活疫苗产生的特异性凝集抗体效价。鉴于本发明具有快速特异、敏感、便捷和成本低廉等优势，有望成为SARS‑CoV‑2早期感染诊断以及新冠疫苗免疫检测监测评估的重要技术和平台。
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公开(公告)号：CN117186190A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311372834.0
申请日：2023-10-23
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , C07K16/08 , C07K19/00 , C12N15/34 , C12N15/62 , C12N15/74 , C12N1/21 , G01N33/569 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒外囊膜蛋白p12靶标表位抗原及其在早期检测诊断中的应用。本发明所述的非洲猪瘟病毒外囊膜蛋白p12靶标表位抗原可特异性识别和结合针对非洲猪瘟病毒感染产生的特异性抗体，通过间接凝集试验形成靶标抗原‑抗体复合物聚合体的肉眼可见凝集反应，从而实现快速微量的便捷检测。特异性方面，靶标抗原检测系统均不与猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪圆环病毒（PCV）感染产生的阳性血清产生交叉反应。敏感性方面，感染非洲猪瘟后第3天即可检测到特异性抗体，该敏感性显著高于传统血清学检测技术。鉴于本发明具有特异、敏感、早期、快速等优势，有望成为非洲猪瘟早期感染诊断和鉴别诊断的重要技术和平台。
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公开(公告)号：CN116715737A
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202211488632.8
申请日：2022-11-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/74 , C12N1/21 , G01N33/68 , G01N33/569 , C07K16/10 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了新型冠状病毒受体结合域B细胞表位的靶标抗原及其在鸡白痢沙门氏菌Peg菌毛展呈表达及其凝集抗体检测中的应用。本发明能检测到新冠灭活疫苗特异性凝集抗体，该敏感性显著高于传统血清学检测技术，且能检测到新冠灭活疫苗产生的特异性凝集抗体效价。鉴于本发明具有快速特异、敏感、便捷和成本低廉等优势，有望成为SARS‑CoV‑2早期感染诊断以及新冠疫苗免疫检测监测评估的重要技术和平台。
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公开(公告)号：CN116375823A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202211587776.9
申请日：2022-12-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/205 , C12N15/31 , C12N15/74 , C12N1/21 , C07K16/12 , G01N33/569 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了携带幽门螺杆菌Hp毒力因子CagA和VacA的B细胞表位靶标抗原（TBEA）及其分别在鸡伤寒沙门氏菌SadA类型和YaiU类型的T5SS展呈表达及其检测Hp凝集抗体中的应用。本发明的特异性TBEA分别来自CagA和VacA，分别利用两种类型的T5SS展呈表达。通过间接凝集试验，验证菌体表面能展呈两种TBEAs，两种TBEAs精准识别和结合针对Hp抗体，形成TBEA‑抗体复合物聚合体，肉眼清晰可见，从而实现特异、敏感、快速的Hp凝集抗体检测。本发明能够特异性检测特异性凝集抗体，且该敏感性显著高于基于蛋白质抗原的传统血清学检测技术，且能定量检测特异性凝集抗体效价。
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