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公开(公告)号：CN106912270A
公开(公告)日：2017-07-04
申请号：CN201510981591.X
申请日：2015-12-24
IPC: A01G1/00
CPC classification number: A01G22/00
Abstract: 一种黄檗药用林高效培育方法，以当年生黄檗种子所得实生苗为苗源，在黄檗幼苗生长过程中，保持土壤含水量在50－70％；在移栽到大田3个月时，接种根内球囊霉菌根；并在每年生长过程中，每两个月增施氮磷钾营养液，定期疏林、间伐，每年保留侧枝平茬、摘顶，促进侧枝生长，使黄檗树总高控制在3.5米左右。黄檗生长8－10年，枝皮可采收，在采收药材当年使其保持干旱状态生长，直到9月份枝皮采收。本发明黄檗生长快，利用枝皮作为药材关黄柏的来源，并提高了其中的生物碱含量。
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公开(公告)号：CN102742505A
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201210252230.8
申请日：2012-07-20
IPC: A01H4/00
Abstract: 一种含小檗碱的黄檗愈伤组织培养方法，包括（1）制备外植体；（2）愈伤组织诱导：将（1）处理的黄檗叶片切成0.5×0.5～1.0cm2的块，黄檗茎段切成0.5～1.0cm长的段接入诱导愈伤组织培养基中诱导愈伤组织。该诱导愈伤组织培养基为：在1升MS基本培养基中加入蔗糖20～40g，琼脂粉5.8～7.6g、2，4－二氯苯氧乙酸0.5～2.5mg，6－（苄胺基）嘌呤0.5～2.0mg，pH为5.8，配制好的诱导愈伤组织培养基分装地培养瓶中，每瓶25毫升，在压力为0.1～0.15MPa下灭菌25分钟，将培养瓶置于温度为22～26℃、光照强度为40μmol·m-2·s-1的温度中培养，每天光照12～14小时，培养15～20天，待黄檗愈伤组织形成叶后，继续培养30～50天，至黄檗愈伤组织褐化。
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公开(公告)号：CN104593312A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510054612.3
申请日：2015-02-02
Applicant: 东北林业大学
CPC classification number: C12N9/0061 , C12Y110/03002
Abstract: 一株胞内表达枯草芽孢杆菌漆酶的基因工程菌株及实现该菌株分泌表达漆酶的诱导方法，涉及一株胞内表达枯草芽孢杆菌漆酶的基因工程菌株及实现该菌株分泌表达漆酶的诱导方法。该基因工程菌株的制备方法：一、芽孢杆菌基因组DNA的提取和细菌漆酶基因的克隆；二、重组表达菌株的构建。实现重组漆酶分泌表达的诱导方法：一、将工程菌株接入LB培养基培养至OD600为0.8；二、加入0.1mM IPTG和0.1mM CuSO4，25℃，120rpm培养4h，随后在30℃下静止培养。本发明所提供的诱导方法可显著提高重组漆酶分泌效果，操作简单，对于提高重组大肠杆菌分泌漆酶具有很好的参考价值。
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公开(公告)号：CN104593312B
公开(公告)日：2018-02-13
申请号：CN201510054612.3
申请日：2015-02-02
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 实现一株胞内表达枯草芽孢杆菌漆酶的基因工程菌株及高效产胞外漆酶的诱导方法，涉及一株胞内表达枯草芽孢杆菌漆酶的基因工程菌株及实现该菌株高效释放重组漆酶到培养基中的诱导方法。该基因工程菌株的制备方法：一、芽孢杆菌基因组DNA的提取和细菌漆酶基因的克隆；二、重组表达菌株的构建。实现重组漆酶高效产胞外漆酶的诱导方法：一、将工程菌株接入LB培养基培养至OD600为0.8；二、加入0.1mM IPTG和0.1mM CuSO4，25℃，120rpm培养4h，随后在30℃下静止培养。本发明所提供的诱导方法可有效将重组胞内漆酶释放到培养基中，相较于传统大肠杆菌分泌表达漆酶，其胞外漆酶产量得到显著提高，操作简单，对于工业大规模发酵胞外漆酶具有很好的参考价值。
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