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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110951692B
公开(公告)日：2020-12-18
申请号：CN201911221278.0
申请日：2019-12-03
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种糖皮质激素内分泌干扰联合效应的转基因细胞株，选用Hela细胞，转染带有绿色荧光蛋白标签的糖皮质激素受体，通过抗生素筛选，获得稳定转染GFP‑GR的Hela细胞株。还公开了该转基因细胞株的测定方法，包括：步骤1：根据糖皮质激素及其受体的作用机制，构建糖皮质激素内分泌干扰联合效应的转基因细胞株；步骤2：通过给药转基因细胞株，定量检测该细胞株在细胞质区域向细胞核区域移动的比率。该方法细胞受试载体可无限扩增使用，无额外损耗费用；通过高内涵筛选技术，可实现多个样本同步检测，具有成本低廉、通量极高、灵敏度较高的特点。该方法可在活体层面用于乳品、污水、养殖动物尿液等糖皮质素EDCs的检测。
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公开(公告)号：CN113406051B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110671066.3
申请日：2021-06-17
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种联合筛查鱼上皮细胞早期损伤的高通量分析方法，属于生物技术领域。所述分析方法包括：获取原代鱼上皮细胞；原代鱼上皮细胞是经传代获取的第一代细胞，再用探针组合对第一代细胞进行探针标记和共孵育；基于高内涵筛选系统，选择不同探针对应的荧光通道，对孵育后的细胞荧光表达量进行定量；基于标准化欧式距离针对Ca++、ROS和MMP 3个维度构建鱼上皮细胞早期损伤的分析模型，并对早期损伤影响进行综合判定。本发明构建一整套可实现鱼类感染细菌、病毒以及寄生虫后诱导早期损伤程度的综合判定程序；为研究药物对感染细菌、病毒以及寄生虫的鱼类的保护作用及其机制提供方法，为候选药物筛选以及耐药性研究等提供支撑。
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公开(公告)号：CN111500545A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010362024.7
申请日：2020-04-30
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/62 , G01N33/74
Abstract: 本发明公开了一种转基因工程细胞株以及基于该细胞株测定糖皮质激素类混合物的方法，该细胞株通过慢病毒感染方式，将绿色荧光蛋白GFP和糖皮质激素受体GR融合蛋白基因整合入Hela细胞染色体中，通过嘌呤霉素puro筛选，最终获取稳定表达GFP-GR的Hela细胞株。基于稳定表达GFP-GR的Hela细胞株，通过测定GFP-GR结合激素配体从细胞质区域迁移至细胞核区域的迁移比率，可高通量、低成本、快速检测不同样品中的糖皮质激素类混合物的阳性检出率，以地塞米松计灵敏度可达10-9mol/L，可通过对环境及食品中糖皮质激素类混合物含量的快速筛查，明确危害程度，指导风险防控。
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公开(公告)号：CN113406051A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110671066.3
申请日：2021-06-17
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种联合筛查鱼上皮细胞早期损伤的高通量分析方法，属于生物技术领域。所述分析方法包括：获取原代鱼上皮细胞；原代鱼上皮细胞是经传代获取的第一代细胞，再用探针组合对第一代细胞进行探针标记和共孵育；基于高内涵筛选系统，选择不同探针对应的荧光通道，对孵育后的细胞荧光表达量进行定量；基于标准化欧式距离针对Ca++、ROS和MMP 3个维度构建鱼上皮细胞早期损伤的分析模型，并对早期损伤影响进行综合判定。本发明构建一整套可实现鱼类感染细菌、病毒以及寄生虫后诱导早期损伤程度的综合判定程序；为研究药物对感染细菌、病毒以及寄生虫的鱼类的保护作用及其机制提供方法，为候选药物筛选以及耐药性研究等提供支撑。
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公开(公告)号：CN110951692A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911221278.0
申请日：2019-12-03
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种糖皮质激素内分泌干扰联合效应的转基因细胞株，选用Hela细胞，转染带有绿色荧光蛋白标签的糖皮质激素受体，通过抗生素筛选，获得稳定转染GFP-GR的Hela细胞株。还公开了该转基因细胞株的测定方法，包括：步骤1：根据糖皮质激素及其受体的作用机制，构建糖皮质激素内分泌干扰联合效应的转基因细胞株；步骤2：通过给药转基因细胞株，定量检测该细胞株在细胞质区域向细胞核区域移动的比率。该方法细胞受试载体可无限扩增使用，无额外损耗费用；通过高内涵筛选技术，可实现多个样本同步检测，具有成本低廉、通量极高、灵敏度较高的特点。该方法可在活体层面用于乳品、污水、养殖动物尿液等糖皮质素EDCs的检测。
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