公开(公告)号：CN109337926A

公开(公告)日：2019-02-15

申请号：CN201811207112.9

申请日：2018-10-17

Applicant: 佛山科学技术学院

Inventor： 林树茂 ,  刘咸 ,  谢夏兰 ,  岳孝亭 ,  罗来福 ,  史银魁

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种具有高let-7b成熟体表达量的单倍型鸡成肌细胞的构建方法，其包括：1)单倍型表达载体克隆；2)鸡原代成肌细胞培养；3)细胞转染。采用3000Reagents方法分别对鸡原代成肌细胞转染5种单倍型重组质粒，获得5种具有高let-7b成熟体表达量的单倍型成肌细胞。本发明构建出不同单倍型过表达载体，并转染至鸡原代成肌细胞以测定不同单倍型对let-7b成熟体表达量的影响，从而获得具有高let-7b成熟体表达量的单倍型鸡成肌细胞，推断出其表达量差异的原因是因为let-7b前体区上不同的SNP影响let-7b前体加工过程，从而导致let-7b成熟体表达量差异。

公开(公告)号：CN109337926B

公开(公告)日：2021-08-03

申请号：CN201811207112.9

申请日：2018-10-17

Applicant: 佛山科学技术学院

Inventor： 林树茂 ,  刘咸 ,  谢夏兰 ,  岳孝亭 ,  罗来福 ,  史银魁

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种具有高let‑7b成熟体表达量的单倍型鸡成肌细胞的构建方法，其包括：1)单倍型表达载体克隆；2)鸡原代成肌细胞培养；3)细胞转染。采用3000Reagents方法分别对鸡原代成肌细胞转染5种单倍型重组质粒，获得5种具有高let‑7b成熟体表达量的单倍型成肌细胞。本发明构建出不同单倍型过表达载体，并转染至鸡原代成肌细胞以测定不同单倍型对let‑7b成熟体表达量的影响，从而获得具有高let‑7b成熟体表达量的单倍型鸡成肌细胞，推断出其表达量差异的原因是因为let‑7b前体区上不同的SNP影响let‑7b前体加工过程，从而导致let‑7b成熟体表达量差异。