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公开(公告)号:CN118979054A
公开(公告)日:2024-11-19
申请号:CN202411003615.X
申请日:2024-07-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及杨树天冬氨酸转氨酶基因AspAT9转基因植物的构建方法及应用;所述构建方法包括以下步骤:S1、以毛果杨基因组数据库筛选出的PtAspAT9基因序列为参照,利用Primer3在线软件进行引物设计,并在引物5’端加上质粒的同源臂,设计基因特异性引物Asp9OE‑FW和Asp9OE‑REV;其中Asp9OE‑FW序列为SEQ ID NO.1,Asp9OE‑REV序列为SEQ ID NO.2;S2、提取南林895杨RNA并合成cDNA;S3、构建PtAspAT9基因的表达载体;S4、农杆菌介导的花序侵染法转化拟南芥;S5、转基因植株检测;S6、纯合体筛选;S7、转基因拟南芥镉胁迫处理,经过验证得到抗性增强的转基因植物。