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公开(公告)号：CN112877465B
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202110284668.3
申请日：2021-03-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉不同组织的荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。该荧光定量内参基因为UBI、CYP和SDH1基因，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。本发明通过柳杉转录组数据筛选了12个候选内参基因基因序列，利用三款内参基因稳定性评测软件对候选内参基因的稳定性进行评估，获得了柳杉不同组织的实时荧光定量PCR的最适基因UBI、CYP和SDH1。并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，并提高了检测结果的可信度。
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公开(公告)号：CN112899352B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202110316713.9
申请日：2021-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。本发明选取10个成熟且表达量较为丰富且稳定的miRNAs及3个常用miRNA的内参基因(5SrRNA，18SrRNA和U6)作为候选基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过5种算法评估候选基因的稳定性，获得了适用于柳杉各非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因，填补了柳杉非生物胁迫条件下没有miRNA荧光定量内参基因的现状，为柳杉非生物胁迫条件下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉miRNA基因功能研究提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN112877466B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202110293453.8
申请日：2021-03-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了激素胁迫下柳杉荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明通过检索文献资料和数据库选择并设计了本发明的15条候选内参基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对候选内参基因评价稳定性，并结合RefFinder进行综合分析，获得柳杉在SA、ABA、MeJA、GA3激素胁迫条件下的荧光定量最佳内参基因Actin、UBC、CYP和18S，填补了柳杉激素胁迫下没有内参基因的现状，为柳杉激素胁迫下的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉基因功能研究提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN112980990B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202110317491.2
申请日：2021-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉激素胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明根据文献资料查阅和数据库搜索最终选择了本实施所需的13条候选内参基因，通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对13个内参进行基因稳定性评价，以及RefFinder网址进行综合分析结果，获得了适用于柳杉GA3胁迫下荧光定量内参基因cln‑miR6725、novel1和18S，以及ABA胁迫下荧光定量内参基因U6和novel16。为柳杉不同激素胁迫下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，因而具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN112980989A
公开(公告)日：2021-06-18
申请号：CN202110317280.9
申请日：2021-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉不同组织的miRNA荧光定量内参基因及其引物和应用，属于植物分子生物学领域。本申请筛选了13个内参基因的基因序列，通过5种算法(delta‑CT、geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder)评估候选基因的稳定性，获得了柳杉不同组织的miRNA荧光定量内参基因：novel16、cln‑miR6725、novel1、U6、novel6和pab‑miR159a，并相应的设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，提高检测结果的可信度。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111788977A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN202010616099.3
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高柳杉实生苗成活率的种植方法，属于农业育苗技术领域。该方法包括以下步骤：1)母树的选择；2)球果的采收；3)球果的阴干处理；4)种子的低温冷藏；5)播种前对种子进行消毒处理和浸种催芽处理；6)栽植前准备栽培基质并对栽培基质进行消毒处理；7)种子发芽处理；8)移栽；9)移栽后管理。本申请摆脱了柳杉播种繁殖的季节限制，可一年四季进行柳杉实生苗繁殖；并缩短了柳杉种子发芽的时间，提前了约7d，通过直接在培养箱中生根2-3cm或出现真叶再直接进行移栽，保证了株行距，使苗光照充足，有利于减少病虫害，同时提高了成活率50％左右，有利于优质柳杉资源的保存。
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公开(公告)号：CN111763683A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010616253.7
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种柳杉基因CfICE1及其应用，属于基因工程技术领域。本发明从柳杉组织中克隆得到一个新的ICE基因，命名为CfICE1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过构建表达载体PBI-CfICE1转拟南芥进行功能验证，发现CfICE1在拟南芥中超表达促使拟南芥抗寒性增强；通过qRT-PCR技术对CfICE1基因在不同柳杉组织及不同低温胁迫下表达量进行分析，结果表明4℃时CfICE1在柳杉的种子和幼叶中表达量最高。以上结果表明CfICE1基因参与柳杉生长发育和低温胁迫的响应，并可应用在植物的抗逆基因工程改良中，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN110972789A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911299557.9
申请日：2019-12-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种交通道路滞尘型绿化配置方法，属于园林绿化行业。本申请的交通道路滞尘型绿化配置方法包括对交通道路的中央绿化带、两侧的行道树、两侧绿化隔离带或边坡进行滞尘型植物配置，滞尘型植物选自滞尘能力强的针叶类、乔木、灌木、草类等植物，所述乔木又分为落叶乔木和常绿乔木，所述灌木又分为常绿灌木和落叶灌木。不同的植物滞尘能力不同，根据合理设置道路绿化形式和合理搭配滞尘能力强的不同树种和草类，特别是对植物种类和在水平方向和纵向对不同高度、不同滞尘能力的滞尘型植物的合理搭配，不仅能最大程度的抑制扬尘的产生、降低PM2.5浓度，也充分发挥了对环境的美化的作用，具有很高的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN113897374B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202111381940.6
申请日：2021-11-19
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种柳杉CfMYB4基因及其应用，属于植物分子生物学技术领域。本发明所克隆的CfMYB4基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过基因克隆，多重序列比对，系统进化分析及功能验证，证实了CfMYB4基因的进化关系及生物学功能，并提供了一种该基因在促进木质素合成及次生壁形成的应用手段。本发明所克隆的CfMYB4基因将在柳杉材性相关遗传改良中发挥重要的作用。
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公开(公告)号：CN112795631B
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202110283554.7
申请日：2021-03-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉非生物胁迫下荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。上述非生物胁迫包括干旱胁迫，热害胁迫，低温胁迫和盐胁迫，本发明筛选并设计了15条候选内参基因，通过5种算法(delta‑CT、geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder)评估候选基因的稳定性，获得了适用于柳杉各非生物胁迫下荧光定量内参基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，并提高了检测结果的可信度。
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