H5亚型禽流感病毒核酸检测方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN101016570B

    公开(公告)日:2011-08-31

    申请号:CN200710008609.3

    申请日:2007-02-13

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: H5亚型禽流感病毒核酸检测方法及其试剂盒,涉及一种病毒。提供一种操作简便、实验可靠性高、可进行实时检测、灵敏度高、特异性好、周期短的H5亚型禽流感病毒核酸检测方法和试剂盒。步骤:1)寻求H5亚型禽流感病毒特有的保守序列作为待测靶基因;2)设计合成一对特异性引物,引物长度为18-30bp;3)根据保守序列设计合成一对Y型双链特异性荧光探针;4)使用步骤2中的一对特异性引物和步骤3中的Y型双链特异性荧光探针及PCR成份组成20μL荧光PCR反应体系的检测溶液,将荧光PCR反应体系的检测溶液装入PCR反应管;5)设置阳性对照模板和阴性对照模板,进行实时荧光PCR反应,获得检测结果。

    抗O型口蹄疫多肽-核酸双效类病毒颗粒疫苗及制备方法

    公开(公告)号:CN103656682A

    公开(公告)日:2014-03-26

    申请号:CN201310673567.0

    申请日:2013-12-11

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 抗O型口蹄疫多肽-核酸双效类病毒颗粒疫苗及制备方法,涉及口蹄疫疫苗。提供一种抗O型口蹄疫的多肽-核酸类病毒颗粒双效疫苗、疫苗的氨基酸序列和DNA序列、疫苗的制备方法和应用。所述疫苗具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。制备方法:将MS2的成熟酶蛋白和插入O型口蹄疫病毒的抗原决定簇第141~160位氨基酸基因片段的外壳蛋白基因一起连接到pET28a表达载体中构成如SEQ ID NO.2所示的DNA序列;设计引物将口蹄疫病毒3D基因如SEQ ID NO.3所示的序列的反义链扩增出来,连接到pCDF-Duet-1表达载体的MCS1处;然后将两个共表达载体转化到BL21(DE3)中。

    一种抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN101293099B

    公开(公告)日:2010-12-08

    申请号:CN200810071174.1

    申请日:2008-06-04

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及其制备方法,涉及一种多肽疫苗,提供一种能同时有效预防多种亚型禽流感病毒、且安全可靠的抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及制备方法。多肽疫苗是以病毒样颗粒形式存在,禽流感病毒M2e表位被有效呈递在病毒样颗粒表面,构成病毒样颗粒亚基的氨基酸序列和编码该氨基酸序列的DNA序列。设计相应的引物,得DNA序列;再插入到载体pMAL-c2x的多克隆位点区,形成多肽疫苗的表达载体质粒pMALc2x-M2eHBc+,重组质粒转化大肠杆菌得重组基因工程菌;接种培养,加入IPTG,诱导目的基因表达,离心收集菌体细胞,冻融,加入PBS缓冲液重悬菌体,离心取上清液,过滤纯化。

    抗O型口蹄疫多肽‑核酸双效类病毒颗粒疫苗及制备方法

    公开(公告)号:CN103656682B

    公开(公告)日:2017-04-12

    申请号:CN201310673567.0

    申请日:2013-12-11

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 抗O型口蹄疫多肽‑核酸双效类病毒颗粒疫苗及制备方法,涉及口蹄疫疫苗。提供一种抗O型口蹄疫的多肽‑核酸类病毒颗粒双效疫苗、疫苗的氨基酸序列和DNA序列、疫苗的制备方法和应用。所述疫苗具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。制备方法:将MS2的成熟酶蛋白和插入O型口蹄疫病毒的抗原决定簇第141~160位氨基酸基因片段的外壳蛋白基因一起连接到pET28a表达载体中构成如SEQ ID NO.2所示的DNA序列;设计引物将口蹄疫病毒3D基因如SEQ ID NO.3所示的序列的反义链扩增出来,连接到pCDF‑Duet‑1表达载体的MCS1处;然后将两个共表达载体转化到BL21(DE3)中。

    含O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒与制备方法及应用

    公开(公告)号:CN100564521C

    公开(公告)日:2009-12-02

    申请号:CN200710008843.6

    申请日:2007-04-17

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 含O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒与制备方法及应用,涉及一种病毒样颗粒。提供一种安全、耐核糖核酸酶、稳定性好、易保存、可全程监控RNA病毒提取、反转录、扩增以及最终检测的含有O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒与制备方法及应用。病毒样颗粒是指由MS2噬菌体外壳蛋白包裹含口蹄疫病毒IRES RNA的一种RNA-蛋白复合体,RNA-蛋白复合体的形状为球状,直径为24~28nm,具有耐核糖核酸酶的特性。制备步骤:初载体pET32a-CP的构建;终载体pET32a-CP-IRES的构建;病毒样颗粒的原核表达;病毒样颗粒的纯化。

    H5亚型禽流感病毒核酸检测方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN101016570A

    公开(公告)日:2007-08-15

    申请号:CN200710008609.3

    申请日:2007-02-13

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: H5亚型禽流感病毒核酸检测方法及其试剂盒,涉及一种病毒。提供一种操作简便、实验可靠性高、可进行实时检测、灵敏度高、特异性好、周期短的H5亚型禽流感病毒核酸检测方法和试剂盒。步骤:1)寻求H5亚型禽流感病毒特有的保守序列作为待测靶基因;2)设计合成一对特异性引物,引物长度为18-30bp;3)根据保守序列设计合成一对Y型双链特异性荧光探针;4)使用步骤2中的一对特异性引物和步骤3中的Y型双链特异性荧光探针及PCR成份组成20μL荧光PCR反应体系的检测溶液,将荧光PCR反应体系的检测溶液装入PCR反应管;5)设置阳性对照模板和阴性对照模板,进行实时荧光PCR反应,获得检测结果。

    巴戟天提取物在制备免疫佐剂的应用

    公开(公告)号:CN103372208B

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201210116643.3

    申请日:2012-04-19

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 巴戟天提取物在制备免疫佐剂的应用,涉及一种中药巴戟天提取物。巴戟天提取物,是指南药巴戟天经过乙醇浸泡后的水提取物。将巴戟天粉碎,加入乙醇浸泡,再加入第1次水煮沸,第1次过滤,得第1次滤液和药渣,在药渣中加入第2次水煮沸,第2次过滤后,得第2次滤液,将第2次滤液和第1次滤液混合,浓缩后加入PBS缓冲液,第3次过滤后除菌,得巴戟天提取物,可冷冻保存。巴戟天提取物可作为主要有效成分用于制备免疫佐剂,即巴戟天提取物可用于制备免疫佐剂,是一种可以增强抗原免疫保护效果的安全有效的疫苗佐剂。可应用于传统的减毒疫苗、灭活疫苗、DNA疫苗、多肽疫苗及灭活蛋白疫苗的免疫保护中。

    抗O型口蹄疫的类病毒颗粒疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN102512671A

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201110424728.3

    申请日:2011-12-16

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 抗O型口蹄疫的类病毒颗粒疫苗及其制备方法,涉及基因工程和免疫学领域。提供一种能有效地预防口蹄疫病毒的、且安全可靠的抗O型口蹄疫的类病毒颗粒疫苗及其制备方法,抗O型口蹄疫的类病毒颗粒疫苗的氨基酸序列和DNA序列,一种安全稳定的原核表达载体28a-CP-VP1;抗O型口蹄疫的类病毒颗粒疫苗的应用。所述抗O型口蹄疫的类病毒颗粒疫苗具有SEQ ID NO.1所示的构成抗O型口蹄疫的类病毒颗粒疫苗的氨基酸序列,可以利用大肠杆菌表达,且能够在大肠杆菌细胞内自主包装为类病毒颗粒结构,以类病毒颗粒形成存在。所述疫苗免疫后可诱导动物同时产生抗O型口蹄疫的抗体,制备安全,无减毒疫苗、灭活疫苗可能引起的致病作用。

    巴戟天提取物在制备免疫佐剂的应用

    公开(公告)号:CN103372208A

    公开(公告)日:2013-10-30

    申请号:CN201210116643.3

    申请日:2012-04-19

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 巴戟天提取物在制备免疫佐剂的应用,涉及一种中药巴戟天提取物。巴戟天提取物,是指南药巴戟天经过乙醇浸泡后的水提取物。将巴戟天粉碎,加入乙醇浸泡,再加入第1次水煮沸,第1次过滤,得第1次滤液和药渣,在药渣中加入第2次水煮沸,第2次过滤后,得第2次滤液,将第2次滤液和第1次滤液混合,浓缩后加入PBS缓冲液,第3次过滤后除菌,得巴戟天提取物,可冷冻保存。巴戟天提取物可作为主要有效成分用于制备免疫佐剂,即巴戟天提取物可用于制备免疫佐剂,是一种可以增强抗原免疫保护效果的安全有效的疫苗佐剂。可应用于传统的减毒疫苗、灭活疫苗、DNA疫苗、多肽疫苗及灭活蛋白疫苗的免疫保护中。

    一种抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN101293099A

    公开(公告)日:2008-10-29

    申请号:CN200810071174.1

    申请日:2008-06-04

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及其制备方法,涉及一种多肽疫苗,提供一种能同时有效预防多种亚型禽流感病毒、且安全可靠的抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及制备方法。多肽疫苗是以病毒样颗粒形式存在,禽流感病毒M2e表位被有效呈递在病毒样颗粒表面,构成病毒样颗粒亚基的氨基酸序列和编码该氨基酸序列的DNA序列。设计相应的引物,得DNA序列;再插入到载体pMAL-c2x的多克隆位点区,形成多肽疫苗的表达载体质粒pMALc2x-M2eHBc+,重组质粒转化大肠杆菌得重组基因工程菌;接种培养,加入IPTG,诱导目的基因表达,离心收集菌体细胞,冻融,加入PBS缓冲液重悬菌体,离心取上清液,过滤纯化。

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