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公开(公告)号：CN103073640A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201210107121.7
申请日：2012-04-13
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体及其制备方法和应用，特点是采用甲鱼系统性败血症球状病毒为抗原免疫产蛋母鸡，从免疫鸡蛋卵黄中提取得到特异鸡卵黄抗体粗提物，纯化后得到抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体纯品，包括甲鱼系统性败血症球状病毒抗原的制备步骤；蛋鸡免疫和收集免疫鸡蛋的步骤；最后分离和纯化得到抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体的步骤，并应用于制备预防和治疗因甲鱼系统性败血症球状病毒引起的相关疾病的药物、保健品或饲料添加剂，优点是该卵黄抗体纯度较高，且对甲鱼系统性败血症球状病毒有较强的抑制作用，同时高免卵黄的获取廉价、方便，便于低成本、大批量生产，其制备方法简便易行。
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公开(公告)号：CN102787099A
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201210018771.4
申请日：2012-01-20
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了对虾白斑综合症病毒的鸡胚培养方法，特点是采用SPF鸡胚作为对虾白斑综合症病毒的体外培养体系，选择预先培养了6-7天的健康鸡胚，将预先制备除菌了的对虾白斑综合症病毒接种液接种至鸡胚尿囊膜上，收集培养时间为5-10天的死亡鸡胚进行匀浆离心分离，得到含对虾白斑综合症病毒的上清液，优点是提供一种更高效、更适用的WSSV体外培养方法，以对WSSV进行快速、有效的体外传代培养，克服了在WSSV培养过程无合适培养体系，现有培养方法难以进行病毒传代培养的问题，因此鸡胚培养方法在WSSV中的应用将填补虾病毒鸡胚培养体系的空白，并为以后的研究与应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN102532312B
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201210019152.7
申请日：2012-01-20
Applicant: 宁波大学
IPC: C07K16/12 , C07K16/02 , G01N33/569 , A61K39/40 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了抗鳗弧菌卵黄抗体及其制备方法、效价检测方法和应用，特点是采用鳗弧菌为抗原免疫蛋鸡，收集高免疫鸡蛋，将免疫鸡蛋卵黄进行分离和纯化得到抗鳗弧菌卵黄抗体，包括制备鳗弧菌抗原并灭活步骤；将蛋鸡进行1次基础免疫和2～3次加强免疫并收集鸡蛋的步骤；最后通过离心分离、盐析和透析得到产品的步骤；并采用间接酶联免疫吸附试验检测抗鳗弧菌卵黄抗体的效价，该鳗弧菌卵黄抗体可用于由鳗弧菌引起的疾病的预防和治疗上，并可用于开发鳗弧菌检测试剂盒和免疫学上的免疫反应及诊断，优点是该卵黄抗体纯度较高，且对鳗弧菌有较强的抑制作用，同时高免卵黄的获取廉价、方便便于低成本、大批量生，其制备方法简便易行。
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公开(公告)号：CN102628031B
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201210019141.9
申请日：2012-01-20
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了甲鱼系统性败血症球状病毒的鸡胚培养方法，特点是采用SPF鸡胚作为甲鱼系统性败血症球状病毒的体外培养体系，选择预先培养了4-6天的健康鸡胚，将预先制备好的甲鱼系统性败血症球状病毒接种液接种至鸡胚卵黄囊内，继续培养直至鸡胚出现死亡，收集死亡鸡胚进行匀浆离心分离，得到含甲鱼系统性败血症球状病毒的上清液，优点是首次将鸡胚培养技术应用于甲鱼系统性败血症球状病毒的培养，可实现甲鱼系统性败血症球状病毒进行快速、高效的体外传代培养且稳定、便捷。
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公开(公告)号：CN102626514A
公开(公告)日：2012-08-08
申请号：CN201210018723.5
申请日：2012-01-20
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了一种甲鱼系统性败血症球状病毒灭活疫苗及其制备方法，特点是该疫苗含有保藏号为CGMCCNo.5378的经灭活的甲鱼系统性败血症球状病毒，其制备方法包括将病甲鱼内脏剪碎加入TNE缓冲液中，离心取上清液，再离心取白色沉淀，重悬于TNE缓冲液中，将沉淀离心后，取上清液再离心得到白色沉淀即纯化病毒的步骤，将纯化病毒用无菌生理盐水稀释到病毒蛋白终浓度0.5-1mg/ml，然后加入终体积0.5%的福尔马林恒温水浴锅灭活的步骤；将灭活病毒与弗式完全佐剂按体积比1：1完全乳化得到灭活疫苗的步骤，优点是首次提出了甲鱼系统性败血症球状病毒灭活疫苗具有安全、有效、免疫力强，其制备方法简单、易行。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110343782A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201810323694.0
申请日：2018-04-03
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明涉及一种甲鱼系统性败血症球状病毒的RT-PCR检测引物及其检测方法，其引物由正向和反向引物组成，正向引物及其寡核苷酸序列为：STSSSV-F：5’-GGGACCTTACGTTGGTTTCTACAC-3’、反向引物及其寡核苷酸序列为STSSSV-R：5’-GCCCTCCACCAATATACATTTCTC-3’。以该甲鱼系统性败血症球状病毒特异性引物组成的检测方法，是以待测样品的总RNA为模板进行RT-PCR，对产物进行电泳判定结果。该方法快速、准确、灵敏、特异，适合甲鱼系统性败血症球状病毒的快速、准确检测。
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公开(公告)号：CN103073640B
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201210107121.7
申请日：2012-04-13
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体及其制备方法和应用，特点是采用甲鱼系统性败血症球状病毒为抗原免疫产蛋母鸡，从免疫鸡蛋卵黄中提取得到特异鸡卵黄抗体粗提物，纯化后得到抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体纯品，包括甲鱼系统性败血症球状病毒抗原的制备步骤；蛋鸡免疫和收集免疫鸡蛋的步骤；最后分离和纯化得到抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体的步骤，并应用于制备预防和治疗因甲鱼系统性败血症球状病毒引起的相关疾病的药物、保健品或饲料添加剂，优点是该卵黄抗体纯度较高，且对甲鱼系统性败血症球状病毒有较强的抑制作用，同时高免卵黄的获取廉价、方便，便于低成本、大批量生产，其制备方法简便易行。
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公开(公告)号：CN102901816B
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201210107100.5
申请日：2012-04-13
Applicant: 宁波大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开了基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法，特点是包括将0.1ng/ul的甲鱼系统性败血症球状病毒抗原按100ul/孔加于聚苯乙烯96孔反应板中进行预包被，并采用牛血清白蛋白封闭液进行封闭的步骤；将每孔加入倍比稀释的甲鱼系统性败血症球状病毒卵黄抗体，并加入辣根过氧化酶标记的羊抗鸡IgG和邻苯二胺底物溶液显色反应的步骤；最后在酶标仪上读取各孔492nm波长处的吸光度值，测定孔吸光度值大于阴性对照孔均值2.1倍以上者判为阳性，优点是具有稳定性、特异性和灵敏度高、免疫干扰小、背景低等效果。
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公开(公告)号：CN102628030A
公开(公告)日：2012-08-08
申请号：CN201210019133.4
申请日：2012-01-20
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了三疣梭子蟹呼肠孤病毒的鸡胚培养方法，特点是采用SPF鸡胚作为三疣梭子蟹呼肠孤病毒的体外培养体系，选择3-4日龄健康鸡胚，将预先制备的三疣梭子蟹呼肠孤病毒接种液接种至鸡胚尿囊膜上，继续培养直至鸡胚出现死亡，收集培养时间为3-10天的死亡鸡胚分离出尿囊膜与尿囊液，将尿囊膜与尿囊液混合后匀浆、离心、过滤即得到含三疣梭子蟹呼肠孤病毒的上清液，优点是提供一种更高效、更适用的三疣梭子蟹呼肠孤病毒体外培养方法，以对病毒进行快速、有效的体外传代培养，克服了在三疣梭子蟹呼肠孤病毒培养过程无合适培养体系，将填补蟹类病毒鸡胚培养体系的空白，并为以后的研究与应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN102626514B
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201210018723.5
申请日：2012-01-20
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了一种甲鱼系统性败血症球状病毒灭活疫苗及其制备方法，特点是该疫苗含有保藏号为CGMCCNo.5378的经灭活的甲鱼系统性败血症球状病毒，其制备方法包括将病甲鱼内脏剪碎加入TNE缓冲液中，离心取上清液，再离心取白色沉淀，重悬于TNE缓冲液中，将沉淀离心后，取上清液再离心得到白色沉淀即纯化病毒的步骤，将纯化病毒用无菌生理盐水稀释到病毒蛋白终浓度0.5-1mg/ml，然后加入终体积0.5%的福尔马林恒温水浴锅灭活的步骤；将灭活病毒与弗式完全佐剂按体积比1：1完全乳化得到灭活疫苗的步骤，优点是首次提出了甲鱼系统性败血症球状病毒灭活疫苗具有安全、有效、免疫力强，其制备方法简单、易行。
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