公开(公告)号：CN104830747B

公开(公告)日：2018-01-16

申请号：CN201510244547.0

申请日：2015-05-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 周哲敏 ,  张晓欢 ,  崔文璟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N9/88 ,  C12P13/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高效表达高分子量型腈水合酶的基因工程菌及其应用，属于微生物基因工程技术领域。本发明所述的高分子量型腈水合酶基因nhhB(rbs)A(rbs)G是基于R.rhodochrous J1来源的腈水合酶基因bag，经密码子优化及表达元件改造之后化学合成得到，该基因全长1645bp，编码533个氨基酸，能够在大肠杆菌中成功表达。该方法高效安全，在24℃诱导16h即可获得96.7U/mL可溶性腈水合酶，纯化后比酶活高达234U/mg。该方法有利于生产过程中腈水合酶的提取纯化以及酰胺类物质的高效酶法合成。

公开(公告)号：CN104830747A

公开(公告)日：2015-08-12

申请号：CN201510244547.0

申请日：2015-05-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 周哲敏 ,  张晓欢 ,  崔文璟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N9/88 ,  C12P13/02 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N1/20 ,  C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12P13/02

Abstract: 本发明公开了一种高效表达高分子量型腈水合酶的基因工程菌及其应用，属于微生物基因工程技术领域。本发明所述的高分子量型腈水合酶基因nhhB(rbs)A(rbs)G是基于R.rhodochrous J1来源的腈水合酶基因bag，经密码子优化及表达元件改造之后化学合成得到，该基因全长1645bp，编码533个氨基酸，能够在大肠杆菌中成功表达。该方法高效安全，在24℃诱导16h即可获得96.7U/mL可溶性腈水合酶，纯化后比酶活高达234U/mg。该方法有利于生产过程中腈水合酶的提取纯化以及酰胺类物质的高效酶法合成。