公开(公告)号：CN116377132A

公开(公告)日：2023-07-04

申请号：CN202310176027.5

申请日：2023-02-28

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 张红 ,  王凡予 ,  方咏薇 ,  赵铭钦 ,  胡建东

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C01B32/198 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于植物病毒检测的技术领域，尤其涉及基于PCR的双信号荧光平台在TMV早期检测中的应用。本发明首次将双信号荧光平台和PCR扩增技术相结合，实现对TMV的检测，有效降低背景信号，并对产生的双荧光信号同时检测以实现相互校准的功能，不易受环境因素的干扰，避免了假阳性、假阴性的出现，线性范围为10 fM‑100 pM，检测限低至0.07 fM，显著提高了检测方法的可靠性、灵敏度和选择性。本发明设计简单、操作简便快速，以简要的技术方案有效解决现有技术中TMV检测假阳性等问题，对预防和控制烟草病毒病具有十分重要的意义，具有潜在的应用价值。

公开(公告)号：CN119220737A

公开(公告)日：2024-12-31

申请号：CN202411424641.X

申请日：2024-10-12

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 张红 ,  王闯 ,  王凡予 ,  王磊 ,  刘天

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于植物病毒检测的技术领域，尤其涉及一种基于PCR的比率型荧光体系在TMV早期检测中的应用。本发明利用荧光染料四甲基罗丹明（TAMRA）标记的引物及核酸染料SYBR Green I（SG）建立了一种快速、定量早期检测烟草花叶病的方法。SG具有优异的光物理特性、成本低、简单易用，且能特异性识别双螺旋DNA，成为迄今为止使用最广泛的实时检测荧光染料。比率型荧光传感器相较于传统的单信号荧光法具有灵敏度高、准确性强的特点。同时，为了验证该检测方法在实际应用中的价值，选取盆栽和大田烟叶样品进行分析，均取得了令人满意的效果。因此，结合比率型荧光法与PCR扩增技术可以早期快速准确检测烟草花叶病害，在烟草病毒病检测中具有很好的应用前景。