公开(公告)号：CN104087573A

公开(公告)日：2014-10-08

申请号：CN201410270513.4

申请日：2014-06-18

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 方长旬 ,  林文雄 ,  李程勋 ,  李颖哲 ,  林威鹏

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及一种水培液中微生物基因组DNA的提取方法，属于生物技术领域。本发明的提取方法先将水培液中的杂质通过定性滤纸进行过滤去除，进一步0.22μm的滤膜收集水体微生物，用液氮/65℃水浴的冻融方法破碎微生物细胞，再加入SDS及溶菌酶裂解细胞，CTAB结合蛋白质及多聚糖、游离核酸，加入酚、氯仿混合物萃取后，萃取液用异丙醇沉淀，最终获得水体微生物基因组DNA。利用该方法提取的核酸纯度较高，且产量较高。试验证明，此法提取的水体微生物DNA，完整性好，纯度较高，进一步纯化后可用于下游的基因组文库构建、qPCR、高通量测序等。

公开(公告)号：CN104087573B

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201410270513.4

申请日：2014-06-18

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 方长旬 ,  林文雄 ,  李程勋 ,  李颖哲 ,  林威鹏

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及一种水培液中微生物基因组DNA的提取方法，属于生物技术领域。本发明的提取方法先将水培液中的杂质通过定性滤纸进行过滤去除，进一步0.22μm的滤膜收集水体微生物，用液氮/65℃水浴的冻融方法破碎微生物细胞，再加入SDS及溶菌酶裂解细胞，CTAB结合蛋白质及多聚糖、游离核酸，加入酚、氯仿混合物萃取后，萃取液用异丙醇沉淀，最终获得水体微生物基因组DNA。利用该方法提取的核酸纯度较高，且产量较高。试验证明，此法提取的水体微生物DNA，完整性好，纯度较高，进一步纯化后可用于下游的基因组文库构建、qPCR、高通量测序等。