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公开(公告)号：CN110066759B
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN201910361159.9
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐金属离子和有机溶剂的羧酸酯酶及其应用，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs04在大肠杆菌中异源表达，得到的羧酸酯酶BaCEs04在Zn2+，NH4+存在下，分别提高了24.3％和23.5％的酶活，其余金属离子Na+，K+，Mg2+，Ca2+，Cu2+，Fe3+对酶活几乎没有影响甚至有略微的提高，说明该羧酸酯酶在存在金属离子的环境中较为稳定。该酶在丙酮，正己烷，异丙醇中放置1h后，酶活分别提高了22％、30％、26％，说明该酶具有较好的有机溶剂耐受性。
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公开(公告)号：CN110713997B
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN201911065858.5
申请日：2019-11-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降解产物均一的琼胶酶及其应用，属于酶工程领域。本发明将类芽孢杆菌(Paenibacillus odorifer)来源的琼胶酶AgaP1(其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示)在大肠杆菌中异源表达，其中粗酶液中琼脂糖和琼脂粉为底物的酶活分别为5716.68U/L和4116.96U/L。纯化得到的琼胶酶AgaP1纯酶液能够降解琼脂糖得到单一降解产物新琼二糖，是一种具有工业应用前景的琼胶酶。
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公开(公告)号：CN109456952B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201811449197.1
申请日：2018-11-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种可催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L，159位置处的Y突变成F，252位置处的T突变成A，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L/Y159F/T252A催化效率Kcat/Km为0.75min‑1·mM‑1，催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时，突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为78.95％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。
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公开(公告)号：CN109486785B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201811450486.3
申请日：2018-11-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L，得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L催化效率Kcat/Km提高了21.84倍，催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了7.72倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。
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公开(公告)号：CN109486780B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201811350818.0
申请日：2018-11-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶215位置处的I突变成M，得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体I215M催化效率Kcat/Km提高了17.39倍，催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了6.99倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110526418A
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201910763497.5
申请日：2019-08-19
Applicant: 江南大学
IPC: C02F3/34 , C02F9/14 , C12N1/14 , C02F101/34 , C02F101/38 , C02F103/20 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种利用固定化密孔菌降解养殖废水中抗生素的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将密孔菌Pycnoporus sp.SYBC-L10接种于菌包中，静置条件下培养30-40天菌丝长满培养基；S2、首先将含有四环类抗生素或磺胺类抗生素的养殖废液pH调整至3.0-6.0，后缓慢加入菌包中，静置孵育一段时间放出液体即可。本发明提供了一种利用固定化密孔菌降解养殖废水中抗生素的方法，既廉价又高效去除养殖废水中四环类和磺胺类抗生素的方法，与传统的物理化学法相比，绿色安全，环境友好，符合可持续发展需求，在未来治理环境中的抗生素应用中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN109486785A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811450486.3
申请日：2018-11-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω-转氨酶32位置处的Y突变成L，得到了一种催化效率得到提高的ω-转氨酶突变体。本发明突变体Y32L催化效率Kcat/Km提高了21.84倍，催化(R)-phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了7.72倍。本发明得到的突变体比天然ω-转氨酶更适用于在工业上的应用。
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公开(公告)号：CN109486784A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811449438.2
申请日：2018-11-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω-转氨酶32位置处的Y突变成L，190位置处的S突变成A，212位置处的L突变成M，215位置处的I突变成M，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体。本发明突变体Y32L/S190A/L212M/I215M催化效率Kcat/Km为0.64min-1·mM-1，催化(S)-5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-amine生成5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-one时，突变体的5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-one最大转化率为79.02％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。
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公开(公告)号：CN105602912B
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201510718557.3
申请日：2015-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体及其制备方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的pColdII‑CotA重组质粒为模板，将野生型CotA漆酶氨基酸序列的第417位Gly突变为Leu，随后以野生型CotA漆酶为对照，发现突变体G417L对底物2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的专一性，提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN109439635A
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201811234782.X
申请日：2018-10-23
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/70 , C12N1/21 , C02F3/34 , C02F103/30 , C02F101/38 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的CotA漆酶及其应用，属于酶工程技术领域。本发明的CotA漆酶突变体具有宽广的底物范围和高热稳定性，耐碱性环境，在染料脱色和环境有害物质的降解中表现突出。S208G/F227A双突变菌株催化效率是原来的5.1倍，在60℃，70℃，80℃条件下的半衰期分别为1.35h，0.51h和0.44h。在90℃条件下孵育5分钟仍有超过40％的酶活。将改造后的CotA突变酶用于降解4种染料。结果表明构建的突变体S208G/F227A重组菌株具有良好的工业应用前景。
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