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公开(公告)号：CN106282193B
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201610646875.8
申请日：2016-08-08
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/74
Abstract: 本发明公开了一种人胰多肽核酸适配体及其筛选方法和应用，人胰多肽核酸适配体为以Q10、5’‑Q11‑FAM‑3’、5’‑Q12‑FAM‑3’、5’‑BHQ1‑Q13‑3’、5’‑Q14‑BHQ1‑3’、5’‑SH‑Q16‑3’、5’‑SH‑Q17‑3’中的任意一种。其筛选方法包括合成随机文库和引物、GO‑SELEX筛选、PCR扩增文库、制备DNA单链文库、重复筛选、阴性筛选、多轮筛选等步骤。本发明的人胰多肽核酸适配体可应用于制备检测人胰多肽的试剂盒，具有比蛋白抗体更高的亲和力与特异性、无免疫原性、能够化学合成、分子量小、稳定、易于保存和标记等优势。
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公开(公告)号：CN103911379B
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201410111108.8
申请日：2014-03-24
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/115 , C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种用于检测人鼻咽癌细胞株CNE2细胞的核酸适配体及其衍生物、筛选方法和应 用 ，所 述 核 酸 适 配 体 为 a ：5 ’-CGTTCGTCAGGAGTAGAGGCXCCTGCTGACTGAACCTGACG-3’，b：与a所述核酸适配体具有60%以上同源性且具有检测人鼻咽癌细胞株CNE2细胞功能；c：在严紧条件下，与a或b的序列进行杂交的序列；或d：a、b或c的核酸适配体序列转录的RNA序列，本发明的核酸适配体的筛选方法可以极大的降低筛选重复次数；本发明还提供所述核酸适配体或核酸适配体衍生物在检测人鼻咽癌细胞株CNE2细胞或制备检测人鼻咽癌细胞株CNE2细胞的试剂盒中的应用。
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公开(公告)号：CN103898119B
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201410110983.4
申请日：2014-03-24
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/115 , A61K47/26 , A61K49/00 , G01N21/64 , A61K31/337
Abstract: 本发明公开了一种多西紫杉醇的核酸适配体、核酸适配体衍生物及其用途，多西紫杉醇的核酸适配体序列包括序列1或序列2所示的DNA片段。该核酸适配体可以是各种同源性较高的类似序列或由本发明序列得到的衍生物。本发明的核酸适配体及其衍生物可用作药物载体、或者用于药物设计与开发、药物分离与纯化、制备药物及其他制品、制备多西紫杉醇检测探针或靶点探针等，具有能够与多西紫杉醇高特异性和高亲和力结合、无免疫原性、能够化学合成、生物相容性好、分子量小、稳定、易于保存等优点。
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公开(公告)号：CN105385691A
公开(公告)日：2016-03-09
申请号：CN201511000281.1
申请日：2015-12-28
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/574
CPC classification number: C12N15/115 , C12N2310/16 , G01N33/57419 , C12N2310/315 , C12N2310/3181
Abstract: 本发明公开了一种用于检测人高转移结肠癌细胞株LoVo的核酸适配体及检测试剂盒，核酸适配体为核酸适配体J1、核酸适配体J3、核酸适配体J4、核酸适配体J7中的一种；核酸适配体J1的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的DNA片段；核酸适配体J3的核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示的DNA片段；核酸适配体J4的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示的DNA片段；核酸适配体J7的核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示的DNA片段。该核酸适配体免疫原性小、分子量小、易于保存和标记；可作为检测试剂盒检测人高转移结肠癌细胞株LoVo。
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公开(公告)号：CN103451182A
公开(公告)日：2013-12-18
申请号：CN201310418651.8
申请日：2013-09-13
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种裂开型核酸适配体探针及其在肿瘤细胞检测、捕获与释放中的应用方法，该探针包括将完整的核酸适配体序列在适当位点分裂后形成的片段a和片段b，二者与靶肿瘤细胞会发生特异性结合。检测方法包括在片段a和片段b分别连接荧光供体和荧光受体，通过检测供受体对的荧光共振能量转移信号强度来判断肿瘤细胞存在与否。捕获与释放方法包括将插入有连接片段的片段a修饰于捕获容器底部并向捕获容器中加入待捕获样品和片段b，在温度调控下实现对靶肿瘤细胞的捕获与释放。本发明的探针对靶肿瘤细胞具有特异响应性和温度敏感性，对肿瘤细胞的检测、捕获与释放方法简单、快速、灵敏、特异性强，有重要的科学价值和广阔的市场前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103205431A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201310099114.1
申请日：2013-03-26
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , C12Q1/68 , C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种核酸适配体，其序列包含序列1、序列2中任意一条序列所示的DNA片段。本发明的核酸适配体还可以是各种同源性较高的类似序列或由本发明序列得到的衍生物。本发明还公开了该核酸适配体的筛选方法，先合成随机单链DNA文库和引物，再Cell-SELEX筛选，PCR扩增文库，制备DNA单链文库，最后经重复筛选、阴性筛选和多轮筛选得到核酸适配体。本发明的核酸适配体及其衍生物可在识别人胆管癌细胞株QBC-939或者制备检测人胆管癌细胞株QBC-939的试剂盒中应用，具有比蛋白抗体更高的亲和力与特异性、无免疫原性、能够化学合成、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点。
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公开(公告)号：CN103087899A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310017262.4
申请日：2013-01-17
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于核酸适体的可捕获癌细胞的微流控芯片，由上层聚合物芯片和下层玻片载体可逆封接而成，两者之间设有细胞捕获通道，通道底表面表现为凹凸不平；底表面上固定有亲和素。微流控芯片的制备包括以下步骤：先通过光刻制作芯片模具，再浇铸得到聚合物芯片；玻片载体经氢氟酸处理后与聚合物芯片键合；最后在细胞捕获通道内固定亲和素制得微流控芯片。本发明的微流控芯片可用于癌细胞的分离，分离时先向样本中加入修饰有生物素的核酸适体，孵育；将孵育后的混合溶液通入微流控芯片中，混合溶液中的目标癌细胞通过生物素与亲和素的结合，实现对目标癌细胞的分离。本发明具有细胞捕获效率高、操作简便、通用性强、成本低等优点。
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公开(公告)号：CN102703596A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210200416.9
申请日：2012-06-18
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种黄嘌呤氧化酶-DNA复合物，其分子一端为黄嘌呤氧化酶，另一端为辅助探针，二者是通过sulfo-SMCC作为原料反应后生成的连接臂进行连接，连接臂包括4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷基团。该复合物的制备方法是先将辅助探针、缓冲液等混合、孵育，然后将黄嘌呤氧化酶与sulfo-SMCC振荡混合反应，最后将得到的辅助探针溶液和黄嘌呤氧化酶溶液混合。本发明的复合物可通过尿酸仪来检测目标DNA，其方法是取金膜预处理后加入捕获探针构建传感器；再加入待测目标溶液杂交后洗涤，加入复合物溶液杂交后洗涤；最后加入黄嘌呤，并用尿酸仪对反应产物进行检测。本发明的优点体现在操作方便、灵敏度高且选择性高。
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公开(公告)号：CN101812528B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010155148.4
申请日：2010-04-26
Applicant: 湖南大学
CPC classification number: A61K48/0058 , A61K49/0054 , C12Q1/6818 , C12Q1/6886 , G01N21/6428 , G01N21/6456 , G01N2021/6432 , C12Q2525/301 , C12Q2525/205
Abstract: 本发明属于核酸检测技术领域，具体公开了一种开关式核酸适体探针及其应用，该核酸适体探针包括探针本体和分别连接于该探针本体两端的荧光发生单元和荧光熄灭单元，探针本体包含有对目标肿瘤细胞具有特异性识别功能的核酸适体片段和与该核酸适体片段形成互补序列的核酸片段，核酸适体片段和核酸片段通过一7～15nm长的连接片段连接形成一发夹型结构；核酸片段竞争性杂交核酸适体片段的能力弱于目标肿瘤细胞。本发明探针的应用可以是对缓冲液中肿瘤活细胞的特异性检测、对血清中肿瘤活细胞的有效检测及活动物体内肿瘤的实时荧光成像和活体检测中的至少一种。本发明的探针具有较高稳定性、特异性和灵敏性，其应用操作简单、快速、灵敏、特异、成本低。
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公开(公告)号：CN102321616A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110273017.0
申请日：2011-09-15
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种利用微流控芯片筛选蛋白质的核酸适体的方法，包括以下步骤：将预先设定的起始核酸文库先与非靶标蛋白质孵育，得到优化核酸文库；然后将靶标蛋白质先与微珠孵育，将修饰有靶标蛋白质的微珠置入一微流控芯片通道内；再将优化核酸文库通入微流控芯片通道内，经过冲洗、洗脱，得到初筛核酸文库；对初筛核酸文库进行PCR扩增，扩增产物通过亲和柱分离，变性解链、脱盐后形成次一级核酸文库；以次一级核酸文库替代起始核酸文库并重复前述步骤，直至得到含目标核酸适体的核酸文库。本发明的方法具有通用性强、筛选时间短、筛选效率高、筛选效果好等优点。
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