一种酶催化制备氨基葡萄糖的方法
    131.
    发明公开

    公开(公告)号:CN115896075A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202111112478.X

    申请日:2021-09-23

    Abstract: 本发明公开了一种酶催化制备氨基葡萄糖的方法,属于生物技术领域。本发明提供了核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的氨基葡萄糖‑6‑磷酸脱氨酶编码基因,本发明以果糖为原料,采用氨基葡萄糖‑6‑磷酸脱氨酶和氨基供体(无机铵盐)直接将果糖催化合成为氨基葡萄糖(图1)。本发明以果糖为原料催化合成氨基葡萄糖仅需要1个酶的参与,转化率达到69.2~73.3%,比现有公开的酶法合成技术路线简单,具有工艺易控制、生产效率高及工业应用成本低的优点,适宜工业化推广应用。

    一种催化效率提高的CotA漆酶及其应用

    公开(公告)号:CN109439635B

    公开(公告)日:2020-11-06

    申请号:CN201811234782.X

    申请日:2018-10-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的CotA漆酶及其应用,属于酶工程技术领域。本发明的CotA漆酶突变体具有宽广的底物范围和高热稳定性,耐碱性环境,在染料脱色和环境有害物质的降解中表现突出。S208G/F227A双突变菌株催化效率是原来的5.1倍,在60℃,70℃,80℃条件下的半衰期分别为1.35h,0.51h和0.44h。在90℃条件下孵育5分钟仍有超过40%的酶活。将改造后的CotA突变酶用于降解4种染料。结果表明构建的突变体S208G/F227A重组菌株具有良好的工业应用前景。

    一种能够催化西他沙星五元环中间体的ω-转氨酶突变体

    公开(公告)号:CN109468297B

    公开(公告)日:2020-11-03

    申请号:CN201811449434.4

    申请日:2018-11-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种能够催化西他沙星五元环中间体的,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变,即将ω‑转氨酶212位置处的L突变成M,215位置处的I突变成M,得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体L212M/I215M催化效率Kcat/Km为0.64min‑1·mM‑1,催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时,突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为77.37%。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。

    一种可催化西他沙星五元环中间体的ω-转氨酶突变体

    公开(公告)号:CN109486783B

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201811449183.X

    申请日:2018-11-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可催化西他沙星五元环中间体的ω‑转氨酶突变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变,即将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成W,159位置处的Y突变成F,215位置处的I突变成M,252位置处的T突变成A,得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32W/Y159F/I215M/T252A催化效率Kcat/Km为0.49min‑1·mM‑1,催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时,突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为77.14%。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。

    一种漆酶高效降解四环类和磺胺类抗生素的方法

    公开(公告)号:CN110577936A

    公开(公告)日:2019-12-17

    申请号:CN201910763751.1

    申请日:2019-08-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种漆酶高效降解四环类和磺胺类抗生素的方法,包括以下步骤:S1、采用密孔菌Pycnoporus sp.SYBC-L10发酵产漆酶;S2、首先将含有四环类抗生素或磺胺类抗生素的废液pH调至3.0-6.0,然后加入S1中得到的漆酶,同时加入小分子介体ABTS或者丁香醛,静置孵育一段时间即可。本发提供了一个可以高效降解环境中四环类和磺胺类抗生素的漆酶及方法,比已报道的类似漆酶效果明显快(降解50mg L-1抗生素通常只需要5-10min),与传统的物理化学法相比,绿色安全,环境友好,符合可持续发展需求,在未来治理环境中的抗生素应用中具有广阔的应用前景。

    一种耐金属离子和有机溶剂的羧酸酯酶及其应用

    公开(公告)号:CN110066759A

    公开(公告)日:2019-07-30

    申请号:CN201910361159.9

    申请日:2019-04-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种耐金属离子和有机溶剂的羧酸酯酶及其应用,属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs04在大肠杆菌中异源表达,得到的羧酸酯酶BaCEs04在Zn2+,NH4+存在下,分别提高了24.3%和23.5%的酶活,其余金属离子Na+,K+,Mg2+,Ca2+,Cu2+,Fe3+对酶活几乎没有影响甚至有略微的提高,说明该羧酸酯酶在存在金属离子的环境中较为稳定。该酶在丙酮,正己烷,异丙醇中放置1h后,酶活分别提高了22%、30%、26%,说明该酶具有较好的有机溶剂耐受性。

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