一种通过基因工程构建的短小芽胞杆菌CotA漆酶

    公开(公告)号:CN105176940B

    公开(公告)日:2019-04-02

    申请号:CN201510716673.1

    申请日:2015-10-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体,属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的pColdII‑CotA重组质粒为模板,将野生型CotA漆酶氨基酸序列中的第386位Leu突变为Trp,随后以野生型CotA漆酶为对照,发现突变体L386W对底物2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的专一性,提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。

    一种可催化西他沙星五元环中间体的ω-转氨酶突变体

    公开(公告)号:CN109486783A

    公开(公告)日:2019-03-19

    申请号:CN201811449183.X

    申请日:2018-11-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可催化西他沙星五元环中间体的ω-转氨酶突变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变,即将ω-转氨酶32位置处的Y突变成W,159位置处的Y突变成F,215位置处的I突变成M,252位置处的T突变成A,得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体。本发明突变体Y32W/Y159F/I215M/T252A催化效率Kcat/Km为0.49min-1·mM-1,催化(S)-5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-amine生成5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-one时,突变体的5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-one最大转化率为77.14%。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。

    一种用蜜源菌制作天竺葵护肤酵素的方法

    公开(公告)号:CN107411054A

    公开(公告)日:2017-12-01

    申请号:CN201510575298.3

    申请日:2015-09-11

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: A23V2002/00 A23V2200/318

    Abstract: 本发明提供了一种用蜜源菌制作天竺葵护肤酵素的方法,其工艺特点是以天竺葵为主要原料,利用2013年6月24日保存于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为:CCTCC NO:M2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47的解淀粉芽孢杆菌为发酵菌株。按照体积比天竺葵∶原蜜∶纯净水为2-5∶1-3∶7-2加入后混合均匀制成天竺葵发酵原液,向发酵原液按照1-5%的比例将蜜源菌种子液接入后在温度25℃-35℃,pH值5.0-8.0条件下发酵6-14d后即可得到天竺葵护肤酵素粗成品。经过过滤筛数目为20-32目的粗过滤初步筛掉大颗粒残渣,后再经过过滤筛数目为80-100目的细过滤进一步滤掉小型颗粒残渣,即得到天竺葵护肤酵素。

    一种以百部为主要原料制备发酵杀虫剂的方法

    公开(公告)号:CN106879651A

    公开(公告)日:2017-06-23

    申请号:CN201710243489.9

    申请日:2017-04-14

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: A01N65/00 A01N65/46

    Abstract: 本发明提供了一种发酵百部制备杀虫剂的方法,其工艺特点是以百部为主要原料,辅以生活垃圾、淀粉类物质及水,以市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47为发酵菌株,按照百部:生活垃圾:淀粉类物质:纯净水=2~5:1~2:0.01:3~7的比例和体系2~5%的菌株接种量,发酵温度为25~35℃,转速为100~200rpm,保持pH=5~8,发酵时间6~9d。本发明完全发酵,使其中的多种酶、维生素、氨基酸和微量元素充分释放出来,使产品提高杀虫剂的药效及其功能。而且又不影响植物性杀虫剂的生理活性物质。

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