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公开(公告)号：CN106305428B
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201610780875.7
申请日：2016-08-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种翅果油树定芽增殖与植株再生的方法，该方法根据翅果油树腋芽处易萌发新芽的特点，采用成熟翅果油树种子无菌萌发获得实生苗，剪取带有腋芽或顶芽的幼嫩茎段为外植体，通过组织培养的方法促进腋芽萌发、伸长，获得具有一定木质化程度的健壮新枝，从而实现增殖的目的，然后经生根培养实现植株再生。本发明采用定芽增殖的方法，避开了传统的翅果油树组织培养方法中愈伤及不定芽诱导过程中易出现褐化的问题，操作简单、可行。
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公开(公告)号：CN106688895A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201710189443.3
申请日：2017-03-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用水杨酸进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法，包括杂交鹅掌楸悬浮系的建立、液体单细胞的获得及过渡、诱导杂交鹅掌楸体胚的发生步骤，在诱导杂交鹅掌楸体胚的发生时，在培养基中同时添加水杨酸和ABA，或单独添加水杨酸。本发明的利用水杨酸进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法，在杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生过程中，加入植物生长调节剂SA有效提高提高体胚诱导率、发育的同步性，提高杂交鹅掌楸体细胞工程种苗繁育的效益。
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公开(公告)号：CN106497968A
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201610954180.6
申请日：2016-11-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82
CPC classification number: C12N15/8206 , C12N15/8212
Abstract: 本发明公开了一种以悬浮细胞原生质体为受体的杂交鹅掌楸高效的瞬间基因表达方法，包括：杂交鹅掌楸悬浮系细胞原生质体的制备、质粒的准备、转化和观察。本发明以杂交鹅掌楸悬浮系细胞的原生质体做为遗传转化的受体系统，通过PEI介导的方法，以绿色荧光蛋白GFP基因作为报告基因，通过荧光显微镜检测到GFP基因高效的瞬间表达。本发明采用杂交鹅掌楸悬浮系细胞作为原生质体的来源，材料丰富且状态一致，背景信号弱，取材方便，建立的瞬间表达体系可为鹅掌楸及木兰科植物基因功能的研究提供一个快速方便的操作平台。
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公开(公告)号：CN106480085A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610954179.3
申请日：2016-11-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82
CPC classification number: C12N15/8206 , C12N15/8212
Abstract: 本发明公开了一种以叶肉原生质体为受体的杂交鹅掌楸高效的瞬间基因表达方法，包括：杂交鹅掌楸叶肉原生质体的制备、质粒的准备、转化和观察。本发明以杂交鹅掌楸叶肉细胞的原生质体做为遗传转化的受体系统，通过PEG介导的方法，以绿色荧光蛋白GFP基因作为报告基因，通过荧光显微镜检测到GFP基因高效的瞬间表达。本发明采用杂交鹅掌楸叶片作为原生质体的来源，取材方便，活力强，建立的瞬间表达体系可为鹅掌楸及木兰科植物基因功能的研究提供一个快速方便的操作平台。
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公开(公告)号：CN118995752A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411403434.6
申请日：2024-10-09
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了LhAHL15基因在诱导杂交鹅掌楸多倍体中的应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明首次公开的杂交鹅掌楸LhAHL15基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明构建杂交鹅掌楸LhAHL15基因的表达载体；将构建的杂交鹅掌楸LhAHL15基因的表达载体转化到杂交鹅掌楸中；培育筛选并获得多倍体转基因杂交鹅掌楸植株。构建得到的转基因体胚苗叶片颜色变深、叶片增厚、茎秆增粗、植株矮化、叶片总面积增大，叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量增加，周期蛋白基因及细胞壁扩展相关基因表达量增加。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118318733A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410456392.6
申请日：2024-04-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种四倍体杂交鹅掌楸的快繁方法，属于植物快繁技术领域。本发明将杂交鹅掌楸未成熟合子胚消毒后接种到固体愈伤诱导培养基中，然后用固体愈伤增殖培养基进行继代培养后，将其接种于液体愈伤增殖培养基中，进行愈伤组织预处理；将预处理后的愈伤组织接种于含安磺灵的液体愈伤增殖培养基中，进行愈伤组织的加倍处理后将其转置于体胚诱导培养基上，培育得到杂交鹅掌楸成熟体胚；将杂交鹅掌楸成熟体胚转移至基础培养基中，培养得到四倍体杂交鹅掌楸幼苗。得到的四倍体杂交鹅掌楸与二倍体杂交鹅掌楸在叶面积指数、叶长、叶宽等叶片的形态指标均存在显著差异，为进一步开展杂交鹅掌楸四倍体育种与遗传机理研究提供实验材料。
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公开(公告)号：CN108754005B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201810543378.4
申请日：2018-05-29
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸基因组的SNP标记的筛选方法，以北美鹅掌楸‘NK’和鹅掌楸‘LS’杂交获得的F1代个体为材料，以测序得到的鹅掌楸参考基因组为基础，运用Primer5.0软件设计PCR扩增引物并检验引物的扩增效率和特异性，从中挑选27个候选SNP位点进行引物设计，经过PCR扩增后利用琼脂糖凝胶电泳检测筛选结果，并通过种源材料验证，最终获得鹅掌楸基因组的SNP标记。本发明从鹅掌楸基因组数据库中挑选了27个SNP位点进行了引物合成，经过PCR扩增检测后送出测序，结果显示，所有的位点都为真实的SNP位点，说明SNP位点质量可靠，所用标准较好，得到的高质量SNP标记可用于遗传连锁图谱等后续工作。
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公开(公告)号：CN107760721A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201711260530.X
申请日：2017-12-04
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12N15/895 , A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种基因枪介导的杂交鹅掌楸转化体系的构建方法，包括：1）取杂交鹅掌楸胚性愈伤组织，进行高渗处理；2）提取质粒，制备金粉，制备微弹；3）基因枪轰击；4）将愈伤组织转移至恢复平日养鸡进行暗恢复培养；5）体胚诱导培养，长出体胚后进行光照培养，长出小苗后接种于生根培养基进行筛选培养；6）分子检测，获得杂交鹅掌楸转化体系。本发明的基因枪介导的杂交鹅掌楸转化体系的构建方法，不仅探索出了基因枪转化杂交鹅掌楸体系的可行性，还为今后用基因枪介导目的基因转化杂交鹅掌楸提供了可靠的实验基础，从而不仅为功能基因转化杂交鹅掌楸开创了一种新的技术，还为研究各功能基因在杂交鹅掌楸中的作用提供技术支持。
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公开(公告)号：CN107739738A
公开(公告)日：2018-02-27
申请号：CN201711258288.2
申请日：2017-12-04
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸纤维素合酶基因LcCESA1及其表达蛋白和应用，LcCESA1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明以模式植物拟南芥为研究对象，将克隆得到的中国鹅掌楸纤维素合酶基因LcCESA1利用农杆菌介导转化至拟南芥中，通过筛选与培育，最终获得T3代纯合转基因植株；通过观察野生型拟南芥与转基因拟南芥的显微结构，发现转基因拟南芥的茎段维管束组织细胞细胞壁和叶片组织细胞细胞壁的厚度，均与野生型拟南芥存在差异，可见LcCESA1基因对拟南芥茎段维管束组织细胞细胞壁和叶片组织细胞细胞壁均有影响，可促进纤维素的积累，将具有广泛的应用。
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公开(公告)号：CN106962191A
公开(公告)日：2017-07-21
申请号：CN201710184581.2
申请日：2017-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用茉莉酸甲酯进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法，包括种子灭菌、胚性愈伤组织的诱导、胚性悬浮细胞系的建立、液体单细胞的获得及过渡、诱导杂交鹅掌楸体胚的发生步骤，其特征在于，在诱导杂交鹅掌楸体胚的发生时，在培养基中添加茉莉酸甲酯和ABA，或单独添加茉莉酸甲酯。本发明的利用茉莉酸甲酯进行杂交鹅掌楸体快繁的方法，在杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生过程中，加入植物生长调节剂MeJa有效提高体胚诱导率、降低畸形率，进一步的提高杂交鹅掌楸体胚发生效率，具有很好的实用性，利于杂交鹅掌楸快繁体系的建立。
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