一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法

    公开(公告)号:CN110423742B

    公开(公告)日:2022-10-18

    申请号:CN201910698944.3

    申请日:2019-07-31

    Abstract: 一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法,构建含Ecoil短肽的铁蛋白重组质粒和含Kcoil短肽的酶重组质粒;将构建好的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株TOP10感受态细胞,获得相应的基因工程菌株;将基因工程菌接种于LB培养基中诱导培养,利用亲和层析和体积排阻色谱得到纯化的铁蛋白与酶;在纯化的铁蛋白内部空腔中合成Fe3O4;将获得的磁性铁蛋白与酶混合,通过Ecoil螺旋肽和Kcoil螺旋肽的相互作用,可形成磁性铁蛋白固定化酶。本发明采用基因融合,与以传统共价键的方式实现酶的固定化相比,避免了酶活性中心的破坏,明显提高了表面展示酶的效果和酶活,也大大降低了成本。

    一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法

    公开(公告)号:CN114533698A

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202210137407.3

    申请日:2022-02-15

    Abstract: 本发明公开了一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法,包括如下步骤:1)利用化学偶联法制备修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白;2)在特定离子强度条件下,利用温度法在步骤1)所得的铁蛋白内负载药物,制得铁蛋白载药纳米粒。本发明制得的修饰了肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒,具有较强的肿瘤穿透能力以及肿瘤细胞生长抑制作用,且D型RGERPPR肽修饰的铁蛋白‑紫杉醇载药纳米粒的效果最好,为后续药物靶向穿透至肿瘤细胞的治疗提供了良好的载药模型,具有很好的应用前景。

    蔗糖密度梯度离心分离铁蛋白纳米颗粒的方法

    公开(公告)号:CN111948589A

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN201910416453.5

    申请日:2019-05-17

    Abstract: 本发明涉及一种蔗糖密度梯度离心分离铁蛋白纳米颗粒的方法。该方法的具体步骤为:首先将蔗糖溶于缓冲液中,配制质量百分比浓度分别为20%,35%,50%,65%的蔗糖溶液,采用层铺法,依次缓慢滴加一定量的蔗糖溶液;然后将装载四氧化三铁后的铁蛋白样品缓慢加到蔗糖梯度溶液中;在4℃,50,000rpm,5h的条件下,进行水平离心;最后将混合液缓慢等分吸出,利用紫外分光光度计分别在280nm和410nm波长下分别测定所在蔗糖溶液层的蛋白质含量和铁含量。最终分离得到在铁蛋白空腔内装载了四氧化三铁的铁蛋白,实现了铁蛋白空腔内是否装载四氧化三铁的分离,为分离铁蛋白提供除磁场分离以外的另一种简便可行的方法。

    一种负载SN-38的铁蛋白纳米粒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114886873B

    公开(公告)日:2023-03-24

    申请号:CN202210677167.6

    申请日:2022-06-15

    Abstract: 本发明公开了一种负载SN‑38的铁蛋白纳米粒及其制备方法和应用,负载SN‑38的铁蛋白纳米粒包括,负载物,所述负载物为7‑乙基‑10‑羟基喜树碱;以及,载体,所述载体为脯氨酸、丙氨酸、丝氨酸组成的含有10个氨基酸残基的PAS10序列修饰的铁蛋白。本发明提高了SN‑38的水溶性、稳定性,并有效的延长药物在血浆中的半衰期;此外,纳米粒可以通过对肿瘤细胞转铁蛋白受体1的靶向性特异性地递送药物,最大程度的发挥SN‑38的抗癌效果,为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体模型,具有很好的应用前景。

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