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公开(公告)号:CN110423742B
公开(公告)日:2022-10-18
申请号:CN201910698944.3
申请日:2019-07-31
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法,构建含Ecoil短肽的铁蛋白重组质粒和含Kcoil短肽的酶重组质粒;将构建好的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株TOP10感受态细胞,获得相应的基因工程菌株;将基因工程菌接种于LB培养基中诱导培养,利用亲和层析和体积排阻色谱得到纯化的铁蛋白与酶;在纯化的铁蛋白内部空腔中合成Fe3O4;将获得的磁性铁蛋白与酶混合,通过Ecoil螺旋肽和Kcoil螺旋肽的相互作用,可形成磁性铁蛋白固定化酶。本发明采用基因融合,与以传统共价键的方式实现酶的固定化相比,避免了酶活性中心的破坏,明显提高了表面展示酶的效果和酶活,也大大降低了成本。
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公开(公告)号:CN114533698A
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN202210137407.3
申请日:2022-02-15
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K9/51 , A61K31/337 , A61K47/42 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法,包括如下步骤:1)利用化学偶联法制备修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白;2)在特定离子强度条件下,利用温度法在步骤1)所得的铁蛋白内负载药物,制得铁蛋白载药纳米粒。本发明制得的修饰了肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒,具有较强的肿瘤穿透能力以及肿瘤细胞生长抑制作用,且D型RGERPPR肽修饰的铁蛋白‑紫杉醇载药纳米粒的效果最好,为后续药物靶向穿透至肿瘤细胞的治疗提供了良好的载药模型,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111948589A
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN201910416453.5
申请日:2019-05-17
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种蔗糖密度梯度离心分离铁蛋白纳米颗粒的方法。该方法的具体步骤为:首先将蔗糖溶于缓冲液中,配制质量百分比浓度分别为20%,35%,50%,65%的蔗糖溶液,采用层铺法,依次缓慢滴加一定量的蔗糖溶液;然后将装载四氧化三铁后的铁蛋白样品缓慢加到蔗糖梯度溶液中;在4℃,50,000rpm,5h的条件下,进行水平离心;最后将混合液缓慢等分吸出,利用紫外分光光度计分别在280nm和410nm波长下分别测定所在蔗糖溶液层的蛋白质含量和铁含量。最终分离得到在铁蛋白空腔内装载了四氧化三铁的铁蛋白,实现了铁蛋白空腔内是否装载四氧化三铁的分离,为分离铁蛋白提供除磁场分离以外的另一种简便可行的方法。
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公开(公告)号:CN114886873B
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202210677167.6
申请日:2022-06-15
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K9/51 , A61K31/4745 , A61K47/42 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种负载SN‑38的铁蛋白纳米粒及其制备方法和应用,负载SN‑38的铁蛋白纳米粒包括,负载物,所述负载物为7‑乙基‑10‑羟基喜树碱;以及,载体,所述载体为脯氨酸、丙氨酸、丝氨酸组成的含有10个氨基酸残基的PAS10序列修饰的铁蛋白。本发明提高了SN‑38的水溶性、稳定性,并有效的延长药物在血浆中的半衰期;此外,纳米粒可以通过对肿瘤细胞转铁蛋白受体1的靶向性特异性地递送药物,最大程度的发挥SN‑38的抗癌效果,为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体模型,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN114668771B
公开(公告)日:2022-12-06
申请号:CN202210273421.6
申请日:2022-03-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K31/704 , A61K31/56 , A61K9/51 , A61K47/42 , A61P35/00
Abstract: 本发明提供了一种共负载两种药物的铁蛋白载药纳米粒的制备方法及应用,此纳米粒通过对肿瘤细胞转铁蛋白受体1(TfR1)的靶向性有效地递送两种药物,相比递送单一药物,本方法可进一步增强抗肿瘤疗效和减少耐药性的产生,并且本发明通过铁蛋白将两种药物共同装载,步骤简单,保留铁蛋白的原有结构完整,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN112426534B
公开(公告)日:2021-09-24
申请号:CN202011413895.3
申请日:2020-12-07
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种C端修饰肿瘤穿透肽RGERPPR的铁蛋白纳米粒子、其制备方法及应用。C端修饰肿瘤穿透肽RGERPPR的铁蛋白纳米粒子,通过连接序列将肿瘤穿透肽RGERPPR与铁蛋白C末端连接,肿瘤穿透肽RGERPPR暴露于铁蛋白的外部。本发明C端修饰肿瘤穿透肽RGERPPR的铁蛋白纳米粒子,具有较强的靶向能力和细胞穿透力,能够与肿瘤细胞有很强的结合,所制得的抗肿瘤药物有着很强的细胞毒性,为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体模型,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN113105556A
公开(公告)日:2021-07-13
申请号:CN202110195094.2
申请日:2021-02-20
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K38/10 , A61K47/64 , A61K9/51 , A61K47/42 , A61P35/00 , C12R1/19 , A61K31/337
Abstract: 本发明公开了一种修饰ERK多肽抑制剂的铁蛋白纳米粒子及其制备方法和应用,属于抗肿瘤药物制备技术领域。本发明提供的ERK多肽抑制剂修饰的铁蛋白纳米粒子,是将氨基酸序列为MPKKKPTPIQLNP的ERK多肽抑制剂,通过连接序列LEHHHHHHGGGGSGGGGSGGGGS与铁蛋白C末端连接,通过实验证明,本发明的C端修饰ERK多肽抑制剂MPKKKPTPIQLNP的铁蛋白纳米粒子,具有较强的肿瘤细胞生长抑制作用,不仅能够靶向肿瘤细胞,也能抑制肿瘤细胞的增殖生长,所制得的抗肿瘤药物有着很强的细胞毒性,为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN112426534A
公开(公告)日:2021-03-02
申请号:CN202011413895.3
申请日:2020-12-07
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种C端修饰肿瘤穿透肽RGERPPR的铁蛋白纳米粒子、其制备方法及应用。C端修饰肿瘤穿透肽RGERPPR的铁蛋白纳米粒子,通过连接序列将肿瘤穿透肽RGERPPR与铁蛋白C末端连接,肿瘤穿透肽RGERPPR暴露于铁蛋白的外部。本发明C端修饰肿瘤穿透肽RGERPPR的铁蛋白纳米粒子,具有较强的靶向能力和细胞穿透力,能够与肿瘤细胞有很强的结合,所制得的抗肿瘤药物有着很强的细胞毒性,为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体模型,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN112094861A
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN202011151848.6
申请日:2020-10-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/62 , C12P21/02 , C07K14/405 , C07K1/14 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/16 , A61K31/352 , A61K47/69
Abstract: 本发明公开了一种绿藻植物铁蛋白的表达纯化方法及其应用,绿藻植物铁蛋白的表达纯化方法,包括如下步骤:(1)重组蛋白表达工程菌的构建;(2)重组蛋白的表达和收获;(3)重组蛋白的分离纯化。本发明提供的绿藻植物铁蛋白安全,无毒副作用,还具有良好的补铁效果,在自然界中分布广泛;本发明所得的绿藻植物铁蛋白作为一种新的载体具有很好的应用前景,拓宽了铁蛋白的研究范围;将黄酮类化合物包封在蛋白质内部极大地提高了非水溶性生物活性物质的水溶性、稳定性、生物利用度,提高了生物活性物质在食品,医疗,保健等方面的应用。
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