公开(公告)号：CN116904424A

公开(公告)日：2023-10-20

申请号：CN202310112755.X

申请日：2023-02-14

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 王飞 ,  许蕊 ,  李迅 ,  王晓月 ,  陈紫荣

IPC: C12N9/20 ,  C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12P7/649 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种甜菜碱修饰毕赤酵母表面展示脂肪酶的制备方法及应用。本发明通过锚定蛋白Aga2，将疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶TLL分泌表达到重组毕赤酵母的细胞表面上，集表达、纯化、固定化于一体，获得全细胞催化剂。同时提出通过甜菜碱修饰提高表面展示脂肪酶TLL的稳定性的方法。本发明解决了生物酶法催化制备生物柴油过程中存在的脂肪酶不稳定与低效率的问题，同时也为生物酶法制备生物柴油提供了新型全细胞生物催化剂，具有良好的工业化应用前景。

公开(公告)号：CN115927288A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202210896280.3

申请日：2022-07-28

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 李迅 ,  季骁彦 ,  许蕊 ,  王飞

IPC: C12N11/14 ,  C12N9/20 ,  C07K19/00

Abstract: 本发明公开了一种固定化脂肪TLL酶及固体结合肽在其固定化中的应用，采用特定类型的固体结合肽与载体进行结合，与载体结合能力弱的杂质组分可在固定化后通过缓冲液的反复洗涤去除，载体上吸附的杂质数量相对较少，达到纯化的效果，有效保证了杂质的脱除效果和固定化酶的质量。本发明制备方法工艺条件温和、能耗低、操作简便、流程简单，有效地克服了传统的吸附法存在酶和固体载体表面吸附不牢，酶易流失的缺点。且通过本发明制备得到的固定化酶在热稳定性和pH稳定性方面相较于游离酶都有了一定的提升。

公开(公告)号：CN113817620A

公开(公告)日：2021-12-21

申请号：CN202110864275.X

申请日：2021-07-29

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 王飞 ,  许蕊 ,  李迅 ,  王旭 ,  蔡雨桐

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/113 ,  C12N15/66 ,  C12N9/20 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种甲酯诱导的双启动子毕赤酵母工程菌的构建及其应用，其包括如下步骤：构建表达载体、插入信号肽、插入启动子、更换表达载体中的信号肽、更换表达载体中的启动子、挑选高表达菌株、获得双启动子菌株。本发明的甲酯诱导工艺简单、安全且产量高，降低了脂肪酶的生产成本，具有良好的工业化应用前景。