一种微流控芯片中肿瘤组织培养及细胞外囊泡分型分析方法

    公开(公告)号:CN119736245A

    公开(公告)日:2025-04-01

    申请号:CN202411935507.6

    申请日:2024-12-26

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种微流控芯片中肿瘤组织培养及细胞外囊泡分型分析方法,包括如下步骤:步骤一,提供两条适体探针,包括结合PD‑L1蛋白的适体PD‑L1‑L(修饰第二荧光基团)、结合EpCAM蛋白的适体EpCAM‑L以及一条连接臂(包含荧光淬灭基团和第一荧光基团),步骤二,在芯片中培养肿瘤组织,并通过芯片上修饰的抗体捕获肿瘤组织分泌的细胞外囊泡;步骤三,肿瘤组织和两条适体探针孵育后再和连接臂孵育,肿瘤细胞产生第一荧光恢复,第二荧光淬灭的双开关模式,从而鉴定肿瘤细胞来源的细胞外囊泡;免疫细胞PD‑L1‑L的第二荧光保持,连接臂的第一荧光淬灭。从而进行肿瘤组织细胞外囊泡分型分析。

    一种新冠病毒SARS-CoV-2抗原的检测方法

    公开(公告)号:CN113447467B

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202110626139.7

    申请日:2021-06-04

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种新冠病毒SARS‑CoV‑2抗原的检测方法,属于生物技术领域。本发明通过新冠病毒SARS‑CoV‑2S蛋白免疫磁珠捕获纳米粒子与S蛋白发生特异性免疫之后,与免疫金信号纳米粒子孵育,构筑成三明治夹心结构;然后通过拉曼光谱仪,可直接测出其SERS信号,在5分钟内特异性检测出新冠病毒SARS‑CoV‑2蛋白,并且还能特异性检测出SARS‑COV‑2的假病毒及变异假病毒和稀释于人唾液中的假病毒。通过上述方式不需进行核酸提取或依赖抗体进行检测,同时具有稳定性好、特异性和亲和力更高、免疫原性低、易于化学修饰、操作简便等优势,并且能在五分钟内实现新冠病毒SARS‑CoV‑2抗原及变异病毒的快速检测,为早期检测2019SARS‑CoV‑2病原体创造了条件。

    SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体及其应用

    公开(公告)号:CN111849994B

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202010246548.X

    申请日:2020-03-31

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体,所述的核酸适配体包括如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。本发明的核酸适体能够提供SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白的快速、精准检测,同时适配体与血管紧张素转换酶(ACE2)有竞争作用,高效阻断SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白和ACE2结合,从而抑制病毒感染细胞,可作为药物用于防御和治疗SARS‑CoV‑2相关疾病,成为抗病毒的潜在药物。满足家庭、社区等多种应用场景的筛查需求,减少非必要的患者聚集,补充现有诊断和治疗体系。

    一种在人血浆中筛选的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110004147B

    公开(公告)日:2021-01-08

    申请号:CN201910164327.5

    申请日:2019-03-05

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种在人血浆中筛选的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法和应用,提供在人血浆复杂生理环境中能够高特异性识别、高亲和力结合上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体,发展了以人血浆模拟复杂生理环境的核酸适体筛选方法,可获得直接应用于外周血中捕获CTCs的核酸适体;最终获得的核酸适体具有易获得、成本低、不易失活、非免疫原性和无毒性等特点,并且利用该些序列实现了EpCAM蛋白、表达EpCAM蛋白的肿瘤细胞系的特异性识别及CTCs的捕获;另外,该些核酸适体在人血浆中具有高亲和力,确保其在生物分析和临床医学中的应用,并有望作为CTCs检测的分子识别工具而应用于液体活检。

    一种单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法

    公开(公告)号:CN103911432B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410076295.0

    申请日:2014-03-04

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法。涉及一种核酸适体筛选技术,建立快速、高效的单克隆表面展示核酸适体筛选新方法。所述方法包括如下步骤:(1)将氨基修饰的正向引物通过NHS-氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面;(2)将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面,每个微球上仅展示一种核酸序列;(3)通过单克隆微球库与靶标相关作用,可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度;(4)直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球,获取微球上的DNA序列,即可获得高质量核酸适体。该方法快速、高效、经济,实现了分子识别可视化监测,并可在无需克隆、测序、合成的条件下实现了富集库中核酸适体的快速筛选,获得选择性好、亲和力强的核酸适体。

    上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAMB及其制备方法

    公开(公告)号:CN103387990B

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201310328301.2

    申请日:2012-09-24

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM B及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。

    上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAMCcut及其制备方法

    公开(公告)号:CN103387988B

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201310328256.0

    申请日:2012-09-24

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM Ccut及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。

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