三疣梭子蟹呼肠孤病毒的鸡胚培养方法

    公开(公告)号:CN102628030B

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201210019133.4

    申请日:2012-01-20

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了三疣梭子蟹呼肠孤病毒的鸡胚培养方法,特点是采用SPF鸡胚作为三疣梭子蟹呼肠孤病毒的体外培养体系,选择3-4日龄健康鸡胚,将预先制备的三疣梭子蟹呼肠孤病毒接种液接种至鸡胚尿囊膜上,继续培养直至鸡胚出现死亡,收集培养时间为3-10天的死亡鸡胚分离出尿囊膜与尿囊液,将尿囊膜与尿囊液混合后匀浆、离心、过滤即得到含三疣梭子蟹呼肠孤病毒的上清液,优点是提供一种更高效、更适用的三疣梭子蟹呼肠孤病毒体外培养方法,以对病毒进行快速、有效的体外传代培养,克服了在三疣梭子蟹呼肠孤病毒培养过程无合适培养体系,将填补蟹类病毒鸡胚培养体系的空白,并为以后的研究与应用奠定基础。

    基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN102901816A

    公开(公告)日:2013-01-30

    申请号:CN201210107100.5

    申请日:2012-04-13

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法,特点是包括将0.1ng/ul的甲鱼系统性败血症球状病毒抗原按100ul/孔加于聚苯乙烯96孔反应板中进行预包被,并采用牛血清白蛋白封闭液进行封闭的步骤;将每孔加入倍比稀释的甲鱼系统性败血症球状病毒卵黄抗体,并加入辣根过氧化酶标记的羊抗鸡IgG和邻苯二胺底物溶液显色反应的步骤;最后在酶标仪上读取各孔492nm波长处的吸光度值,测定孔吸光度值大于阴性对照孔均值2.1倍以上者判为阳性,优点是具有稳定性、特异性和灵敏度高、免疫干扰小、背景低等效果。

    甲鱼系统性败血症球状病毒的鸡胚培养方法

    公开(公告)号:CN102628031A

    公开(公告)日:2012-08-08

    申请号:CN201210019141.9

    申请日:2012-01-20

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了甲鱼系统性败血症球状病毒的鸡胚培养方法,特点是采用SPF鸡胚作为甲鱼系统性败血症球状病毒的体外培养体系,选择预先培养了4-6天的健康鸡胚,将预先制备好的甲鱼系统性败血症球状病毒接种液接种至鸡胚卵黄囊内,继续培养直至鸡胚出现死亡,收集死亡鸡胚进行匀浆离心分离,得到含甲鱼系统性败血症球状病毒的上清液,优点是首次将鸡胚培养技术应用于甲鱼系统性败血症球状病毒的培养,可实现甲鱼系统性败血症球状病毒进行快速、高效的体外传代培养且稳定、便捷。

    抗鳗弧菌卵黄抗体及其制备方法、效价检测方法和应用

    公开(公告)号:CN102532312A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210019152.7

    申请日:2012-01-20

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了抗鳗弧菌卵黄抗体及其制备方法、效价检测方法和应用,特点是采用鳗弧菌为抗原免疫蛋鸡,收集高免疫鸡蛋,将免疫鸡蛋卵黄进行分离和纯化得到抗鳗弧菌卵黄抗体,包括制备鳗弧菌抗原并灭活步骤;将蛋鸡进行1次基础免疫和2~3次加强免疫并收集鸡蛋的步骤;最后通过离心分离、盐析和透析得到产品的步骤;并采用间接酶联免疫吸附试验检测抗鳗弧菌卵黄抗体的效价,该鳗弧菌卵黄抗体可用于由鳗弧菌引起的疾病的预防和治疗上,并可用于开发鳗弧菌检测试剂盒和免疫学上的免疫反应及诊断,优点是该卵黄抗体纯度较高,且对鳗弧菌有较强的抑制作用,同时高免卵黄的获取廉价、方便便于低成本、大批量生,其制备方法简便易行。

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