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公开(公告)号：CN114736889A
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202210377637.7
申请日：2022-04-12
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明涉及基因克隆，定点突变，基因重组技术，具体提供一种N端突变酶稳定性提升的壳聚糖酶突变体及其应用，属于酶工程领域。本发明将SaCsn46A的N端第2位脯氨酸突变为甘氨酸(P2G)，突变体在大肠杆菌Rosetta中进行表达。通过与野生型壳聚糖酶比较，发现突变酶在50℃的温度稳定性相比于野生菌型的温度稳定性提高了1.53倍。薄层色谱分析结果表明，该酶水解产物主要为氨基葡萄糖GlcN和(GlcN)2，说明突变体壳聚糖酶在温和条件下工业化生产GlcN和(GlcN)2方面具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114457057A
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202210242255.3
申请日：2022-03-11
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种壳聚糖酶突变体及其应用，所述壳聚糖酶突变体为糖苷水解酶壳聚糖酶氨基酸序列第154位点上的甘氨酸突变为缬氨酸，通过分析糖苷水解酶壳聚糖酶结构上的高去折叠自由能位点，以此选择突变位点进行饱和突变，筛选出温度稳定性提高的壳聚糖酶突变体，并在大肠杆菌中表达，制备的壳聚糖酶突变体温度稳定性显著提升，且在提高温度稳定性的同时对壳聚糖酶突变体的其他特性无影响，工业化生产具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114009782A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111120781.4
申请日：2021-09-24
Applicant: 常州大学
IPC: A23L33/125 , A23L33/21 , A23L5/10 , A23L7/10 , A23L29/00
Abstract: 本发明公开了一种含低聚异麦芽糖的麦芽糖食品制备方法，包括：先培养麦芽并制备糖化用米饭；将培养后的麦芽加水研磨，然后与糖化用米饭混合得到糖化物；向糖化物中加入α‑葡萄糖苷酶进行糖化，得到含低聚异麦芽糖的麦芽糖食品。本发明通过在传统麦芽糖制备糖化过程中添加α‑葡萄糖苷酶，与麦芽中的淀粉酶协同催化，同时进行糖化与转苷作用，将传统糖化过程产生的麦芽糖、葡萄糖、麦芽三糖等转化成低聚异麦芽糖，降低可消化糖总量，同时生成具有保健功能的低聚异麦芽糖，可制备出低可消化糖总量同时含有低聚异麦芽糖的麦芽糖食品。
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公开(公告)号：CN111549051A
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN202010500387.2
申请日：2020-06-04
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的谷氨酸棒杆菌及其改造方法和应用，通过对谷氨酸棒杆菌基因组进行改造，在argR基因中插入大肠杆菌的argBEc基因获得重组菌株。应用该改进的菌株进行发酵在发酵的过程中能够同时生成L-瓜氨酸和L-精氨酸。
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公开(公告)号：CN119410616A
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202411582572.5
申请日：2024-11-07
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种壳聚糖酶BsCsn46A突变体及其在制备壳四糖中的应用，通过对壳聚糖酶底物通道关键位点突变，获得产壳四糖潜力的壳聚糖酶突变体，属于酶工程领域。来源于枯草芽孢杆菌的GH46家族糖苷水解酶壳聚糖酶（BsCsn46A），氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。具体的：对BsCsn46A第50位氨基酸残基进行饱和突变，筛选出具有产壳四糖潜力的突变体，突变体为T50V，T50G，T50Y，T50L，T50F，T50S，T50I，T50R，T50C，T50D，T50P，T50Q，T50H，T50N。通过水解结果分析，与野生型水解产物相比，壳聚糖酶突变体更具有产壳四糖的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115873831A
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202211314541.2
申请日：2022-10-26
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开一种高催化活性及稳定性的壳聚糖酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。壳聚糖酶氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的壳聚糖酶第242位赖氨酸突变为脯氨酸(K242P)或谷氨酸(K242D)或苯丙氨酸(K242F)。本发明壳聚糖酶酶突变体与野生型壳聚糖酶相比，K242P比酶活提高了1.74倍，温度稳定性提高了1.67倍，K242D比酶活提高了1.87倍，K242D比酶活提高了1.84倍，其中K242P突变酶的比酶活与温度稳定性均得到了显著提升，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113755471A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202111004819.1
申请日：2021-08-30
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种壳聚糖酶突变体和工程菌及应用，属于酶工程技术领域。其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的壳聚糖酶第121位脯氨酸突变为天冬酰胺或半胱氨酸或缬氨酸。本发明壳聚糖酶突变体与野生型壳聚糖酶相比，三种突变体催化胶体壳聚糖获得壳寡糖的比酶活分别提高1.69、1.97及2.15倍，特别是P121N突变体，提高催化活性的同时，没有损失热稳定性，具备良好的应用前景；本发明还提供一种上述突变体的构建方法，通过分析该酶蛋白结构上的高去折叠自由能位点，以此选取突变位点，采用基因工程方法对该位点进行饱和突变，然后筛选目的蛋白。
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公开(公告)号：CN111647617A
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN202010499583.2
申请日：2020-06-04
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种生产L-瓜氨酸的谷氨酸棒杆菌及其改造方法和应用，通过对谷氨酸棒杆菌基因组进行改造，敲除argR基因的下游片段和argG基因的上游片段，并在敲除的片段中间插入大肠杆菌的argBEc基因获得重组菌株。应用该改进的菌株进行发酵在发酵的过程中能够增强L-瓜氨酸合成途径，同时，阻断了L-瓜氨酸向L-精氨酸转化途径，从而获得高纯度、高产量的L-瓜氨酸。
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公开(公告)号：CN119410615A
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202411582571.0
申请日：2024-11-07
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域，公开了一种具有产壳四糖能力的壳聚糖酶突变体及其应用。将来源于枯草芽孢杆菌的GH46家族糖苷水解酶壳聚糖酶（BsCsn46A），氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，对BsCsn46A第203位氨基酸残基进行饱和突变筛选出具有产壳四糖潜力的突变体，获得的壳聚糖酶突变体为E203M，E203S，E203R，E203H，E203N，E203C，E203Q，E203G，E203T，E203V，E203P。通过水解结果分析，获得的突变体具有产壳四糖的能力。
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公开(公告)号：CN116949015A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310871726.1
申请日：2023-07-17
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种酶催化活性提高的壳聚糖酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。所述壳聚糖酶来源于枯草芽孢杆菌的46家族糖苷水解酶（BsCsn46A），所述壳聚糖酶突变体为BsCsn46A氨基酸序列第203位谷氨酸突变成小体积侧链氨基酸丙氨酸，所述突变体为E203A，该突变体以壳聚糖为底物，催化活性比野生型显著提高。
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