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公开(公告)号:CN115975011A
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202310055518.4
申请日:2023-01-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于抗体制备技术领域,具体涉及一种针对p72蛋白的抗非洲猪瘟病毒的抗体。该抗体属于一种仅包括重链可变区VH与轻链可变区VL的单链抗体。本申请中,基于现有成熟噬菌体抗体库筛选技术,筛选获得了一个对非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72蛋白具有高亲和力的特异性scFv‑Fc抗体。初步实验结果表明,该单链抗体较好保留了对抗原的亲和活性,可以特异性的识别并结合衣壳蛋白p72;而且由于其分子量小、穿透力强,因此易于通过基因工程技术手段借助于原核或真核表达系统进行大量制备,可为非洲猪瘟病毒的检测、预防和治疗药物的开发奠定一定技术基础。
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公开(公告)号:CN113463112B
公开(公告)日:2022-09-23
申请号:CN202110760648.9
申请日:2021-07-06
Applicant: 河南农业大学
IPC: C25B1/04 , C25B11/085 , C08F220/06 , C08J9/28 , C08J3/075 , C08L33/02
Abstract: 本发明公开了一种三维网络结构过渡金属催化剂的制备方法,包括如下步骤:步骤一、制备中和度为65%~85%的丙烯酸/丙烯酸钾中和液;步骤二、将所述丙烯酸/丙烯酸钾中和液、引发剂、交联剂和硝酸钴混合均匀制备成混合溶液;步骤三、将混合溶液在室温下置于紫外灯下照射3‑25分钟得到水凝胶并清洗干燥处理;步骤四、将干燥后的水凝胶加热至500‑900℃维持3个小时后自然降温,得到具有三维网络结构的过渡金属催化剂。本发明制备的过渡金属催化剂具有三维网络结构,比表面积大,介孔容量高,电导率高,催化电解水产氧性能优异等特点。
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公开(公告)号:CN114990073A
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN202210584612.4
申请日:2022-05-27
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/24 , G01N33/577 , G01N33/68 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种抗猪CCL2蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用,属于生物技术领域。所述杂交瘤细胞系的保藏编号为CCTCC NO:C202279。通过杂交瘤融合筛选技术,成功制备了一株抗猪CCL2蛋白的单克隆抗体,并利用猪CCL2特异性兔多抗和鼠单抗建立了双抗体夹心ELISA的CCL2蛋白检测方法,评价了该方法在猪CCL2检测中的应用,为后续建立商品化定量夹心ELISA试剂盒提供了关键的抗体材料。
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公开(公告)号:CN112920268A
公开(公告)日:2021-06-08
申请号:CN202110305660.0
申请日:2021-03-19
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , C07K19/00 , C12N9/08 , G01N33/535 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开一种ASFV‑p54蛋白特异性的纳米抗体‑HRP融合蛋白及制备方法、应用,涉及生物技术领域;本发明提供一种ASFV‑p54蛋白特异性的纳米抗体‑HRP融合蛋白由纳米抗体p54‑Nb83与HRP串联而成,所述纳米抗体p54‑Nb83的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示;本发明还利用所述纳米抗体‑HRP融合蛋白作为灵敏探针,建立检测ASFV血清抗体的阻断ELISA,相比传统间接ELISA检测方法,所述阻断ELISA具有操作简单,成本低,灵敏度高,特异性强,稳定性好的优势,具有广阔的市场化及临床应用前景。
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公开(公告)号:CN119757738A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411717815.1
申请日:2024-11-27
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体公开了一种基于A型塞内卡病毒3A蛋白的间接ELISA检测试剂盒及其应用。本发明首次采用塞内卡病毒3A蛋白作为包被抗原,不仅能对血清中塞内卡病毒的抗体水平进行快速检测,还能准确区分感染动物和免疫动物。通过对猪群抗3A抗体进行检测,能更加直观地了解猪群的免疫状况,对塞内卡病毒病的诊断以及猪群塞内卡病毒疫苗免疫程序的调控和管理具有重要的意义。本发明提供的试剂盒能够快速检出临床血清样品中是否含有塞内卡病毒抗体,与商品化试剂盒以及IFA临床样品检测方法的最终符合率高达100%,敏感性和检出率均高于商品化试剂盒,且该试剂盒在4℃下稳定性良好,保存期至少可达90天。
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公开(公告)号:CN117250349A
公开(公告)日:2023-12-19
申请号:CN202310999275.X
申请日:2023-08-09
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/535
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体公开了一种非洲猪瘟病毒间接ELISA检测用样品稀释液、检测试剂盒及方法。本发明提供的非洲猪瘟病毒间接ELISA检测用样品稀释液包含大肠杆菌原核表达蛋白,其能有效降低待测血清样品自身背景的影响,阻断无关抗体的干扰,提高非洲猪瘟病毒抗体检测的特异性和敏感性。本发明提供的非洲猪瘟病毒间接ELISA检测试剂盒可以快速、准确地检测临床血清样品中是否存在非洲猪瘟病毒抗体,经验证与商品化试剂盒的符合率高达96.77%,且比商品化试剂盒的敏感性高,在4℃下稳定性良好,保存期至少可达60天,检测特异性强、重复性好,可用于临床血清样品的非洲猪瘟病毒抗体检测。
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公开(公告)号:CN118580345A
公开(公告)日:2024-09-03
申请号:CN202410646437.6
申请日:2024-05-23
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N5/20 , A61K39/12 , A61K39/395 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C07K14/01
Abstract: 本发明公开了抗非洲猪瘟病毒DP96R蛋白单克隆抗体、抗原表位肽与应用,属于生物技术领域。本发明提供的抗非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的单克隆抗体,利用原核表达系统成功制备ASFV DP96R蛋白单克隆抗体,经Western blot和IFA鉴定,证明了DP96R重组蛋白具有良好的免疫原性,制备的单克隆抗体具有良好的反应性和特异性。制备高质量和高效价的鼠抗ASFV DP96R单克隆抗体为研究DP96R蛋白功能提供了良好的工具。原核表达蛋白可用于血清学检测方法的建立。
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公开(公告)号:CN116574846A
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN202310592636.9
申请日:2023-05-24
Applicant: 河南农业大学 , 河南格悦检测技术有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体公开了一种检测猪星状病毒5型的实时荧光定量PCR试剂及方法。本发明以猪星状病毒5型毒株的ORF1ab基因的高度保守区作为靶基因,经鉴定灵敏性后筛选出一对PCR引物,并据此设计合成TaqMan探针,制备用于检测猪星状病毒5型的实时荧光定量PCR试剂。经验证,除PAstV‑5型外,本发明的检测试剂及方法对PRV、PPV、TGEV、PEDV病毒等均没有特征性扩增曲线,特异性和重复性良好,可检测到最低浓度为10copies/μL的病毒RNA,比常规RT‑PCR方法的敏感性高100倍,对临床采集的100份阳性待检病料进行检测,符合率良好。
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公开(公告)号:CN116396959A
公开(公告)日:2023-07-07
申请号:CN202310061705.3
申请日:2023-01-20
Applicant: 河南农业大学 , 河南格悦检测技术有限公司
IPC: C12N15/11 , C12N5/20 , C07K16/10 , C12P21/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本申请涉及一种抗猪星状病毒五型PAstV5单克隆抗体、引物、杂交瘤细胞株、制备、应用,属于猪星状病毒检测技术领域。本发明的抗猪星状病毒五型PAstV5单克隆抗体制备用杂交瘤细胞株的制备方法包括如下步骤:1)采用pET32a‑PAstV5‑Cap‑1融合蛋白对小鼠进行免疫;2)取步骤1)中免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞;3)对步骤2)制得的杂交瘤细胞进行筛选,得到阳性杂交瘤细胞;4)对步骤3)筛选得到的阳性杂交瘤细胞进行亚克隆,筛选即得。该细胞株能够稳定的分泌抗体,制得的PAstV5单克隆抗体ELISA效价可达到50万倍以上,并可应用于ELISA、WB、IFA中对PAstV5的检测。
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公开(公告)号:CN112920268B
公开(公告)日:2021-09-24
申请号:CN202110305660.0
申请日:2021-03-19
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , C07K19/00 , C12N9/08 , G01N33/535 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开一种ASFV‑p54蛋白特异性的纳米抗体‑HRP融合蛋白及制备方法、应用,涉及生物技术领域;本发明提供一种ASFV‑p54蛋白特异性的纳米抗体‑HRP融合蛋白由纳米抗体p54‑Nb83与HRP串联而成,所述纳米抗体p54‑Nb83的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示;本发明还利用所述纳米抗体‑HRP融合蛋白作为灵敏探针,建立检测ASFV血清抗体的阻断ELISA,相比传统间接ELISA检测方法,所述阻断ELISA具有操作简单,成本低,灵敏度高,特异性强,稳定性好的优势,具有广阔的市场化及临床应用前景。
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