公开(公告)号：CN116574846A

公开(公告)日：2023-08-11

申请号：CN202310592636.9

申请日：2023-05-24

Applicant: 河南农业大学 ,  河南格悦检测技术有限公司

Inventor： 万博 ,  郭娟娟 ,  张雨杭 ,  何文瑞 ,  韩世充 ,  张改平 ,  王亚楠 ,  胡曼 ,  王攀 ,  钟函 ,  柳顺达 ,  郭科威 ,  凌向辉 ,  付云龙 ,  韩光晖 ,  宋智慧

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体公开了一种检测猪星状病毒5型的实时荧光定量PCR试剂及方法。本发明以猪星状病毒5型毒株的ORF1ab基因的高度保守区作为靶基因，经鉴定灵敏性后筛选出一对PCR引物，并据此设计合成TaqMan探针，制备用于检测猪星状病毒5型的实时荧光定量PCR试剂。经验证，除PAstV‑5型外，本发明的检测试剂及方法对PRV、PPV、TGEV、PEDV病毒等均没有特征性扩增曲线，特异性和重复性良好，可检测到最低浓度为10copies/μL的病毒RNA，比常规RT‑PCR方法的敏感性高100倍，对临床采集的100份阳性待检病料进行检测，符合率良好。

公开(公告)号：CN116396959A

公开(公告)日：2023-07-07

申请号：CN202310061705.3

申请日：2023-01-20

Applicant: 河南农业大学 ,  河南格悦检测技术有限公司

Inventor： 万博 ,  张改平 ,  郭娟娟 ,  张雨杭 ,  何文瑞 ,  韩世充 ,  王亚楠 ,  李华玮 ,  王攀 ,  钟函 ,  任豪杰 ,  柳顺达 ,  付云龙

IPC: C12N15/11 ,  C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  C12P21/08 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本申请涉及一种抗猪星状病毒五型PAstV5单克隆抗体、引物、杂交瘤细胞株、制备、应用，属于猪星状病毒检测技术领域。本发明的抗猪星状病毒五型PAstV5单克隆抗体制备用杂交瘤细胞株的制备方法包括如下步骤：1)采用pET32a‑PAstV5‑Cap‑1融合蛋白对小鼠进行免疫；2)取步骤1)中免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞；3)对步骤2)制得的杂交瘤细胞进行筛选，得到阳性杂交瘤细胞；4)对步骤3)筛选得到的阳性杂交瘤细胞进行亚克隆，筛选即得。该细胞株能够稳定的分泌抗体，制得的PAstV5单克隆抗体ELISA效价可达到50万倍以上，并可应用于ELISA、WB、IFA中对PAstV5的检测。