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公开(公告)号:CN118703477A
公开(公告)日:2024-09-27
申请号:CN202411038826.7
申请日:2024-07-31
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,具体涉及一种高热稳定性高葡萄糖耐受性的β‑葡萄糖苷酶突变体及其应用。本发明采用计算机模拟联合回复突变的方法,通过利用一次突变、二次突变、表达、纯化等技术手段,以近暗散白蚁的肠道中的β‑葡萄糖苷酶Bgl8为基础,获得高热稳定性、高葡萄糖耐受性β‑葡萄糖苷酶突变体,该突变体包括476个氨基酸,具有优异的热稳定性以及葡萄糖耐受性,半衰期从49 h增加到了110 h,提升了2.24倍,催化活性从1.001(kcat/Km)增加到了2.914(kcat/Km),提高了2.91倍;本发明最终得到的二次突变体葡萄糖耐受性稍有下降,其IC50为1.35 mol/L,但仍满足在实际生产条件下的标准。证明了本发明采用的计算机辅助协同定点突变的方法具有良好的实验可行性和应用前景。
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公开(公告)号:CN118165950A
公开(公告)日:2024-06-11
申请号:CN202410304852.3
申请日:2024-03-18
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,具体涉及昆布寡糖磷酸化酶在合成昆布寡糖中的应用及多酶催化体系。本发明通过对昆布寡糖磷酸化酶THA_1941催化葡萄糖和葡萄糖‑1‑磷酸合成昆布寡糖的反应条件进行优化、调整,获得了具有不同聚合度及生物活性的昆布寡糖,开发出了一种新型的可制备不同聚合度且具有生物活性昆布寡糖的工艺方法。本发明还进一步开发了以玉米秸秆为底物,先制备G1P,再通过调整底物浓度,利用昆布寡糖磷酸化酶合成特定聚合度及功能活性的昆布寡糖的工艺方法。该方法中使用的原料为秸秆,来源丰富、价格低廉,且由玉米秸秆制备的葡萄糖和G1P在THA_1941的催化下可高效合成特定聚合度的功能性昆布寡糖,具有合成效率高、绿色环保的特点。
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公开(公告)号:CN117343873A
公开(公告)日:2024-01-05
申请号:CN202311291074.0
申请日:2023-10-08
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N1/20 , C12N1/14 , C05F17/20 , C05F11/00 , C12R1/685 , C12R1/645 , C12R1/07 , C12R1/125 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开一种秸秆高效降解与氨同化的双功能复合菌剂、其制备方法及应用,是由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)R0‑2、芽孢杆菌(Bacillus Sp.)D‑51、黑曲霉(Aspergillus niger)BLH‑22、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)与烟草肠杆菌(Enterobacter tabaci)Etb12组成。本发明中的双功能复合菌剂,在37℃的室内恒温下,降解效率达到26.48%,较不添加微生物菌剂的对照组提高了30.7%。在14.4℃的自然环境中可以高效降解玉米秸秆,加快腐解时间,提前60 d达到不添加菌剂的对照组中秸秆的最终腐解程度;同时微生物菌剂的添加可以影响堆体中氮素的转化并减少堆肥过程中的氨排放量,堆肥制作初期的氨排放量较未添加菌剂的对照组减少29.85%,起到消减氮素污染排放的目的。
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公开(公告)号:CN114606209B
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202011399467.X
申请日:2020-12-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于酶工程技术领域,具体涉及一种热稳定性高的突变体Cblac‑Mut8漆酶。本发明通过设计得到一种热稳定性强的突变体Cblac‑Mut8漆酶;经酶学性质研究,该酶最适温度为60℃,最适pH=4.0。在50℃时,Cblac‑Mut8酶活半衰期达到48h以上;在60℃时,Cblac‑Mut8酶活半衰期也可达到26.6h。而且,与Cblac漆酶(WT)相比,50℃时突变体Cblac‑Mut8的催化活性(kcat/Km)比WT提高了9.5倍,对于温度的耐受性更强,催化活性更高。本发明的技术效果与现有技术相比,所得突变体Cblac‑Mut8对孔雀石绿的降解能力强于大多数已报到漆酶,是一种具有很高工业应用前景的漆酶。
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公开(公告)号:CN116355977A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202310584534.2
申请日:2023-05-23
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于木质纤维素原料预处理技术领域,具体涉及一种利用MoS2活化过硫酸盐催化体系促进木质纤维素原料降解的方法。本发明通过利用MoS2对过硫酸盐进行活化,提高硫酸根自由基的生产效率,提出了一种利用MoS2活化过硫酸盐催化体系,用于木质纤维素的预处理。本发明所述利用MoS2活化过硫酸盐催化体系促进木质纤维素原料降解的方法,此方法在过硫酸盐和纤维素酶低剂量的情况下依然具有较高的酶解效率。本发明试验结果发现MoS2是一种高效的硫酸根型活化剂,它对SO4‑∙的生成效率很高。其不仅表现出优异的性能,且在低剂量过硫酸盐和低剂量的酶加载量下反应2 h酶解效率极高,达到90%以上且不需要再次调节pH。
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公开(公告)号:CN111116938A
公开(公告)日:2020-05-08
申请号:CN202010013392.0
申请日:2020-01-07
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于木质素分离提取技术领域,具体涉及从木质纤维素原料中高效提取木质素的方法。所述方法包括以下步骤:将木质纤维素原料置于芬顿反应预处理体系中,处理6~72h;然后利用磨木法或者碱法对上述原料中的木质素进行分离提取;所述芬顿反应预处理体系为由亚铁化合物3~9mmol/L、过氧化物0.2~1.6mol/L、巯基化合物0~0.128mol/L组成的混合溶液。通过利用优化后的芬顿催化反应来促进木质纤维素原料中木质素的分离,从而得到结构更完整、分子量分布更集中的木质素,并能有效提高木质素的提取率。
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公开(公告)号:CN108048509A
公开(公告)日:2018-05-18
申请号:CN201810134844.3
申请日:2018-02-09
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效脱除木质纤维素非三素成分的预处理方法,包括如下步骤:S1将木质纤维素类生物质加入Fe2+溶液中,搅拌;S2加入过氧化氢水溶液,通过Fe2+和过氧化氢反应生成的羟自由基对木质纤维素实现氧化预处理。利用本发明对木质纤维素进行预处理,可最大程度脱除木质纤维素中的非三素成分,同时保持三素含量和基本结构不被破坏,实现木质纤维素全组分高值化利用。
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公开(公告)号:CN117343872A
公开(公告)日:2024-01-05
申请号:CN202311290957.X
申请日:2023-10-08
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N1/20 , C12N1/14 , C05F17/20 , C05F11/00 , C12R1/685 , C12R1/645 , C12R1/07 , C12R1/125 , C12R1/01
Abstract: 本申请公开一种固氮与秸秆高效降解双功能复合菌剂、其制备方法及应用,所述复合菌剂是由巴西固氮螺菌(Azospirillam brasilense)、黑曲霉BLH‑22(Aspergillus niger)、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、枯草芽孢杆菌R0‑2(Bacillus subtilis)和芽孢杆菌D‑51(Bacillus sp.)组成。在室温条件下,本发明中的双功能复合菌剂秸秆降解效率较秸秆降解单功能菌剂提高了60.0%~67.3%,同时双功能微生物菌剂的添加使发酵体系中氮素的含量较秸秆降解单功能菌剂提高30.0%~42.7%。本发明双功能复合菌剂应用于秸秆还田过程,能够显著提高土壤中氮素含量和还田秸秆的降解速率。
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公开(公告)号:CN111118080B
公开(公告)日:2022-11-15
申请号:CN202010013540.9
申请日:2020-01-07
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12P19/00
Abstract: 本发明属于木质纤维素预处理技术领域,具体涉及基于纳米Fe3O4的木质纤维素预处理体系及其应用。所述预处理体系的有效成分由以下组分组成:Fe3O40.1~4g/L,过氧化合物0.1~5mol/L,巯基化合物0~0.05mol/L;所述过氧化物为过氧化氢或过氧化钠中任一种或两种混合物;所述巯基化合物为巯基乙酸、巯基丙酸、巯基乙酸酯、巯基丙酸酯中任一种或两种任意比例的混合物。利用纳米Fe3O4将芬顿催化反应与木质纤维素降解相结合,克服了现有技术中芬顿催化反应中铁盐不能回收利用的问题,有效提高了木质纤维素的降解效率,降低了芬顿催化反应的成本。
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公开(公告)号:CN114606209A
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN202011399467.X
申请日:2020-12-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于酶工程技术领域,具体涉及一种热稳定性高的突变体Cblac‑Mut8漆酶。本发明通过设计得到一种热稳定性强的突变体Cblac‑Mut8漆酶;经酶学性质研究,该酶最适温度为60℃,最适pH=4.0。在50℃时,Cblac‑Mut8酶活半衰期达到48h以上;在60℃时,Cblac‑Mut8酶活半衰期也可达到26.6h。而且,与Cblac漆酶(WT)相比,50℃时突变体Cblac‑Mut8的催化活性(kcat/Km)比WT提高了9.5倍,对于温度的耐受性更强,催化活性更高。本发明的技术效果与现有技术相比,所得突变体Cblac‑Mut8对孔雀石绿的降解能力强于大多数已报到漆酶,是一种具有很高工业应用前景的漆酶。
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