一种土壤微生物cDNA文库的构建方法

    公开(公告)号:CN102418151A

    公开(公告)日:2012-04-18

    申请号:CN201110277886.0

    申请日:2011-09-19

    Abstract: 本发明提供了一种土壤微生物cDNA文库的构建方法,本发明的构建方法先将总RNA逆转录成单链的cDNA,单链cDNA的5’端经去磷酸化后与5’端磷酸化修饰的接头1连接,再将5’端连有接头的cDNA进行磷酸化反应,反应后的cDNA的3’端与接头2连接,获得5’、3’端分别连接有接头的cDNA,采用与接头部分序列互补的寡核苷酸作为引物对cDNA进行扩增,从而获得土壤微生物的双链cDNA,将此双链cDNA与克隆载体pMD-18T连接后转化大肠杆菌感受态细胞,最终获得土壤微生物的cDNA文库。本发明构建的土壤微生物cDNA文库库容量较大,可以用来筛选感兴趣的目的基因,以及后续的基因、蛋白互作分析。

    萜类生物除草剂
    13.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101361482A

    公开(公告)日:2009-02-11

    申请号:CN200810071837.X

    申请日:2008-09-22

    Abstract: 一种萜类生物除草剂为水剂,含有5种含氧萜类化合物,分别为:(-)-香芹醇(C10H16O)、(+)-香芹酮(C10H14O)、(-)-薄荷酮(C10H18O)、(-)-香芹基乙酸(C12H18O2)和(+)-雪松醇(C15H26O)。本发明所使用的萜类物质均是植物自身代谢过程中分泌的物质,无毒害;采用组合配方,比使用单一物质的抑草效果更好,而且起抑草作用浓度低。本发明的萜类生物除草剂具有高效无毒,对人体和动植物安全等优点。

    一种有效垂钓水稻启动子DNA结合蛋白的方法

    公开(公告)号:CN109517029A

    公开(公告)日:2019-03-26

    申请号:CN201811420354.6

    申请日:2018-11-26

    Abstract: 本发明提供一种有效垂钓水稻启动子DNA结合蛋白的方法,包括利用含有NP-40,NaCl,PMSF等的蛋白提取缓冲液提取水稻叶片天然总蛋白,进一步用生物素标记引物并扩增启动子DNA,将启动子DNA与链霉亲和素偶联的磁珠孵育,在此基础上,将启动子DNA与磁珠的复合物与水稻叶片天然总蛋白孵育,得到与启动子DNA结合的蛋白。本方法适用于水稻不同品种的启动子DNA结合蛋白的研究,也可用于研究不同植物启动子DNA的结合蛋白。建立了一种高效、简易获得植物启动子DNA结合蛋白的技术。

    一种快速提取植物叶片总蛋白的方法

    公开(公告)号:CN109180793A

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201811420355.0

    申请日:2018-11-26

    Abstract: 本发明提供一种快速提取植物叶片总蛋白的方法,包括先将植物叶片在液氮条件下用竹签手工捻转研磨以快速破碎,进一步加入含有SDS和β-巯基乙醇的裂解液,于100℃条件下裂解细胞游离蛋白,最后常温离心获得蛋白溶液,用于SDS-PAGE电泳及下游的相关试验。本方法适用于拟南芥、烟草、水稻等多种植物叶片总蛋白的提取,建立了一种操作流程简易、制备样品快速、总量高的提取技术,能够为供体植物目标蛋白的快速检测提供重要基础。

    一种利用稻秆粉加粘细菌抑制稻田杂草生长的方法

    公开(公告)号:CN104663328A

    公开(公告)日:2015-06-03

    申请号:CN201510123478.8

    申请日:2015-03-20

    Abstract: 本发明提供一种利用稻秆粉加粘细菌抑制稻田杂草生长的方法,包括先将干稻秆粉碎过筛后撒施于田块;采用兔粪诱导法从稻田土壤中诱导分离、纯化粘细菌并进行扩大培养,并与灭菌的碎兔粪进行混合后,浇洒于撒施稻草粉的田块,稻草粉与粘细菌相互作用抑制稻田杂草生长,通过这些技术建立了一种操作流程简易,成本低,生态安全性好的稻田除草新方法,能够为稻田绿色安全除草利用开发提供借鉴。

    一种土壤微生物cDNA文库的构建方法

    公开(公告)号:CN102418151B

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201110277886.0

    申请日:2011-09-19

    Abstract: 本发明提供了一种土壤微生物cDNA文库的构建方法,本发明的构建方法先将总RNA逆转录成单链的cDNA,单链cDNA的5’端经去磷酸化后与5’端磷酸化修饰的接头1连接,再将5’端连有接头的cDNA进行磷酸化反应,反应后的cDNA的3’端与接头2连接,获得5’、3’端分别连接有接头的cDNA,采用与接头部分序列互补的寡核苷酸作为引物对cDNA进行扩增,从而获得土壤微生物的双链cDNA,将此双链cDNA与克隆载体pMD-18T连接后转化大肠杆菌感受态细胞,最终获得土壤微生物的cDNA文库。本发明构建的土壤微生物cDNA文库库容量较大,可以用来筛选感兴趣的目的基因,以及后续的基因、蛋白互作分析。

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