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公开(公告)号：CN118703595A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202411048516.3
申请日：2024-08-01
Applicant: 河南工业大学
Abstract: 本发明公开了一种富含糖脂类表面活性剂体系中脂肪酶活力的测定方法。利用微生物合成糖脂类生物表面活性剂过程中，在培养发酵所得发酵液中加入有机溶剂进行萃取，然后超声处理、离心分离；分离后所得含有脂肪酶的水相用超纯水进行稀释，取稀释后的水相与反应底物进行混合、反应，加入无水乙醇终止反应，然后离心、测定410nm下的吸光度并计算得到对硝基苯酚浓度；最后根据脂肪酶活力计算公式计算得到脂肪酶活力。采用本发明测定含糖脂的酶液中脂肪酶活力，测得酶活与不含糖脂类表面活性剂的体系中脂肪酶活力基本无差别，表明本发明方法对含糖脂类表面活性剂的酶液中酶活测定有广泛适用性和稳定性。
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公开(公告)号：CN117210438B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202311371681.8
申请日：2022-12-14
Applicant: 江苏耀海生物制药有限公司
Abstract: 本发明提供一种突变的核糖核酸酶R(RNase R)及其应用。本发明通过对大肠杆菌核糖核酸酶RNase R位点突变进行创造性地选择和筛选，提供了10种突变的核糖核酸酶R，获得相对于亲本酶活显著提高的突变体T495E、A246E、K457F、A246F、D281F、D122L。其中突变体T495E酶活提高最显著，相对酶活提高了37.48％，其他突变体酶活分别提高了24.74％、21.74％、10.04％、10.34％、6.75％。本发明还提供高表达核糖核酸酶RNase R的重组大肠杆菌，用于实现RNase R突变体的高效生产，具有良好的工业应用前景。本发明提供的酶活提高的核糖核酸酶R突变体适合工业上大规模制备mRNA，特别是在降解线性RNA或生产circRNA相关领域中的应用。
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公开(公告)号：CN118240914A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410309857.5
申请日：2023-09-09
Applicant: 南京鸿明生物科技有限公司 , 宜明(苏州)细胞生物科技有限公司
Abstract: 本文提供了一种检测RNA加帽效率的方法，包括如下步骤：1)采用脱氧核酶DNAzyme(10‑23)处理所述RNA，生成带有帽结构的RNA片段以及不带有所述帽结构的对应RNA片段；以及2)检测所述带有帽结构的RNA片段和所述对应RNA片段之间的比例关系，以确定所述加帽效率，其中所述脱氧核酶DNAzyme(10‑23)的两结合臂长度独立地选自11、12、13、14和15nt。本文还提供了上述脱氧核酶DNAzyme(10‑23)以及包括上述脱氧核酶DNAzyme(10‑23)的RNA加帽效率检测试剂盒。
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公开(公告)号：CN118240913A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202310271163.2
申请日：2023-03-15
Applicant: 深圳先进技术研究院
Abstract: 本发明涉及群体感应猝灭酶及其筛选方法和应用。该群体感应猝灭酶的筛选方法，包括如下步骤：构建携带待筛酶基因的待筛转染质粒；向两组第一哺乳动物细胞中分别加入待筛转染质粒和对照转染质粒进行转染，然后加入群体感应信号分子继续培养，培养结束后收集上清，得到待筛组上清及对照组上清；向两组第二哺乳动作细胞中均加入Receiver进行转染，然后分别加入待筛组上清及对照组上清继续培养，培养结束后收集细胞，得到待筛组细胞及对照组细胞；对待筛组细胞及对照组细胞进行荧光值检测和比较，若待筛组细胞的荧光值小于对照组细胞的荧光值，则待筛酶为群体感应猝灭酶。上述群体感应猝灭酶的筛选方法能够获得灵敏度较高的群体感应猝灭酶。
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公开(公告)号：CN113584125B
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202110855268.3
申请日：2021-07-28
Applicant: 德赛诊断系统(上海)有限公司
Abstract: 本发明公开了一种液态稳定5’‑核苷酸酶校准品，所述校准品的组分包括缓冲液、稳定剂、防腐剂、5’‑核苷酸酶。本发明还公开了一种5’‑核苷酸酶检测试剂盒，所述试剂盒包括5’‑核苷酸酶R1试剂、5’‑核苷酸酶R2试剂。所述5’‑核苷酸酶R1试剂为酶反应系统，由第一缓冲液、稳定剂、第一防腐剂、4‑氨基安替比林、酶激活剂、嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)、黄嘌呤氧化酶(XOD)和过氧化物酶(POD)组成；所述5’‑核苷酸酶R2试剂为显色系统，由第二缓冲液、第二防腐剂、肌苷‑5'‑磷酸二钠盐、β‑甘油磷酸钠和Trinder显色底物组成。本发明还公开了上述5’‑核苷酸酶检测试剂盒在测定5’‑核苷酸酶中的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117965682A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202311759558.3
申请日：2023-12-19
Applicant: 临沂大学
IPC: C12Q1/44 , C12Q1/6818
Abstract: 本发明提供了一种新型双酶驱动DNA纳米步行器及其在酶活性监测、成像中的用途，属于生物化学分析技术领域。本发明提供的DNA纳米步行器可实现两种酶活性的“顺次”监测，极大程度的降低单一酶活性监测或多种酶活性平行监测带来的信号假阳性结果，为酶活性相关的疾病精准诊断提供可靠的依据；同时拓展了DNA纳米技术的应用领域，促进酶活性监测等相关新方法、新技术的探索与发展。
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公开(公告)号：CN117904248A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410072246.3
申请日：2024-01-18
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明提供了一种基于体外转录系统的药效测试用人工细胞及其构建方法和应用，属于生物医药技术领域。一种基于体外转录系统的药效测试用人工细胞，包括膜材和包裹在膜材中的反应试剂；所述反应试剂包括锤头状核酶的双链DNA或对应的DNA正义链和DNA反义链、T7RNA聚合酶、修饰荧光基团和淬灭基团同时含锤头状核酶底物序列的分子信标、T7反应缓冲液和切割缓冲液。本发明开发一种新型的耐药性人工细胞用于体外抗肿瘤药物的效能检测，能够直观分析各种抗肿瘤药物在作用癌细胞后，膜蛋白协同作用产生的耐药水平。
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公开(公告)号：CN110923292B
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN201911116792.8
申请日：2019-11-15
Applicant: 中山市创艺生化工程有限公司
IPC: C12Q1/44
Abstract: 本发明公开了一种血清脂肪酶检测试剂盒及其制备方法与应用，所述试剂盒中含有试剂R1和试剂R2，所述试剂R2中含有以下组分：pH为5.5的酒石酸缓冲液、1，2‑二月桂宗甘油‑3‑戊二酸‑(6’‑甲基试卤灵)‑酯、甘露醇、曲拉通‑100、DMSO、正丙醇、卵磷脂和BSA。该试剂盒线性范围宽(10～700U/L)、成本低、稳定性好且具有较高的灵敏度，具有良好的市场推广应用前景。
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公开(公告)号：CN117106852B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202311133156.2
申请日：2023-09-04
Applicant: 济宁市兖州区检验检测中心
Abstract: 本发明提供了一种快速检测农产品农药残留的检测方法及其应用，包括将农残提取液、羧酸酯酶溶液、如式Ⅰ所示底物孵育反应后检测650~690 nm的荧光响应信号，建立有机磷农药浓度与反应后溶液荧光响应信号的标准曲线，快速检测农产品有机磷农药残留。本发明的快速检测农产品农药残留的检测方法具有更好的准确性和灵敏度，而且检出限低。本发明的快速检测农产品农药残留的检测方法检测简单，无需气相色谱、高效液相色谱等高昂仪器，并且检测的检出限、灵敏度并不弱于色谱方法，检测成本低，而且检测时间短，非常适用于农产品的农药残留达标检测。
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公开(公告)号：CN117512060A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202311752311.9
申请日：2023-12-19
Applicant: 百林科生物检测(江苏)有限公司
Abstract: 本发明属于分析化学技术领域，采用一种含有抑制RNase活性成分的缓冲液中RNase的检测方法，包括以下步骤：1)工作液的配制；2)0.1X Buffer的配制；3)标准曲线制作；4)待测样品的前处理：将待样品用0.1X Buffer稀释成原体积的20倍，得到样品工作液；5)将样品工作液加入到酶标板的孔中，再加入一定量工作液；将酶标板放置于恒温振荡器中，振荡孵育一定时间后放置于酶标仪中读取荧光强度，通过标准曲线计算RNase的浓度。该检测方法操作简便、灵敏度高、消耗试剂少检测成本低、可批量操作性大、效率高，能够检测到产品中RNase真实水平，减少后续生物制品生产过程中RNase污染的风险。
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