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公开(公告)号：CN112877465A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110284668.3
申请日：2021-03-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉不同组织的荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。该荧光定量内参基因为UBI、CYP和SDH1基因，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。本发明通过柳杉转录组数据筛选了12个候选内参基因基因序列，利用三款内参基因稳定性评测软件对候选内参基因的稳定性进行评估，获得了柳杉不同组织的实时荧光定量PCR的最适基因UBI、CYP和SDH1。并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，并提高了检测结果的可信度。
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公开(公告)号：CN111139253B
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN202010069453.5
申请日：2020-01-20
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种柳杉CfCCR基因及其应用，属于植物分子生物学和基因工程技术领域。本发明的柳杉木质素合成调控CfCCR基因具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。CfCCR基因是木质素合成特异途径的关键限速酶，通过编码蛋白调节植物中合成木质素的相关基因表达，对于木质素的生物合成以及抗逆具有重要的作用。转CfCCR基因的烟草，木质素表达增多，细胞壁发达。因此，可以通过表达CfCCR基因改变柳杉或其它植物茎中木质部细胞壁厚度，从而增加木材密度，提高木材的品质和质量以及植物抗逆性。
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公开(公告)号：CN104221864B
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201410473166.5
申请日：2014-09-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种柳杉无性系离体生根培养方法，包括以下步骤：1）对组织培养材料进行消毒和定瓶；2）将组织培养材料接入继代增殖培养基进行继代增殖培养，诱导分化出不定芽，然后将不定芽转入MS培养基上进行伸长培养；其中，继代增殖培养基配方为DCR+1.0mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA＋3%蔗糖；3）当不定芽伸长到2～3cm时，转入诱导生根培养基培养，得生根试管苗；诱导生根培养基以1/2DCR+0.05~0.2mg/L IBA+0.05~0.2mg/L NAA＋蔗糖2%；4）移栽生根试管苗。该方法以萌条为组织培养材料，通过继代增殖培养进行不定芽诱导；当不定芽伸长到2～3cm时，以1/2DCR为基本培养基，添加植物生长调节剂进行根诱导，通过本方法生根率平均为84%，最高可达93.3%，平均每株苗的生根数目达到5.7条，移栽成活率达平均86%以上。
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公开(公告)号：CN104221864A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410473166.5
申请日：2014-09-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种柳杉无性系离体生根培养方法，包括以下步骤：1）对组织培养材料进行消毒和定瓶；2）将组织培养材料接入继代增殖培养基进行继代增殖培养，诱导分化出不定芽，然后将不定芽转入MS培养基上进行伸长培养；其中，继代增殖培养基配方为DCR+1.0mg/L6-BA+0.05mg/LNAA＋3%蔗糖；3）当不定芽伸长到2～3cm时，转入诱导生根培养基培养，得生根试管苗；诱导生根培养基以1/2DCR+0.05～0.2mg/LIBA+0.05～0.2mg/LNAA＋蔗糖2%；4）移栽生根试管苗。该方法以萌条为组织培养材料，通过继代增殖培养进行不定芽诱导；当不定芽伸长到2～3cm时，以1/2DCR为基本培养基，添加植物生长调节剂进行根诱导，通过本方法生根率平均为84%，最高可达93.3%，平均每株苗的生根数目达到5.7条，移栽成活率达平均86%以上。
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公开(公告)号：CN111763683B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202010616253.7
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种柳杉基因CfICE1及其应用，属于基因工程技术领域。本发明从柳杉组织中克隆得到一个新的ICE基因，命名为CfICE1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过构建表达载体PBI‑CfICE1转拟南芥进行功能验证，发现CfICE1在拟南芥中超表达促使拟南芥抗寒性增强；通过qRT‑PCR技术对CfICE1基因在不同柳杉组织及不同低温胁迫下表达量进行分析，结果表明4℃时CfICE1在柳杉的种子和幼叶中表达量最高。以上结果表明CfICE1基因参与柳杉生长发育和低温胁迫的响应，并可应用在植物的抗逆基因工程改良中，应用前景广阔。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114106122A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111382740.2
申请日：2021-11-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了一种柳杉MYB转录因子CfMYB1基因及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明所克隆的转录因子CfMYB1，属于MYB转录因子家族中的R2R3‑MYB转录因子。本发明所克隆的MYB基因其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其所编码蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。本发明通过基因克隆、序列分析、表达载体构建及转基因功能验证，揭示了柳杉CfMYB1转录因子的序列信息及生物学功能，并提供了一种应用该基因的方法，过表达该基因可使转基因植株的高度、叶片厚度、茎的粗细降低，表明本发明所克隆的基因将在柳杉木材性状改良及园艺技术领域中发挥重要的作用。
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公开(公告)号：CN113897374A
公开(公告)日：2022-01-07
申请号：CN202111381940.6
申请日：2021-11-19
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种柳杉CfMYB4基因及其应用，属于植物分子生物学技术领域。本发明所克隆的CfMYB4基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过基因克隆，多重序列比对，系统进化分析及功能验证，证实了CfMYB4基因的进化关系及生物学功能，并提供了一种该基因在促进木质素合成及次生壁形成的应用手段。本发明所克隆的CfMYB4基因将在柳杉材性相关遗传改良中发挥重要的作用。
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公开(公告)号：CN111707713A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010617581.9
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种柳杉抗寒性快速鉴定与评价的方法，属于作物学技术领域。该方法主要包括以下步骤：1)待测柳杉无性系的扦插繁殖；2)柳杉扦插苗的低温处理；3)测定低温胁迫柳杉叶片的细胞膜透性、半致死温度、丙二醛、SOD、可溶性蛋白含量的变化情况；4)抗寒性评价，从而确定待测柳杉抗寒性强弱；5)抗寒性验证与进一步筛选。本发明在综合评价柳杉抗寒性的模式的基础之上，发现通过-4℃低温胁迫柳杉无性系离体侧枝，测定相对电导率可以无损伤、快速判断80％以上柳杉无性系的抗寒性，因此进一步提出了一种快速的柳杉抗寒性鉴定与评价方法，对于柳杉种质资源的利用、种植等合理地规划布局及抗寒性育种具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN108812312A
公开(公告)日：2018-11-16
申请号：CN201810600276.1
申请日：2018-06-11
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种柳杉茎段外植体愈伤组织诱导及植株再生方法，该方法包括以下步骤：选取柳杉组培苗茎段为组织培养材料，将组培苗茎段接入到愈伤组织诱导培养基；待愈伤组织诱导出来以后，将愈伤组织接入到分化培养基上进行不定芽的诱导；不定芽诱导出来以后转入DCR基本培养上进行不定芽和不定根的生长。与现有技术中的柳杉组培方法相比，本发明的柳杉组培苗茎段再生植株培养方法优势在于：有效解决了柳杉外植体在组织培养条件下通过愈伤组织途径植株再生问题，实现了柳杉稳定高效的组培体系，为加快柳杉组培苗植株再生提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN108651029A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810600277.6
申请日：2018-06-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种柳杉扦插繁殖方法，包括：1)插穗预处理；2)采用外源激素NAA50～150ppm+IBA100～300ppm，浸泡插穗0.5～1.5h；3)扦插；4)扦插后管理。本发明的柳杉扦插繁殖方法，试验证实，采用外源激素NAA150ppm+IBA100ppm，浸泡插穗1.5h条件下，柳杉扦插生根率可达98.33％，提高扦插成活率的同时并能促进根系生长，方法简单可行，为营造柳杉速生丰产林提供可靠的苗木来源。
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