公开(公告)号：CN105974022B

公开(公告)日：2018-09-25

申请号：CN201610347503.5

申请日：2016-05-20

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐勇 ,  盛烨泉 ,  朱均均 ,  连之娜 ,  余世袁 ,  勇强 ,  欧阳嘉

IPC: G01N30/02

Abstract: 本发明公开了一种基于正相和反相高效液相色谱联用测定5‑羟甲基糠醛及其衍生物的方法。本发明是基于正相和反相高效液相色谱联用测定5‑羟甲基糠醛、2，5‑呋喃二甲醇、2，5‑呋喃二甲醛、5‑羟甲基‑2‑糠酸、5‑甲酰基‑2‑糠酸和2，5‑呋喃二甲酸的方法。采用Bio‑Rad Aminex HPX‑87H(300mm×7.8mm)正相色谱柱，通过硫酸等度洗脱，使用示差折光检测器，温度为35℃，定量测定2，5‑呋喃二甲醇、2，5‑呋喃二甲酸、5‑羟甲基糠醛和2，5‑呋喃二甲醛；采用Zorbax Eclipse XDS‑C18(300mm×4.6mm)反相色谱柱，通过乙腈和醋酸二元梯度洗脱，使用可变波长检测器，紫外波长为275nm，定量测定5‑甲酰基‑2‑糠酸和5‑羟甲基‑2‑糠酸。通过正相和反相高效液相色谱联用，定量测定6种物质，显著提高了对上述呋喃类化合物的分离度及检测准确度。

公开(公告)号：CN103913532A

公开(公告)日：2014-07-09

申请号：CN201410147268.8

申请日：2014-04-14

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 勇强 ,  杨磊 ,  李鑫 ,  陈牧 ,  连之娜 ,  徐勇 ,  余世袁

IPC: G01N30/60 ,  G01N30/64 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明公开了一种利用离子交换色谱法测定N-乙酰氨基葡萄糖的方法。在离子交换色谱仪上，采用DionexAminoPacPA10色谱柱，柱温30℃，以10mmol/L氢氧化钠为流动相，电导检测器检测，采用外标法绘制N-乙酰氨基葡萄糖的浓度-峰面积标准曲线，计算得到N-乙酰氨基葡萄糖的含量。本发明首次建立了高效液相离子交换色谱精确定量测定N-乙酰氨基葡萄糖的方法，采用DionexAminoPacPA10色谱柱，通过10mmol/L氢氧化钠等度洗脱显著提高了N-乙酰氨基葡萄糖的分离度及检测效率。该方法精密度高、重现性好、准确度高、能够实现对样品的直接检测，无需对样品进行其他前处理，大大减少分析时间、提高检测方法的准确性、方便可靠，对于N-乙酰氨基葡萄糖产品的检测评价和推广应用具有重要意义。

公开(公告)号：CN102590370B

公开(公告)日：2013-05-01

申请号：CN201210012963.4

申请日：2012-01-16

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐勇 ,  余世袁 ,  勇强 ,  王荥 ,  朱均均 ,  李鑫 ,  周晓青 ,  连之娜

IPC: G01N30/02

Abstract: 本发明公开了一种同步测定木质纤维原料反应体系中的单糖、糖醛酸和糖酸的方法，包括：对木质纤维原料反应体系进行预处理得待测液；利用高效液相离子交换色谱，采用积分脉冲安培检测法和色谱峰面积积分法测定单糖、糖醛酸和糖酸标样，得标准方程；利用高效液相离子交换色谱测定待测液，利用标准方程，计算出各组分含量；采用高效液相色谱法对待测液中木糖和甘露糖的进行分离和定量，并对高效液相离子交换色谱的结果进行修正。本发明首次建立了单糖、糖醛酸和糖酸的同步精确定量测定的方法，显著提高了8种物质的分离度及检测效率，结合普通高效液相色谱法可实现对木质纤维原料反应体系中9种物质的同步精确定量测定，对于木质纤维原料生物炼制过程中物质变化、产品和中间产物的成分分析和测定具有重要的意义。

公开(公告)号：CN102250866B

公开(公告)日：2012-08-22

申请号：CN201110172973.X

申请日：2011-06-24

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 李鑫 ,  单宗星 ,  余世袁 ,  勇强 ,  欧阳嘉 ,  徐勇 ,  宋向阳 ,  陈牧 ,  连之娜 ,  朱均均

IPC: C12N11/08

Abstract: 本发明公开了一种拟水相载体固定化木聚糖酶，由如下步骤制备得到：将单甲氧基聚乙二醇与活化剂反应，得到烷氧基醇活化酯；将木聚糖酶与烷氧基醇活化酯反应制备拟水相载体固定化木聚糖酶，再经凝胶过滤色谱纯化、冷冻干燥即得。本发明还公开了利用上述拟水相载体固定化木聚糖酶制备低聚木糖的方法。本发明的优点在于：水溶性载体固定化酶与不溶性底物之间的有效接触，呈现均相催化反应，提高转化效率；烷氧基醇具有稳定酶的作用，保证固定化酶维持高酶活力；利用烷氧基醇的成两水相特征，自萃取回收固定化酶，实现拟水相载体固定化酶、底物、产物的自主分离；转化过程的可控性，使生成的低聚木糖聚合度分布更为合理，提高产品品质。

公开(公告)号：CN102590370A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210012963.4

申请日：2012-01-16

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐勇 ,  余世袁 ,  勇强 ,  王荥 ,  朱均均 ,  李鑫 ,  周晓青 ,  连之娜

IPC: G01N30/02

Abstract: 本发明公开了一种同步测定木质纤维原料反应体系中的单糖、糖醛酸和糖酸的方法，包括：对木质纤维原料反应体系进行预处理得待测液；利用高效液相离子交换色谱，采用积分脉冲安培检测法和色谱峰面积积分法测定单糖、糖醛酸和糖酸标样，得标准方程；利用高效液相离子交换色谱测定待测液，利用标准方程，计算出各组分含量；采用高效液相色谱法对待测液中木糖和甘露糖的进行分离和定量，并对高效液相离子交换色谱的结果进行修正。本发明首次建立了单糖、糖醛酸和糖酸的同步精确定量测定的方法，显著提高了8种物质的分离度及检测效率，结合普通高效液相色谱法可实现对木质纤维原料反应体系中9种物质的同步精确定量测定，对于木质纤维原料生物炼制过程中物质变化、产品和中间产物的成分分析和测定具有重要的意义。

公开(公告)号：CN101624574A

公开(公告)日：2010-01-13

申请号：CN200910184453.3

申请日：2009-08-06

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 欧阳嘉 ,  李鑫 ,  韩承业 ,  宋向阳 ,  陈牧 ,  连之娜 ,  勇强 ,  徐勇

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N9/42 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种表达高稳定性木聚糖酶的酵母工程菌，其保藏号为CCTCC NO：M 209148，该酵母工程菌是在分泌型巴氏毕赤酵母重组菌株中转化有重组突变质粒pPIC9KXYN17，所述的重组突变质粒pPIC9KXYN17以三磷酸甘油醛脱氢酶基因为启动子，并含有木聚糖酶基因和ZeocinTM抗性基因。本发明还公开了上述酵母工程菌的构建方法和应用。该重组工程菌具体表现为比酶活由203IU/mg增加到856IU/mg；最适反应温度由50℃提高到60℃；70℃半衰期由1分钟提高到14分钟，在50℃、60min下的pH稳定范围由5.0～7.0扩展到4.0～10.0。