基于回文分子信标检测ATP的生物传感器及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110609020B

    公开(公告)日:2021-10-01

    申请号:CN201910754057.3

    申请日:2019-08-15

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于回文分子信标检测三磷酸腺苷(ATP)的生物传感器,包括回文分子信标MB、ATP适配体(劈开的适配体探针AP1、AP2)、目标物ATP、Bst DNA聚合酶、UDG、核酸内切酶IV和缓冲液;基于核酸适配体与目标物的特异性识别,从而使两个劈开的适配体片段尾部序列邻近,将回文分子信标MB的发夹结构打开产生荧光,与此同时预锁定的回文序列被释放,进行分子间的杂交,从而触发自发聚合、修复、内切、循环过程,实现荧光信号的放大,从而构建了适体生物传感器,该传感器反应只需要一步,因此具有检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高等优点。

    基于核酸适配体检测沙门氏菌的生物传感器及其检测方法

    公开(公告)号:CN109596592B

    公开(公告)日:2021-04-20

    申请号:CN201910091120.X

    申请日:2019-01-30

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于核酸适配体检测沙门氏菌的生物传感器,包括适配体Apt、模板T、发卡探针H1、发卡探针H2、phi29、沙门氏菌、Nt.Alwl内切酶和缓冲液;基于核酸适配体与目标物的特异性识别,将Apt与T形成的桥型结构打开,利用Phi 29聚合酶的链延伸功能打开H2产生荧光,以及3’翘起部分特异性消化实现目标物的循环放大,在Nt.Alwl内切酶的协助下,产生大量能打开H1的Trigger链,而Trigger进一步循环实现荧光信号的放大,从而构建了适体生物传感器,该传感器反应只需要一步,因此具有检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高等优点。

    一种检测DNA糖基化酶UDG的荧光生物传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN109444105B

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201811621278.5

    申请日:2018-12-28

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于聚合酶协助反馈滚环扩增和内切酶放大荧光法检测DNA糖基化酶UDG的荧光生物传感器。为了解决以上现有技术中检测UDG的方法特异性和灵敏度都比较低的问题。一种基于反馈滚环扩增技术检测UDG的生物传感器,将phi29聚合酶、核酸内切酶IV的配合实现滚环放大作用,以及荧光基团与猝灭基团的荧光共振能量转移,均相反应混合液。制备方法:环形模板及复合探针的构建;反馈滚环放大信号、荧光检测;利用了UDG酶对碱基U的特异性水解,利用这种特殊反应可以精准地测定UDG,同时还可以避免干扰的发生;利用核酸内切酶Ⅳ循环放大,实现信号放大的作用。

    一种检测多氯联苯的生物传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN111521808A

    公开(公告)日:2020-08-11

    申请号:CN202010319559.6

    申请日:2020-05-26

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于金纳米粒子的DNA分子机器检测多氯联苯(PCB)的生物传感器,发卡探针HAP1通过polyA修饰到纳米金的表面和HAP2、拱形探针(由Walker链和APT杂交成的双链)通过polyA修饰到纳米金的表面;基于目标物PCB对适配体的亲和力,破坏拱形探针,释放Walker核酸链,通过toehold介导打开HAP1,进而打开HAP2,从而把Walker链挤掉,挤掉的Walker链与其他的HAP1杂交,依次循环直至HAP2全部被打开,暴露出G‑rich序列,在存在血红素时形成G‑四联体/血红素DNA酶。G‑四联体/血红素类辣根过氧化物酶催化鲁米诺产生化学发光,从而构建了生物传感器;该传感器反应只需一步,检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高。

    一种无酶检测氨苄青霉素的电化学生物传感器及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110501411A

    公开(公告)日:2019-11-26

    申请号:CN201910874445.5

    申请日:2019-09-17

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于核酸适配体无酶检测氨苄青霉素的电化学生物传感器,属于电化学生物传感器技术领域。本发明基于目标诱导的核酸适配体构象变化及催化发夹自组装扩增(CHA)和链置换策略检测氨苄青霉素,实现了多重的信号放大,降低了检测限,提高了灵敏度,并且金电极简便、小型化、易携带、可多次使用;实现了目标物的,简单,灵敏的检测。制备方法简单,性能稳定,电极的重复性好,并且反应过程不需要酶参与,极大的降低了成本。故适用于食品安全中氨苄青霉素的检测和生物传感器产业化的实际应用。

    一种检测尿嘧啶-DNA糖基化酶的生物传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN109752362A

    公开(公告)日:2019-05-14

    申请号:CN201910022818.6

    申请日:2019-01-10

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于纳米金DNA分子机器与表面增强拉曼散射的生物传感器。为了解决以上现有技术中检测UDG活性的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高的问题。一种基于DNA分子机器表面增强拉曼散射检测UDG活性的生物传感器,将纳米金分子机器与表面增强拉曼相结合,均相反应混合液。制备方法:合成金纳米粒子;将Hairpin Probe和Track DNA以及拉曼染料修饰到金纳米粒子表面;将标记的纳米金溶液与均相反应溶液混合。利用了内切酶IV的特异性切割实现DNA分子机器开启,利用表面增强拉曼检测实现了高灵敏性检测;利用外切酶Ⅲ,实现了DNA分子机器的循环,起到了信号放大的作用。

    一种检测DNA糖基化酶UDG的荧光生物传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN109444105A

    公开(公告)日:2019-03-08

    申请号:CN201811621278.5

    申请日:2018-12-28

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于聚合酶协助反馈滚环扩增和内切酶放大荧光法检测DNA糖基化酶UDG的荧光生物传感器。为了解决以上现有技术中检测UDG的方法特异性和灵敏度都比较低的问题。一种基于反馈滚环扩增技术检测UDG的生物传感器,将phi29聚合酶、核酸内切酶IV的配合实现滚环放大作用,以及荧光基团与猝灭基团的荧光共振能量转移,均相反应混合液。制备方法:环形模板及复合探针的构建;反馈滚环放大信号、荧光检测;利用了UDG酶对碱基U的特异性水解,利用这种特殊反应可以精准地测定UDG,同时还可以避免干扰的发生;利用核酸内切酶Ⅳ循环放大,实现信号放大的作用。

    一种检测DNA甲基转移酶活性的荧光生物传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN109406477A

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201811632964.2

    申请日:2018-12-29

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于催化发夹自组装检测DNA甲基转移酶活性的荧光生物传感器,基于甲基化后的目标物与核酸探针特异性识别,利用催化发夹自组装不断形成三通路结构,同时循环放大Trigger,在三通路的末端,通过碱基互补配对结合含有荧光基团的Signal probe,最后利用了核酸内切酶IV的切割位点(AP位点),实现定位切割,释放荧光基团产生一定强度的荧光信号的生物传感器。该传感器具有检测速度快,检测限低,特异性高等优点,弥补了现有对DNA甲基化检测的不足,实现对甲基化的快速,准确的定量检测。

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